核酸的结构与功能

核酸的结构与功能第一页，共一百二十页，2022年，8月28日本章主要内容第一节核酸的结构、化学组成及功能

第二节核酸的结构与功能

第三节核酸的理化性质第四节核酸的研究方法

第二页，共一百二十页，2022年，8月28日教学目标1．掌握DNA和RNA在组分、结构和功能上的差异。2．了解核酸的结构和它们的性质、功能的关系。3．认识核酸在生物科学上的重要性和实践意义。第三页，共一百二十页，2022年，8月28日①元素组成：C、H、O、N、P等②基本单位：核苷酸核苷酸分子含N碱基磷酸五碳糖核苷第一节核酸的结构、化学组成及功能第四页，共一百二十页，2022年，8月28日核酸的组成核酸核苷酸磷酸核苷戊糖碱基水解核糖脱氧核糖嘌呤嘧啶

腺嘌呤鸟嘌呤胞嘧啶尿嘧啶胸腺嘧啶第五页，共一百二十页，2022年，8月28日核酸代表戊糖，对DNA而言为脱氧核糖，对RNA而言为核糖；

代表碱基

代表磷酸基核苷酸第六页，共一百二十页，2022年，8月28日90%以上分布于细胞核，其余分布于核外如线粒体，叶绿体，质粒等。分布于胞核、胞液。(deoxyribonucleicacid,DNA)(ribonucleicacid,RNA)脱氧核糖核酸

核糖核酸携带遗传信息，决定细胞和个体的基因型(genotype)。参与细胞内DNA遗传信息的表达。某些病毒RNA也可作为遗传信息的载体。第七页，共一百二十页，2022年，8月28日一、核苷酸的结构与组成第八页，共一百二十页，2022年，8月28日嘌呤腺嘌呤（A）鸟嘌呤（G）7NHN9NNNHO215843261.碱基嘌呤A、G第九页，共一百二十页，2022年，8月28日嘧啶

C、U、T尿嘧啶(U)51NHOON2346胞嘧啶ON1NH23456NH2胸腺嘧啶(T)CH3

第十页，共一百二十页，2022年，8月28日碱基的结构特征都具有芳香环的结构特征；嘌呤环和嘧啶环呈接近于平面的结构；有酮式—烯醇式（羟基）或胺式—亚胺式（氨基）互变异构。第十一页，共一百二十页，2022年，8月28日胺式

亚胺式互变异构第十二页，共一百二十页，2022年，8月28日酮式烯醇式互变异构第十三页，共一百二十页，2022年，8月28日RNADNA尿嘧啶U胸腺嘧啶T胞嘧啶C鸟嘌呤G腺嘌呤A

第十四页，共一百二十页，2022年，8月28日稀有碱基主要存在于RNA甲基化、氢化、硫化嘌呤——次黄嘌呤、1-甲基次黄嘌呤、

N2、N2-二甲基鸟嘌呤。嘧啶——5-甲基胞嘧啶、5-羟甲基胞嘧啶、二氢尿嘧啶、4-巯尿嘧啶

都是基本碱基的化学修饰型第十五页，共一百二十页，2022年，8月28日鸟嘌呤次黄嘌呤1-甲基次黄嘌呤第十六页，共一百二十页，2022年，8月28日第十七页，共一百二十页，2022年，8月28日2.戊糖核糖脱氧核糖第十八页，共一百二十页，2022年，8月28日3.核苷=戊糖+碱基嘌呤环上的N-9嘧啶环上的N-1腺嘌呤核苷（腺苷）OHOHOHOCH21’2’3’4’5’NNNN123456789CH3胞嘧啶脱氧核苷戊糖的C-1’。糖苷键第十九页，共一百二十页，2022年，8月28日

稀有核苷：

1、2’-0-甲基-核糖-核苷

2、稀有碱基DHU3、连接方式ψ

（假尿嘧啶核苷）第二十页，共一百二十页，2022年，8月28日假尿嘧啶核苷（Ψ）OHOHOHOCH21’2’3’4’5’1NHON23456

糖环与尿嘧啶环不是以N-C键相连，而是以C-C键相连——tRNA分子中特有的核苷稀有核苷O第二十一页，共一百二十页，2022年，8月28日4.核苷酸=核苷+磷酸5ˊ-核苷酸2ˊ

