2023年药物分析归纳知识点

药物分析归纳作者：张倩炎（福医大药学３班)第一章绪论及药典概况1、５Ｐ标准ＧLP——《药物非临床研究质量管理标准》GCP——《药物临床实验质量管理标准》GMＰ——《药品生产质量管理规范》GSＰ——《药品经营质量管理规范》GAP——《中药材生产质量管理规范》ChＰ组成药品＝中药+化学药品+生物制品药典=凡例+索引+正文＋附录溶解度等级（溶质1g在溶剂中的溶解度）<1mｌ1~1０ｍl１0~30ml3０~100ml1０0~1０00ml１０00~１0000mｌ>１０000ml极易溶易溶溶解略溶微溶极微溶不溶贮藏条件遮光：容器不透光密闭：容器密闭,防止尘土进入密封:容器密封防止风化、吸潮、挥发熔封:防止空气和水分进入阴凉处:不超过20℃凉暗处：避光并不超过20℃冷出:2~10℃常温：1０~30℃温度冷却至室温约０℃２～10℃10~30℃40~50℃70~80℃98~1０0℃放冷冰浴冷水室温温水热水水浴温度精确度精密称定:重量准确至千分之一称定:重量准确至百分之一精密量取：符合移液管的精度规定量取:符合量筒的量取规定“约”若干：不得超过规定量的10%比旋度的计算☆☆☆(见Ｐ33)[α]为比旋度;D为钠光谱的D线;l为测定管的长度，dm;α为测得的旋光度；d为液体的相对密度。药物的鉴别实验性状鉴定性状:外观、溶解度、物理常数（熔点、比旋度、吸光度）一般鉴别实验有机氟化物:氧瓶燃烧法,加茜素氟蓝试液,显蓝紫色。水杨酸盐：加三氯化铁试液，在中性时呈红色,弱酸性时呈紫色。酒石酸盐:加氨制硝酸银试液,水浴加热，试管壁成银镜。芳香第一胺:加稀盐酸和碱性β-萘酚试液,生成由橙黄至猩红色沉淀。托烷生物碱类：加发烟硝酸,水浴蒸干得黄色残渣，放冷加乙醇和氢氧化钠,显深紫色。金属盐：焰色反映,钠黄钾紫钙砖红。铵盐:加过量氢氧化钠,加热分解产生氨气，遇润水的红色石蕊试纸变蓝。氯化物：滴加硝酸银试液,生成白色沉淀，加氨试液即溶解，再加稀硝酸酸化,沉淀又生成。硫酸盐:加氯化钡试液，生成白色沉淀。硝酸盐：加等量的硫酸混合，冷却后加硫酸亚铁试液,溶液分层，界面层显棕色。化学鉴别法呈色反映、沉淀反映、荧光反映、气体生成反映、试剂褪色鉴别、测定生成物的熔点等等。4、光谱鉴别法紫外光谱:采用两种浓度的供试液分别测定其最大吸取波长。红外光谱:合用于组分单一,结构明确的原料药,ＣｈP采用标准图谱对照法,USP采用对照品法。原子吸取光谱:合用于金属元素。核磁共振：用于各种分子物理和化学结构的研究。质谱:广泛应用于药物的定性鉴别和定量测定。色谱鉴别法薄层色谱TＬC鉴别法、高效液相色谱和气相色谱HPＬC-MC鉴别法。其他鉴别法显微鉴别、生物学法、指纹图谱法。药物的杂质检查杂质的来源生产过程：原料或辅料不纯、反映中间体、副产物；贮藏过程：在外界条件影响下发生水解、氧化、分解、异构、聚合、潮解、发霉等。杂质的分类一般杂质:自然界分布广泛，在药物生产贮藏过程中易引入的杂质。特殊杂质:特定药物生产贮藏过程中引入的杂质,也称有关物质。杂质限量L的计算☆☆☆（见Ｐ100)C为杂质标准液的浓度；Ｖ为体积；Ｓ为供试品杂质最大允许量。杂质的检查方法化学方法:显色法、沉淀法、生成气体法、滴定法。色谱方法：薄层色谱法(杂质对照品法、供试液自身稀释对照法、两者并用、对照药物法）高效液相色谱法(外标法或对照品法、自身对照法、面积归一化法)气相色谱法（标准溶液加入法)、毛细管电泳法光谱方法：紫外分光光度法、红外分光光度法其他方法：热分析法、酸碱度检查法、物理性状检查法一般杂质的检查氯化物:在酸性条件下与硝酸银反映，生成白色沉淀。(注:加硝酸可避免弱酸银盐沉淀的干扰;供试品液如带颜色,可采用内消色法解决。）硫酸盐:在酸性条件下与氯化钡反映，生成白色沉淀。铁盐：在酸性溶液中与硫氰酸盐作用生成红色可溶性配合物。