—3ˊ—POOCONNNNNH22’3’4’OOHOHH21’5’HO第二十二页，共一百二十页，2022年，8月28日核苷酸结构简式pN

2′–核苷酸3′–核苷酸5′–核苷酸Np

第二十三页，共一百二十页，2022年，8月28日H2OH2O碱基磷酸戊糖核苷键酯键HO第二十四页，共一百二十页，2022年，8月28日八种核苷酸M/单，D/二，T/三；P-磷酸DNA在单/二/三前加脱氧两字

如AMP称腺苷一磷酸(或腺苷酸）

dAMP称为脱氧腺苷一磷酸（脱氧腺苷酸）第二十五页，共一百二十页，2022年，8月28日甲基化修饰：“m”（methy-）修饰基团在碱基上：

—写在碱基左边修饰基团在核糖上：

—写在碱基右边右下脚：修饰基团数目右上脚：修饰位置

m3

G2,2,7第二十六页，共一百二十页，2022年，8月28日ATP5′1′焦磷酸5.核苷酸衍生物第二十七页，共一百二十页，2022年，8月28日环状核苷酸（cAMP）

3’5’cAMP在细胞内起传递细胞外信号的作用，被称为“第二信使”。第二十八页，共一百二十页，2022年，8月28日二、核苷酸的功能

构成核酸大分子参与物质代谢、能量代谢及其调节第二十九页，共一百二十页，2022年，8月28日第二节核酸的结构与功能

核酸分子是由核苷酸单体通过3’,5’-磷酸二酯键聚合而成的多核苷酸长链。

一级结构是指其核苷酸的排列顺序。一、核酸的一级结构第三十页，共一百二十页，2022年，8月28日DNA与RNA分子组成的比较磷酸

核糖C，UA，GRNA磷酸脱氧核糖C，TA，GDNA磷酸

戊糖嘧啶嘌呤链数双链单链第三十一页，共一百二十页，2022年，8月28日核酸链的表示方式//////OHHNHCH2HH2345//////OHHNHCH2HH2345//////OHHNHOHH2345OPOOO--OOPOOHCH2OOPOOOOPOO3’,5’-磷酸二酯键5’-Pi3’-OH1、字母式：ACGU2、线条式3、结构式脱氧核糖第三十二页，共一百二十页，2022年，8月28日二、DNA的高级结构与功能1953年，J.Watson和F.Crick

在前人研究工作的基础上，提出了著名的DNA双螺旋结构模型，并对模型的生物学意义作出了科学的解释和预测。1、DNA的二级结构第三十三页，共一百二十页，2022年，8月28日3′

5′

3′

5′1）DNA分子由两条反平等排列的脱氧核苷酸链组成，一条链5′

→3′，另一条链3′→5′。2）两条链均以“脱氧核糖－磷酸基团－”为，以右手螺旋方式围绕同一公共轴盘旋，螺旋直径为2.37nm，并形成大沟和小沟。（1）DNA的双螺旋结构2nm3.4nm小沟大沟3）碱基位于螺旋内侧，碱基平面与纵轴垂直，两条链上的碱基形成氢键，遵循互补配对原则：其中A=T,G≡C，A+G=T+C第三十四页，共一百二十页，2022年，8月28日5）氢键维持双螺旋的横向稳定性，碱基堆积力维持纵向稳定性，并更为重要。平面图4）、双螺旋直径2nm，每周10个碱基对，上升3.4nm，相邻碱基平面的距离为0.34nm，夹角36°第三十五页，共一百二十页，2022年，8月28日DNA的双螺旋结构稳定性稳定的作用力？

碱基堆积力

氢键

离子键不稳定的作用力？静电斥力

碱基分子内能第三十六页，共一百二十页，2022年，8月28日DNA的双螺旋结构的多态性Z型DNA左旋、细长

A型DNA短、左旋B型相对湿度92%时的DNA纤维第三十七页，共一百二十页，2022年，8月28日（2）

十字型结构第三十八页，共一百二十页，2022年，8月28日DNA的类型类型结晶状态螺距碱基距离每圈旋转

(nm)(nm)bp数方向A相对湿度75%2.80.25611右手

DNA钠盐B相对湿度92%3.40.3410右手

DNA钠盐C相对湿度66%3.10.3329.3右手

DNA锂盐Zd(GCGCGC)4.440.3712左手（2）第三十九页，共一百二十页，2022年，8月28日（3）

三链螺旋通常是一条同型寡核苷酸与寡嘧啶核苷酸-寡嘌呤核苷酸双螺旋的大沟结合：oligo(Py):oligo(Pu)—oligo(Py/Pu)第四十页，共一百二十页，2022年，8月28日T=A:A,C≡G：C+T=A:TC≡G：G★第三股与寡嘌呤之间同向平行，并按Hoogsteen配对第四十一页，共一百二十页，2022年，8月28日2、DNA的三级结构

DNA在二级结构基础上进一步扭曲盘旋形成的特定构象。

包括：不同二级结构单元间的相互作用单链与二级结构单元间的相互作用

DNA的拓扑特征

超螺旋是DNA三级结构的主要形式。第四十二页，共一百二十页，2022年，8月28日第四十三页，共一百二十页，2022年，8月28日A.真核细胞染色体的DNA念珠状三级结构3、DNA与蛋白质形成的复合物第四十四页，共一百二十页，2022年，8月28日DNA的存在形式第四十五页，共一百二十页，2022年，8月28日B.

原核生物以及真核生物细胞器环状DNA的超螺旋三级结构叶绿体中含有环状DNA线粒体中含有环状DNA细菌等原核生物质粒染色体第四十六页，共一百二十页，2022年，8月28日固定负超螺旋（右手拓扑结构）反之，则为正超螺旋自然界通常为负超螺旋。DNA形成三级结构及染色体的意义何在？压缩分子空间人体每个体细胞DNA长2m,细胞直径0.1mm,细胞核0.05mm环状DNA右旋第四十七页，共一百二十页，2022年，8月28日4、DNA的功能遗传物质第四十八页，共一百二十页，2022年，8月28日DNA与RNA分子组成的比较磷酸

核糖C，UA，GRNA磷酸脱氧核糖C，TA，GDNA磷酸

戊糖嘧啶嘌呤链数双链单链三、RNA的高级结构与功能

一级结构是指其核糖核苷酸的排列顺序。第四十九页，共一百二十页，2022年，8月28日核糖核酸（RNA）RNA为单链分子RNA主要负责DNA遗传信息的翻译和表达分子量比DNA小得多第五十页，共一百二十页，2022年，8月28日RNA的种类、分布、功能除了上述三种RNA外，细胞的不同部位存在的许多其他种类的小分子RNA，统称为非mRNA小RNA(smallnon-messengerRNAs,snmRNAs)。

核糖体RNA核内不均一RNA核内小RNA细胞核和胞液线粒体功能rRNAmRNAtRNAmtmRNAmttRNAHnRNASnRNASnoRNAscRNA/7SL-RNA核糖体组分转运氨基酸参与hnRNA的剪接、转运信使RNA转运RNA胞浆小RNA细胞核和胞液线粒体功能mtrRNA蛋白质合成模板rRNA的加工、修饰蛋白质内质网定位合成的信号识别体的组分核仁小RNA含量80％5％10-15％成熟mRNA的前体microRNA,mRNA微RNA抑制基因的表达第五十一页，共一百二十页，2022年，8月28日约占总RNA的10-15%在蛋白质生物合成中翻译AA信息、将相应AA转运到核糖核蛋白体每一个AA至少有一个相应的tRNA1、tRNATransferRNA第五十二页，共一百二十页，2022年，8月28日一级结构特点：约由73－93个核苷酸组成分子中含有较多的修饰成分（10-20%）3‘-末端都具有－CCA－OH的结构第五十三页，共一百二十页，2022年，8月28日tRNA是单链分子，其二级结构由部分双螺旋结构和环状突起构成三叶草形①氨基酸臂：由7对bp组成，富含G，末端为CCA，接受活化AA②二氢尿嘧啶环（D环）

由8－12个核苷酸组成③反密码环：识别密码子④额外环：大小是tRNA分类的重要指标⑤假尿嘧啶核苷-胸腺嘧啶核苷环（TΨC环）tRNA的二级结构第五十四页，共一百二十页，2022年，8月28日tRNA的三叶草型二级结构123叶子反密码子环

反密码子载运氨基酸臂稀有碱基D环TψC环额外环四环四臂第五十五页，共一百二十页，2022年，8月28日tRNA的三级结构第五十六页，共一百二十页，2022年，8月28日tRNA的三级结构：倒“L”形第五十七页，共一百二十页，2022年，8月28日①5´末端帽子结构：m7GpppNmP②3´末端有多聚腺苷酸尾巴结构(polyA)