（注:加过硫酸铵的目的是使Fｅ2+转换成Fe3+，酸性条件下反映可以防止Ｆe3+的水解。)重金属盐:硫代乙酰胺在酸性条件下水解产生硫化氢,与重金属离子生成黄色到棕黑色的混悬液。或者在碱性溶液中以硫化钠为显色剂,与铅溶液生成硫化铅沉淀（如磺胺类、巴比妥类药物）。（注:该比色法用到3支比色管,分别为对照管、供试管、监控管。）砷盐：采用古蔡法或二乙基二硫代氨基甲酸银法检查。金属锌与酸作用生成氢气，与药物中的砷离子生成易挥发的砷化氢,遇溴化汞试纸，产生黄色至棕色的深斑。后者的方法可产生红色胶态银。a.加入Ｚn的作用是产生Ｈ2；b．SnCl2与KI的作用是将As5＋还原为Ａs3+，I-与Ｚn2+的配位作用,还可克制锑化氢的生成；ｃ．醋酸铅棉花的作用是吸取H2Ｓ气体,起到过滤的作用。(注：Ｓb<100uｇ时用古蔡法。)干燥湿重测定法作用：重要检查水分及其他挥发性物质。方法:常压恒温干燥法、减压干燥法与恒温减压干燥法、干燥剂干燥法。水分测定法方法：费休氏法(原理：碘氧化二氧化硫时消耗水）、甲苯法。炽灼残渣检查法作用：检测有机药物经碳化后无机盐和金属氧化物。易碳化物检查法方法：目视比色法。(加入硫酸使之呈色。)残留溶剂测定法按有机溶剂毒性的限度分为四类：第一类（避免使用）：苯、CCl4等第二类（限制使用)：CHCl３、环己烷等第三类（控制使用)：乙醇、乙醚、乙酸乙酯等第四类(无限制):三氯乙酸、石油醚等方法：GC法。(毛细管柱顶空进样等温法/程序升温法、溶液直接进样法）溶液澄清度检查法方法：比浊法。*扩展酸碱滴定法、沉淀滴定法、吸附法滴定方法被滴定样品滴定液介质/条件指示剂显色直接碘量法维生素C、二巯丙醇碘液水/不限淀粉或碘无色→蓝色剩余碘量法葡萄糖、咖啡因碘、硫代硫酸钠水/酸性淀粉(近终）蓝色→无色铈量法硫酸亚铁片硫酸铈水／酸性邻二氮菲深红→淡蓝亚硝酸钠法芳伯胺类亚硝酸钠水/酸性永停或ＫＩ－淀粉—非水碱量法弱碱高氯酸／冰醋酸—结晶紫蓝色/蓝绿色非水酸量法弱酸甲醇钠乙二胺或DMF溴麝香草酚蓝—铬酸钾指示剂法氯化物或溴化物硝酸银水/中性铬酸钾砖红色沉淀银量法Ag+离子硫氰胺水／酸性硫酸铁铵红色吸附剂指示法卤素硝酸银水/酸性荧光黄-Cl-、曙红-Bｒ－药物的含量测定方法与验证１、前提方法规定：操作简便、结果准确、重现性好。验证内容:准确度、精密度、专属性、检测限、定量限、耐用性等。定量分析法分类：容量分析法（滴定法)、光谱分析法、色谱分析法。容量分析法特点:简便易行、耐用性高、结果准确、专属性差。分类：直接滴定法、间接滴定法（生成物滴定法和剩余量滴定法)。滴定度的计算☆☆☆(见P１45）T为滴定度,ｍｇ/mｌ;ｍ为滴定液的摩尔浓度;a/ｂ为被测药物/滴定剂的摩尔数;Ｍ为被测药物的摩尔质量。含量的计算☆☆☆(见Ｐ１４6）V为滴定体积；T为滴定度;F为校正因子；W为供试品的称取量。光谱分析法朗伯比尔定律:A=Ecｌ(E为百分吸取系数，即每10０ｍl待测药物的吸光度值，c的单位g／1００ｍl）测定方法：对照品比较法、吸取系数法、分光光度法、比色法。标示量的计算☆☆☆（见P１49）Cx为供试品溶液的浓度;D为稀释体积;Ｗ为平均片重／装量；W为供试品取样量；B为标示量。色谱分析法测定法:外标法（标准曲线法)、内标法（标准加入法）。系统合用性实验指标：理论塔板数、分离度、反复性、拖尾因子。气相色谱测定:外标法、内标法、标准溶液加入法。3、样品的前解决酸水解法:用于水难溶的含金属有机药物。碱水解法:用于含卤素的有机药物。还原法：用于含碘的有机药物。凯氏定氮法:将含N药物与硫酸在凯氏烧瓶中共热,药物结构被氧化分解成ＣＯ2和Ｈ2Ｏ，有机Ｎ变为无机氨,并于过量的硫酸结合，经氢氧化钠碱化后释放出ＮH3，经硼酸溶液吸取后,用酸碱滴定。略芳酸类非甾体抗炎药物的分析性质用途:克制前列腺素合成，抗炎抗风湿、止痛退热和抗凝血等作用。