③单顺反子（一条mRNA链上有一个编码区）（1）真核细胞mRNA第五十八页，共一百二十页，2022年，8月28日约占总RNA的5%。不同细胞的mRNA链长和分子量差异很大。其功能是将DNA的遗传信息传递到蛋白质合成基地–核糖核蛋白体。2、mRNAMessengerRNA第五十九页，共一百二十页，2022年，8月28日5′帽子密码子3′polyAm7Gppp-AUGGUG……………UAAAAAA…AA5′端非翻译区编码区3′非翻译区真核生物mRNA的共价结构第六十页，共一百二十页，2022年，8月28日帽子结构第六十一页，共一百二十页，2022年，8月28日帽子结构：识别翻译起始

polyA：维持mRNA的稳定性功能第六十二页，共一百二十页，2022年，8月28日原核生物mRNA为多顺反子，无修饰碱基。多顺反子mRNA(polycistronicmRNA)：一条mRNA链上有多个编码区（2）原核细胞mRNA第六十三页，共一百二十页，2022年，8月28日约占全部RNA的80%是核糖核蛋白体的主要组成部分功能与蛋白质生物合成相关。3、rRNARibosomeRNA第六十四页，共一百二十页，2022年，8月28日*rRNA的种类（根据沉降系数）真核生物5SrRNA28SrRNA5.8SrRNA18SrRNA原核生物5SrRNA23SrRNA16SrRNA第六十五页，共一百二十页，2022年，8月28日所有rRNA分子中都有大量的链内互补序列，可以形成链内碱基配对，使得rRNA高度折叠。rRNA二级结构中存在大量的茎环结构，且对同一沉降系数的不同物种来源的rRNA来说，虽然它们的一级结构同源性不同，但二级结构却非常相似。第六十六页，共一百二十页，2022年，8月28日4、其他小RNA及RNA组学非mRNA小RNA（smallnon-messengerRNA,snmRNA)：除了tRNA,mRNA,rRNA外，）在细胞的不同部位还存在着许多其他各类的小分子RNA，通称为snmRNA。RNA组学（RNomics）：研究细胞中snmRNA种类、结构和功能，snmRNA表达谱的变化及其与功能的关系。第六十七页，共一百二十页，2022年，8月28日一、核酸的解离与溶解度1、分子量大，两性电解质，通常表现为酸性；2、DNA的pI为4-4.5,RNApI为2-2.5；3、溶解性：均微溶于水；不溶于一般有机溶剂，在70%乙醇中沉淀；4、粘度：DNA粘度大，而RNA粘度小5、DNA对碱稳定，而RNA被稀碱水解。第3节核酸的理化性质

第六十八页，共一百二十页，2022年，8月28日二、核酸的粘度核酸粘度大小规律：DNA>RNA

双链DNA(dsDNA)>单链DNA(SSDNA)第六十九页，共一百二十页，2022年，8月28日三、核酸的紫外吸收

碱基具有共轭双键，因此具有紫外吸收性质，其吸收高峰接近260nm。

DNA紫外吸收光谱：1．天然DNA;2.变性DNA;3．核苷酸中吸收值吸光度波长（nm）第七十页，共一百二十页，2022年，8月28日OD260的应用：1.DNA或RNA的定量OD260=1.0相当于50μg/ml双链DNA40μg/ml单链DNA（或RNA）

20μg/ml寡核苷酸2.判断核酸样品的纯度DNA纯品:OD260/OD280=1.8RNA纯品:OD260/OD280=2.0含杂蛋白及苯酚，降低3.判断DNA是否变性在DNA的变性过程中，光吸收值增大（增色效应）在DNA的复性过程中，光吸收值减小（减色效应）第七十一页，共一百二十页，2022年，8月28日四、核酸的变性、复性及杂交

核酸变性指核酸双螺旋区碱基对间的氢键断裂，空间结构破坏，形成单链无规则线团状态的过程。降解：核苷酸骨架上3’，5’-磷酸二酯键的断裂DNA变性的本质是双链间氢键的断裂1、变性（denaturation）第七十二页，共一百二十页，2022年，8月28日