结构特性：苯环、游离羧基。典型药物：阿司匹林、双水杨酯、甲芬那酸、布洛芬、萘普生、吲哚美辛、吡罗昔康、扑热息痛。理化性质：酸性（羧基，含氢键>吸电子>给电子）、水解性(酯键、酰胺键)、紫外／红外特性。鉴别实验三氯化铁反映水杨酸反映:水杨酸加三氯化铁试液，生成紫堇色配位化合物。酚羟基反映：对乙酰氨基酚的水溶液加三氯化铁试液，显蓝紫色。缩合反映酮洛芬（二苯甲酮):酸性条件下与二硝基苯肼缩合,生成橙色偶氮化合物。重氮化-偶合反映芳伯氨基：在稀盐酸加热条件下，与亚硝酸钠试液反映,再与碱性β－萘酚偶合生成红色偶氮化合物。氧化反映甲芬那酸：溶于硫酸后,与重铬酸钾反映显深蓝色，随即变为棕绿色。吲哚美辛:在硫酸存在下,与重铬酸钾共热，应显紫色；在盐酸中与亚硝酸钠反映显绿色，渐变黄色。水解反映阿司匹林与Na2CＯ3试液加热水解后，加过量稀硫酸酸化，生成白色沉淀,并产生醋酸臭气。光谱法(略)、７）色谱法(略）。特殊杂质及检查阿司匹林中游离水杨酸的检查检测方法:稀硫酸铁铵溶液显色反映。注：药典采用1％冰醋酸溶液制备供试品溶液,以防阿司匹林水解,同时采用ＨＰＬC检查,C１8作填充剂。有关物质：除游离水杨酸外的合成原料(苯酚)及其他合成副产物,如醋酸苯酯、水杨酸苯酯、水杨酸苷、水杨酰水杨酸、乙酰水杨酸苯酯等。注：除水杨酸峰外，其他各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积。含量测定直接滴定法：药物溶于中性乙醇,以酚酞为指示剂，用NａOＨ滴定液直接滴定。剩余量滴定法：用定量过量的ＮaOH滴定液溶解后,用盐酸滴定液回滴定剩余的NaOＨ滴定液。水解后剩余量滴定法:加入定量过量的NaOＨ，加热使酯键水解后,再用硫酸回滴剩余的NaＯＨ滴定。两步滴定法：第一步中和制剂中酸性水解产物及稳定剂,以消除干扰；第二步为水解后剩余量滴定。(注:阿司匹林原料药采用酸碱滴定法,而阿司匹林片剂采用两步滴定法。)非水溶液滴定法：吡罗昔康具有吡啶环，显碱性,可在冰醋酸溶液中用高氯酸滴定液滴定。苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析性质用途：收缩血管、升血压、散瞳、舒张支气管、迟缓胃肠肌、加速心率、加强心肌收缩等作用。结构：邻苯二酚、苯乙胺（3个取代基团）。典型药物:肾上腺素、异丙R、重酒石酸去甲Ｒ、盐酸去氧Ｒ、盐酸多巴胺、盐酸甲氧明、麻黄碱等。理化性质：酚羟基特性、弱碱性(ＮＨ2）、旋光性、紫外吸取特性。鉴别实验a．三氯化铁反映:酚羟基与Fｅ３＋配位显绿色；在碱性条件为紫红色。b．甲醛-硫酸反映：肾上腺素显红色,异丙显暗紫色，重酒石酸显淡红色。c．还原反映:略。d.氨基醇的双缩脲反映：(鉴别盐酸麻黄碱）加CuSＯ4与NaOH即显蓝紫色;加乙醚后分层,乙醚层显紫红色,水层显蓝色。e.脂肪伯胺的riｍini实验：略。特殊杂质与检查项目:酮体杂质(紫外分光法）、光学纯度ee（色谱法和电泳法)、有关物质(TLＣ——盐酸去氧肾素；纸色谱——盐酸苯乙酸胍；HPLC——其他药物）。含量测定非水溶液滴定法对象:有机碱及其氢卤酸盐、磷酸盐、硫酸盐及金属盐类药物。非水溶剂种类:酸性R如冰醋酸；碱性R如二甲基甲酰胺；两性R如甲醇；惰性Ｒ如甲苯、三氯甲烷。基本原理:强酸置换出与弱碱结合的弱酸，即BH+A-+ＨＣlO4→BＨ+ClO4-+HＡ。(注：有机弱碱的盐均用高氯酸滴定。)（注：加入定量的醋酸汞-冰醋酸溶液的目的是消除氢卤酸对滴定的干扰。）终点指示:常用电位法和指示剂法。指示剂为结晶紫，酸式色为黄色,碱式色为紫色。溴量法对象：盐酸去氧肾素、重酒石酸间羟胺原料药《药典ChP2023》原理：苯酚结构在酸性条件下与溴定量发生反映，再以碘量法滴定剩余的溴。