核酸变性后，260nm的紫外吸收值明显增加，称增色效应。

加热DNA的稀盐溶液，达到一定温度(80～100℃)后，核酸即发生热变性。热变性是核酸的重要性质。

热变性DNA缓慢冷却的过程，称退火。

核酸变性后，浮力密度增高、粘度降低、生物活性降低或丧失、酸碱滴定曲线改变。第七十三页，共一百二十页，2022年，8月28日指增色效应达50%时的温度一般DNATm值在85-90C之间Tm：DNA变性时，OD260达到最大值的50%时的温度称为DNA的解链温度或融解温度(Tm)。大小与G+C含量成正比。第七十四页，共一百二十页，2022年，8月28日均一性高，变性的温度范围越窄。Tm值大小与下列因素有关：（1）DNA的均一性：

第七十五页，共一百二十页，2022年，8月28日测定Tm，可推知G-C含量。G-C%=（Tm-69.3）×2.44（2）G－C含量：第七十六页，共一百二十页，2022年，8月28日不易用稀电解质保存DNA（3）介质中的离子强度：第七十七页，共一百二十页，2022年，8月28日2、复性（renaturation）变性DNA在适当的条件下，两条彼此分开的单链重新缔合成双螺旋——复性。第七十八页，共一百二十页，2022年，8月28日DNA复性第七十九页，共一百二十页，2022年，8月28日复性的程度、速率与复性条件有关：热变性DNA骤然冷却（淬火）不可能复性将变性DNA缓慢冷却（退火）可以复性热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一过程称为退火(annealing)。分子量越大复性越难；浓度越大，复性越容易；第八十页，共一百二十页，2022年，8月28日

核酸变性后复性时，不同来源的DNA形成双链，或DNA单链和RNA链形成DNA-RNA杂合双链的过程称分子杂交。3.核酸杂交（Hybridization)第八十一页，共一百二十页，2022年，8月28日第八十二页，共一百二十页，2022年，8月28日DNA-DNA杂交双链分子变性复性不同来源的DNA分子第八十三页，共一百二十页，2022年，8月28日核酸的分子杂交RNADNA热变性复性分子杂交DNA-RNA杂交链第八十四页，共一百二十页，2022年，8月28日

Southern杂交

Northern杂交

Western杂交第八十五页，共一百二十页，2022年，8月28日五、核酸的水解

酸、碱、酶水解作用于磷酸二酯键和糖苷键DNA/RNA对酸/碱的耐受程度有差别第八十六页，共一百二十页，2022年，8月28日糖苷键比磷酸酯键更易被酸水解；嘌呤碱比嘧啶碱的糖苷键对酸更不稳定；对酸最不稳定的：嘌呤与脱氧核糖间糖苷键1、酸水解第八十七页，共一百二十页，2022年，8月28日DNA:pH2.8、100℃加热1h，或pH1.6，37℃对水透析可除去嘌呤碱形成无嘌呤酸（apurinicacid，APA）第八十八页，共一百二十页，2022年，8月28日2、碱水解第八十九页，共一百二十页，2022年，8月28日第九十页，共一百二十页，2022年，8月28日RNA磷酸酯键被水解——生成2’/3’-核苷酸DNA则不受影响∵脱氧核糖无2’－OH，∴不能形成碱水解中间产物DNA在1mol/LNaOH中加热至100℃4h，可得到小分子的寡聚脱氧核苷酸。第九十一页，共一百二十页，2022年，8月28日3、酶水解——磷酸二酯键（1）酶分类

①根据底物分为：DNase、RNase②根据作用方式：核酸外切酶从一端（3′/5′）逐个水解核酸内切酶从中间开始在某个位点切断第九十二页，共一百二十页，2022年，8月28日③按照作用的化学键

磷酸二酯酶（phosphodiesterase）

断3′-OH形成的酯键5′-磷酸核苷断5′-OH形成的酯键3′-磷酸核苷

磷酸单酯酶（phosphomonoesterase）

——切去核酸分子末端磷酸基及核苷酸的磷酸基第九十三页，共一百二十页，2022年，8月28日④其它：对底物二级结构的专一性

双链酶：作用于双链核酸

单链酶：作用于单链核酸第九十四页，共一百二十页，2022年，8月28日++PyPyPyPyPyPyPuPuPPPPPPPPPP2H2O（2）RNase

（1）牛胰核糖核酸酶（RNaseⅠ）作用：嘧啶核苷3’－磷酸与其它核苷酸连键专一性极高的内切酶产物：3’嘧啶核苷酸/其结尾的寡核苷酸第九十五页，共一百二十页，2022年，8月28日PPPPPPP2H2OPP++OHOHPPPPPGAGAAAGGCUUC