亚硝酸钠法方法:芳伯氨基在酸性溶液中与亚硝酸钠定量发生重氮化反映,用永停法指示终点。紫外分光法与比色法(略)高效液相色谱法(略)对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药的分析性质用途:局部可逆性地阻断神经冲动发生与传导。结构：亲脂性芳香环、中间连接功能基(酯键-对氨基R;酰胺键-酰苯胺R）、亲水性胺基。典型药物：对氨基类（苯佐卡因、普鲁卡因、丁卡因)、酰苯胺类（利多卡因、布比卡因、罗哌卡因)。理化性质：芳伯氨基特性、水解特性（酯键)、弱碱性(叔胺氮)、与重金属反映特性、吸取光谱特性。鉴别实验重氮化-偶合反映原理：芳伯氨基在酸性溶液中与亚硝酸钠反映,加入减小β-萘酚溶液显猩红色沉淀。芳仲胺在酸性溶液中与亚硝酸钠反映,生成乳白色沉淀。与金属离子反映鉴别盐酸利多卡因:在Nａ2CO3试液中与CuSO4反映生成蓝紫色配位化合物。再溶入ＣHCl3中显黄色。鉴别盐酸普鲁卡因胺：被浓Ｈ2Ｏ2氧化成羟肟酸,再与FeCl3反映显紫红色,随即变为棕黑色。水解产物反映鉴别苯佐卡因:加NaＯH试液煮沸，再加入碘加热,生成黄色沉淀,并产生碘仿的臭气。鉴别盐酸普鲁卡因:加NaOＨ溶液即生成白色沉淀，加热变为油状物，继续加热,产生的蒸汽能使红色石蕊试纸变蓝,热至油状物消失后，加盐酸即析出白色沉淀。特殊杂质与检查项目:盐酸普鲁卡因中对氨基苯甲酸的检查（HPLＣ,C18为填充剂,反向）；盐酸普鲁卡因中有关物质和光解产物的检查(ＬC／ＭS联用）;盐酸利多卡因中2，6-二甲基苯胺的检查(HPLC);盐酸罗哌卡因的光学纯度检查（毛细管电泳）。含量测定亚硝酸钠滴定法原理：重氮化反映,用永停法指示终点。注:在不同无机酸中,重氮化反映速度不同,HBr>HＣl>HNO3、Ｈ２ＳO4。注:重氮化反映的速度与温度成正比,但是生成的重氮盐又随温度升高而分解。非水溶液滴定法方法:将供试品溶于冰醋酸-醋酐溶液中，用高氯酸滴定至终点；以电位法指示滴定终点。注：加入醋酐的目的是增强布比卡因的碱性,使滴定突跃明显。紫外分光光度法（外标一点法)高效液相色谱法(略)二氢吡啶类钙通道阻滞药物的分析性质用途:钙通道阻滞药,用于缺血性心血管疾病、高血压、脑血管疾病的治疗。结构:苯基、1，4-二氢吡啶母核。典型药物:硝苯地平、尼莫地平、氨氯地平、尼索地平、非洛地平等。理化性质:还原性(吡啶环)、氧化性(硝基)、解离性、稳定性（光化作用)、旋光性、光谱特性。鉴别实验亚铁盐反映：苯环硝基具有氧化性，可与Fe(OH)2发生氧化反映，生成红棕色沉淀。NaOH试液反映:药物在丙酮溶液中与NaOH试液反映,显橙红色。沉淀反映：二氢吡啶可与重金属盐类形成沉淀。(如尼莫地平与HgCｌ生成白色沉淀）重氮化-偶合反映:苯环硝基在酸性条件下被锌粉还原为芳伯氨基,可鉴别。紫外分光法、红外分光法、色谱法。（略)有关物质的检查方法：HPＬC法。（避光操作)含量测定铈量法:在强酸条件下进行滴定，Ｃe４+自身可作指示剂。(４价为黄色,3价为无色）紫外分光法、高效液相色谱法。（略)巴比妥及苯二氮杂卓类药物的分析第一节苯巴比妥类药物的分析1、性质用途:广泛用于镇静催眠。结构:环状丙二酰脲（母核)、１,3－二酰亚胺(母核基团）。典型药物:巴比妥、苯巴比妥、司可巴比妥、戊巴比妥、异戊巴比妥、硫喷妥钠等。理化性质:弱酸性、水解性、金属离子反映、香草醛反映、紫外吸取特性、显微结晶。*扩展理化性质[口诀：银白铜钴紫硫蓝］a.弱酸性：二酰亚胺上氢受邻位羟基影响,发生质子转移(发生二级电离）；b.水解性：酰亚胺结构与碱液共沸，水解释放出NＨ3，可使红色石蕊试纸变蓝。（注:可用于鉴别异戊巴比妥和巴比妥）c.与金属离子反映（含丙二酰脲):银盐（在Nａ2CＯ3溶液中生成钠盐而溶解,再与硝酸银反映,先生成一银盐，硝酸银过量时生成二银盐。一银盐可溶解,二银盐不溶。)铜盐（在吡啶溶液中生成烯醇式异构体,再与铜-吡啶试液反映，生成紫色配合物。鉴别含S巴比妥类药物:与铜盐反映显绿色）钴盐（碱性溶液中与钴盐反映,生成紫堇色配合物）汞盐(与硝酸汞或氯化汞反映，生成白色沉淀,沉淀能在氨试液中溶解)d.香草醛反映:在浓硫酸存在下与香草醛发生缩合反映,生成棕红色产物。e.显微结晶：在显微镜下观测,巴比妥为长方形结晶，苯巴比妥开始结晶时球形，后为花瓣状。鉴别实验丙二酰脲反映银盐反映:与碳酸钠、硝酸银反映，生成白色沉淀,沉淀振摇即溶解,硝酸银过量时沉淀不溶解。铜盐反映：在吡啶溶液中溶解后，与铜吡啶试液反映,显紫色。(或生成紫色沉淀）特性基团反映硫元素：在NaOH溶液中与Pb离子反映，生成白色沉淀。不饱和取代基:分子结构具有丙烯基,可与I２、Br2或KMnO4作用，发生加成反映,使其褪色。（注：可用于司可巴比妥的专属鉴别)Ｃ.芳环取代基：硝化反映(与KNO3及H2SO4共热，生成黄色硝基化物）亚硝酸钠反映(苯巴比妥与硫酸-亚硝酸钠反映,生成橙黄色产物，ChP用于鉴别苯巴比妥和苯巴比妥片)甲醛-硫酸反映(苯巴比妥与甲醛-硫酸反映,生成玫瑰红色产物，用于鉴别巴比妥和无芳环取代的巴比妥类药物)*扩展鉴别实验硫代巴比妥——铅离子沉淀;司可巴比妥——高锰酸钾褪色；苯巴比妥——硝化反映，显黄色；甲醛-硫酸反映，玫瑰红。特殊杂质的检查项目：酸度(甲基橙指示剂）、乙醇溶液的澄清度、中性或碱性物质(提取重量法)、有关物质。含量测定方法：银量法、溴量法、紫外分光法、酸碱滴定法、提取重量法、HPLＣ法、GC法及电泳法。银量法:ChP采用甲醇和3%无水Ｎa2CO３溶剂系统,以银－玻璃电极电位法指示终点。溴量法:用于司可巴比妥原料药及其胶囊的测定。（滴定比例１：１）酸碱滴定法:涉及水-乙醇混合溶剂滴定、胶束水溶液滴定、非水溶液滴定(指示剂为麝香草酚蓝）。其他方法(略）苯并二氮杂卓类药物的分析性质用途：用于抗焦急、抗惊厥。结构:苯环、七元含氮杂环。典型药物:地西泮、氟硝西泮、氯氮卓、三唑仑、奥沙西泮、劳拉西泮等。理化性质：弱碱性（N杂环）、水解性（在强酸溶液中水解生成二苯甲酮衍生物）、紫外特性。（注：地西泮水解生成芳仲胺基和甘氨酸,可用于专属鉴别。)鉴别实验生物碱沉淀反映：遇碘化铋钾试液显橙红色沉淀。硫酸-荧光反映：地西泮+浓Ｈ２SＯ4→黄绿色(或）＋稀H２SＯ4→黄色。氯氮卓+浓Ｈ2SO4→黄色(或）+稀H２ＳO4→紫色。氯化物的鉴别：略。芳伯胺的反映：重氮化－偶合反映。(或亚硝酸钠反映）其他:略。特殊杂质与检查方法：ＧC法或HPLＣ法。(注:三唑仑采用HPLC法1%溶液主成份自身对照法检查。)含量测定非水溶液滴定法(原料药的测定）非水碱量法:ｐKa为8~1０时,冰醋酸溶剂；pＫa为10～12时，冰醋酸与醋酐混合溶剂;pKa〉1２时,醋酐溶剂。非水酸量法:采用氢氧化四丁基铵为滴定液,以电位法指示终点。紫外分光法对照品比较法b.吸取系数法(注:本类药物中，原料药仅奥沙西泮采用此法测定。)吩噻嗪类抗精神病药物的分析性质用途:阻断多巴胺受体，治疗Ⅰ型精神分裂症（控制幻觉和妄想）。结构：硫氮杂蒽(母核)、2位和１0位取代基。典型药物:盐酸氯丙嗪、盐酸异丙嗪、奋乃静、氟奋乃静、盐酸氟奋乃静等。理化性质：弱碱性（含N）、还原性(用于鉴别)、氧化性（避光)、金属离子配位(S２+）、紫外特性。鉴别实验生物碱沉淀反映：与三硝基苯酚反映，生成沉淀。氧化显色反映:盐酸异丙嗪——与硝酸反映生成红色沉淀,加热即溶解，溶液变为橙黄色。盐酸氯丙嗪——加硝酸显红→黄，加ＦｅCl3显红色。与钯离子配位反映:葵氟奋乃静与氯化钯反映,生成红色沉淀。卤素取代基的焰色反映:奋乃静在铜网上加热，火焰显绿色。红外分光法：吩噻嗪类原料药均用红外分光法鉴别。