（2）核糖核酸酶T1

（RNaseT1）作用：3’－鸟苷酸与相邻核苷酸5’－OH连键产物：3’－鸟苷酸或以其为末端的寡核苷酸第九十六页，共一百二十页，2022年，8月28日（3）核糖核酸酶T2

（RNaseT2

）作用位点为Ap残基可将tRNA完全降解为3’－腺苷酸结尾的寡核苷酸第九十七页，共一百二十页，2022年，8月28日①DNaseⅠ：牛胰脱氧核糖核酸酶

Mg2+激活、柠檬酸盐抑制切断双链或单链DNA——以5’－磷酸为末端的寡聚核苷酸②DNaseⅡ：牛脾脱氧核糖核酸酶

Mg2+抑制

——3’－磷酸为末端的寡聚核苷酸（3）DNase第九十八页，共一百二十页，2022年，8月28日③链球菌脱氧核糖核苷酸酶：内切酶，作用于DNA

产物为5’－磷酸为末端的碎片④限制性内切酶(细菌)

主要降解外源DNA

具严格的碱基序列专一性第九十九页，共一百二十页，2022年，8月28日

EcoRⅠ

E：大肠杆菌E.coli属名

co：种名的头两个字母

R：大肠杆菌的菌株

Ⅰ：该细菌中已分离出的这类酶的编号

第一百页，共一百二十页，2022年，8月28日限制性内切酶通常与甲基化酶成对存在：具有相同的底物专一性，识别相同碱基序列。甲基供体：S－腺苷甲硫氨酸甲基受体：DNA上的A与C——甲基化使细菌自身的DNA带上标记第一百零一页，共一百二十页，2022年，8月28日5’-T-A-G-C-T-A--T-A-G-C-T-A-3’3’-A-T-C-G-A-T--A-T-C-G-A-T-5’5’-T-A-G-C-T-A--T-A-G-C-T-A-3’3’-A-T-C-G-A-T--A-T-C-G-A-T-5’第一百零二页，共一百二十页，2022年，8月28日

非特异性的糖苷酶碱基特异N－糖苷酶水解糖苷键（4）N－糖苷酶第一百零三页，共一百二十页，2022年，8月28日制备天然核酸必需采用温和的条件，防止过酸、过碱，避免剧烈搅拌，尤其重要的是防止核酸酶的作用一、核酸的分离、纯化及鉴定第4节核酸研究方法第一百零四页，共一百二十页，2022年，8月28日真核DNA以核蛋白（DNP）形式存在，DNP溶于水或高盐溶液（1mol/LNaCl），但不溶于低盐溶液（0.14mol/LNaCl），据此，采用高盐提取，低盐沉淀，可将DNP与RNA核蛋白分开，提取出DNP。去除蛋白质：水饱和酚，氯仿异戊醇。DNA沉淀：0.3MNaAC-70%乙醇1、DNA的提取第一百零五页，共一百二十页，2022年，8月28日制备RNA时，最重要的是使RNase灭活：①所有容器都要经过高温处理，不能高温高压的用0.1％焦碳酸二乙酯（DEPC）处理。DEPC能使蛋白质乙基化而破坏RNase活性；②加入强变性剂（如胍盐）使RNase失活；③在RNA的反应体系内加入RNase的抑制剂（如RNasin)2、RNA的提取第一百零六页，共一百二十页，2022年，8月28日（2）定糖法RNA：核糖→糠醛→→绿色物质（670-680nm）DNA：脱氧核糖+二苯胺→兰色物质（595-620nm）苔黑酚/地衣酚浓HCl浓硫酸（1）紫外分光光度法1个A～50μg/ml

双链DNA

～40μg/mlRNA或单链DNA3、核酸含量测定第一百零七页，共一百二十页，2022年，8月28日（3）定磷法核酸含磷量为9.5%1g磷相当于10.5g核酸（4）琼脂糖凝胶电泳溴乙锭能插入DNA分子的碱基对间形成复合物在紫外线照射下溴乙锭发橘红色荧光荧光强度与DNA含量成正