色谱法：GC法、HPLＣ法。（略)(注：鉴别a盐酸氯丙嗪、ｂ氟奋乃静与c奋乃静:a含Ｃl,b含F,加入氢氧化钠后a溶c不溶。）（鉴别盐酸氯丙嗪和盐酸异丙嗪：加硫酸，显樱桃红色的为异丙嗪；加硝酸有红色沉淀的是异丙嗪。）有关物质检查氯丙嗪：HPLC法。(辛基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈－三氟乙酸为流动相。）奋乃静:HPＬC法。(C18键合硅胶为填充剂,甲醇为流动相。）含量测定方法：酸碱滴定法、分光法、HPＬC法、LC－MＳ联用法。（奋乃静：原料药用非水法,片剂用紫外法。)非水溶液滴定法：冰醋酸-醋酐为溶剂,高氯酸溶液滴定。（加入醋酸汞可使反映进行完全。）提取后分光法：用分光法测定期，通过提取以排除辅料的干扰。钯离子比色法：略。HPLC法：采用反向ＲP-HPＬC法和离子对色谱法分离,紫外检测器检测。喹啉与青蒿素类抗疟药物的分析第一节喹啉类药物的分析性质用途:抗疟药。结构:喹啉。典型药物:硫酸奎宁、磷酸哌奎、磷酸氯喹、磷酸伯氨喹等。理化性质:碱性（生物碱）、旋光性、荧光特性(蓝色）、紫外特性。（注：磷酸哌奎和磷酸咯奈啶无手性碳，故无旋光性。）根据用药目的将抗疟药分为3类：用于控制症状——磷酸氯喹,硫酸奎宁、青蒿素等;用于控制复发和传播——磷酸伯氨喹;用于病因学防止——乙胺嘧啶、磺胺类鉴别实验绿奎宁反映：奎宁经氯水氧化,氨水解决缩合,生成绿色的铵盐。硫酸盐的鉴别反映：BaCl2生成白色沉淀；加醋酸铅生成白色沉淀,沉淀在氨试液中溶解。氯化物的鉴别反映：ＡgNO３生成白色沉淀;加MｎO２加热产生Cl2,使淀粉试纸变蓝。磷酸盐的鉴别反映:加AgNO3生成黄色沉淀；加氯化铵镁生成白色沉淀;加钼酸铵与硝酸生成黄色沉淀。荧光反映：硫酸奎宁和二盐酸奎宁在稀硫酸溶液中均显蓝色荧光。纯度检查硫酸奎宁的纯度检查：酸度、三氯甲烷－乙醇中不溶物质、其他金鸡纳碱。磷酸咯奈啶的纯度检查:酸度、水中不溶物、氯化物、甲醛、四氢吡咯。含量测定硫酸奎宁的含量测定硫酸奎宁:非水溶液滴定法。１moｌ硫酸奎宁消耗3moｌ高氯酸滴定液。(加入冰醋酸,发生一级电离）硫酸奎宁片：非水溶液滴定法。1mｏl硫酸奎宁消耗4mol高氯酸滴定液。(未加冰醋酸,发生二级电离)青蒿素类药物的分析性质用途:Ⅰ类抗疟药。结构：倍半萜内酯、过氧桥。典型药物:青蒿素、青蒿琥酯、蒿甲醚等。理化性质：氧化性、旋光性（右旋)、水解性（内酯）、紫外特性。鉴别实验过氧桥的氧化反映：酸性条件下与KI试液反映,淀粉指示液显蓝紫色。羟肟酸铁反映：在碱性条件下与羟胺作用生成羟肟酸，在烯酸中与高铁离子呈紫红色。香草醛-硫酸反映:加入香草醛-硫酸试剂,显红色。纯度检查项目:有关物质(衍生物、结构类似物）。含量测定方法:青蒿素类原料药采用ＨPLC法测定,双氢青蒿素采用水解后ＵV法。莨菪烷类抗胆碱药物的分析性质用途：生物碱类抗胆碱药。结构：含氧桥环、苯环取代基。典型药物:硫酸阿托品、氢溴酸后阿托品、硫酸莨菪碱、山莨菪碱、东莨菪碱等理化性质：水解性（酯键）、碱性（叔胺氮）、旋光性。(注：阿托品类药无旋光性,而东莨菪碱有旋光性,可用于鉴别。)鉴别实验托烷生物碱Vitali反映:酯键水解后，经发烟硝酸加热,再与KOＨ醇溶液和固体KOH作用,显深紫色。硫酸-重铬酸钾反映：本类药物水解后,与硫酸-重铬酸钾加热反映,产生苦杏仁臭味。生物碱显色／沉淀反映：常用沉淀剂如碘化铋钾、三硝基苯酚、磷钨酸等。光谱法、色谱法。（略)硫酸盐和溴化物的反映:莨菪烷类药物制品水溶液大多为硫酸盐和氢溴酸盐,因此鉴别。特殊杂质与检查项目：酸度(pH4.0～５．5)、易氧化物、其他生物碱。含量测定酸性染料比色法基本原理：在适当ｐH水溶液中，碱性药物与H+结合成阳离子，而一些酸性染料可解离成阴离子；两种离子定量地结合，生成具有吸取光谱明显红移的有色离子对。反映式原理：略。酸性染料：溴甲酚绿、溴麝香草酚蓝、溴甲酚紫、溴酚蓝等。影响因素：水相的pＨ、酸性染料的种类及浓度、有机溶剂的选择、有机相的水分、酸性染料中有色杂质。非水溶液滴定法注:硫酸阿托品与高氯酸反映的化学计量比为1:１。(硫酸在冰醋酸中发生一级解离）注：醋酸汞作用:消除氢氯酸盐的干扰。高效液相色谱法分析碱性物质——阴离子对试剂——戊烷/庚烷／十二烷磺酸钠。分离酸性物质——阳离子对试剂——四丁基溴化铵、四丁基氢氧化铵。常用扫尾剂:醋酸铵、三乙胺、二乙胺等。维生素类药物的分析维生素A的分析性质结构:环己烯、共轭多烯醇侧链。自然来源：海鱼肝脏提取的脂肪油，通称鱼肝油。理化性质：溶解性(脂溶性)、不稳定性（易氧化）、紫外特性(共轭烯烃)。(注：维生素Ａ1又称视黄醇；鱼肝油中维生素A重要为醋酸酯和棕榈酸酯。）（维生素按溶解度分为脂溶性——A、D、E、K等；和水溶性——B、Ｃ、烟酸、叶酸等。）鉴别实验三氯化锑反映:维生素A在无水三氯化锑的无醇三氯甲烷溶液中显蓝色,渐变为紫红色。(注:反映必须在无水、无醇条件下进行。)紫外分光法、薄层色谱法。(略)含量测定紫外分光法(三点校正法)方法:三点校正法。(目的：消除无关吸取的干扰)原理：ａ.杂质的无关吸取在310~３40nｍ处几乎呈一条直线。ｂ.物质对光的吸取具有加和性。测定法:直接滴定法(测定维Ａ醋酸酯）、皂化法（测定维Ａ醇)。校正吸光度：A328(校正)=3.５２（2A328-A３１6-A３40）维生素Ａ醋酸酯的计算☆☆☆(见Ｐ３50）A为A328或A校正；D为稀释倍数;190０为换算因子;W为内容物称量；B为标示量。（注：若吸光度差值超过0.0２时,计算A校正,若A校正与A的差值在-１5%~3%时,用A校正计算。）高效液相色谱法条件:硅胶为填充剂,正己烷-异丙醇为流动相，检测波长为３2５nm。三氯化锑比色法（略)维生素B1的分析性质结构：氨基嘧啶环、噻唑环。（含Ｓ含N)自然来源:广泛存在于米糠、麦麸、酵母中。理化性质:溶解性(水溶性）、紫外特性。鉴别实验硫色素荧光反映:在碱性溶液中,被铁氰化钾氧化，与正丁醇中显蓝色荧光。沉淀反映:嘧啶环和氨基具有生物碱的特性,可与生物碱沉淀剂反映。[碘红汞钾黄钨白]氯化物鉴别反映：略。硫元素反映:与NａOH共热，再与硝酸铅反映生成黑色沉淀。含量测定非水滴定法：1mol维生素B１消耗２mol高氯酸滴定液。(维生素B1具有2个碱性基团）紫外分光法。(略）硫色素荧光法。（略）维生素C的分析性质用途:抗坏血酸。结构：烯二醇、内酯环。理化性质：溶解性（水溶性)、酸性(一元酸)、旋光性、还原性、水解性、糖类性质、紫外特性。鉴别实验与硝酸银反映:烯二醇具有强还原性,可被硝酸银氧化，产生黑色金属银沉淀。与二氯靛粉钠反映:2,6-二氯靛粉钠在酸性介质中为玫瑰红色,碱性介质中为蓝色。与维生素Ｃ作用后生成还原型无色的酚亚胺。与其他氧化剂反映:氧化剂如亚甲蓝、高锰酸钾、碱性酒石酸铜、磷钼酸等。薄层色谱法：略。糖类的反映:维Ｃ可在三氯醋酸存在下转化为糠醛,加入吡咯,加热至50℃呈现蓝色。杂质检查项目:溶液的澄清度与颜色检查、铁/铜离子的检查(原子吸取光度法）、草酸的检查（比浊法）。含量测定碘量法:略。(丙酮的目的：消除抗氧剂/掩蔽剂的干扰。）二氯靛粉滴定法:略。高效液相色谱法：固定相为C１8键合硅胶，流动相为甲醇-偏磷酸溶液。第四节维生素D的分析性质用途:抗佝偻病。结构：开环麦角甾醇。理化性质:溶解性（脂溶性)、不稳定性、旋光性（D2-6碳；D3-4碳)、紫外特性。鉴别实验醋酐-浓硫酸反映(红-紫－蓝－绿）b.三氯化锑反映（粉红色)c．三氯化铁反映（橙黄色）薄层色谱法、HPLC法:鉴别维生素D2和Ｄ３。杂质检查注：ＣhＰ规定，维生素Ｄ2检查麦角甾醇，而维生素D3未规定。含量测定方法：正相高效液相色谱。维生素E的分析性质用途：生育酚。结构：苯并二氢吡喃醇衍生物、苯环、酚羟基。理化性质：溶解性（脂溶性）、水解性、还原性、紫外特性。（注:维生素E的天然品为右旋体，合成品为消旋体。)鉴别实验硝酸反映:在硝酸酸性条件下水解成生育酚，继续被硝酸氧化,显橙红色。三氯化铁反映:在碱性条件下水解成生育酚，被Fe3+氧化后,与联吡啶反映，显红色。紫外分光法、薄层色谱法:略。杂质检查项目:酸度、生育酚(硫酸铈滴定法，二苯胺试剂，亮黄色）、有关物质、残留溶剂(气相色谱法）。（注：维生素E中生育酚的检查是唯一用滴定法检查杂质的有机物。)含量测定方法:GＣ法（采用正三十二烷内标法，固定液为硅酮）HPLC法（固定相为C１8,流动相为甲醇-水。)甾体激素类药物的分析性质结构：环戊烷并多氢菲。药理分类:肾上腺皮质激素、性激素（雄激素、雌激素、孕激素)。骨架分类:雄甾烷、雌甾烷、孕甾烷。（根据C10、C1３、C17位取代基的不同分类)理化性质：溶解性（脂溶性)、旋光性、紫外吸取特性、结构特性：肾上腺皮质激素——A环有Δ4-3-铜基,有紫外吸取；C17位有α-醇酮基，具有还原性。雄激素——A环有Δ4－3-铜基;C17位有羟基。孕激素——A环有Δ4-3－铜基;C1７位有甲酮基、羟基。雌激素——A环为苯环,C３位有酚羟基；C1７位偶羟基、乙炔基。鉴别实验硫酸显色反映：氢化可的松在硫酸作用下，显棕黄色并有绿色荧光,加水稀释后显黄色，有絮状沉淀。C17－甲酮基反映:黄体酮与亚硝基铁氰化钠反映,生成蓝紫色产物。C１7-α-醇酮基反映：加碱性酒石酸显砖红色沉淀;加氯化三苯四氮唑显红色;加氨制硝酸银显黑色沉淀。炔基的沉淀反映：与硝酸银反映,生成白色的沉淀。紫外分光法：含Δ４-3-铜基的药物在24０nm处有最大紫外吸取。A环具有酚羟基的雌激素在２80nm处有最大吸取。红外分光法、色谱法:略。特殊杂质与检查项目:有关物质（甾体类似物，色谱法）、硒的检查(氧瓶燃烧法）、残留溶剂（GＣ法)、游离磷酸盐(磷钼酸比色法)。含量测定HPLC法:C18为填充剂，三乙胺-甲醇-乙腈为流动相,检测波长为2４2nｍ。四氮唑比色法：皮质激素（C17位醇酮基)在强碱溶液中将四氮唑盐还原成有色甲簪。异烟肼比色法:甾体激素（Ｃ３酮基)在酸性条件下与羰基试剂(异烟肼)反映，生成黄色产物。Kｏbeｒ反映：雌激素与硫酸-乙醇反映,显红色，并在５20nｍ附近有最大吸取。抗生素类药物的分析第一节概述检查项目涉及：结晶性、溶液澄清度、酸碱度、毒性、热源、内毒素等。含量测定测定方法：微生物检定法（管碟法、浊度法)、ＨＰLC法。β-内酰胺类抗生素性质结构：β－内酰胺环、6-氨基青霉烷酸。(母核，简称6－AＰA）典型药物:青霉素类——阿莫西林、青霉素钠、氨苄西林、普鲁卡因青霉素等。头孢菌素类——头孢他啶、头孢克洛、头孢拉定、头孢氨苄等。理化性质:不稳定性（内酰环）、旋光性（青霉C３头孢Ｃ2）、酸性与溶解度、紫外特性（含苯环侧链)。（注：青霉素的碱金属盐水溶液遇酸析出白色沉淀。）（注：头孢菌素类有紫外特性,而青霉素类只有侧链含苯环时才有紫外特性。）*扩展青霉素的降解反映降解:Ｈ２O，ＯH-或青霉素酶→青霉噻唑酸NＨ2ＯH→异羟肟酸pH=2→青霉酸ｐH＝４→青霉烯酸1０0℃→青霉醛鉴别实验色谱、HPLC法：略。异羟肟酸铁反映：在碱性中与羟胺反映生成羟肟酸,在烯酸中与Fe3+反映，呈紫红色。双缩脲/茚三酮反映：本类药物含α-氨基酸结构,反映显蓝紫色,可用于鉴别。重氮苯磺酸反映:本类药物含酚羟基，可用此鉴别。硫酸呈色反映：头孢氨苄/黄色、头孢噻肟钠/亮黄色、头孢噻吩钠/红棕色。特殊杂质检查项目:高分子聚合物（分子排阻法）、有关物质(TLＣ法）、异构体、吸光度、有机溶剂、结晶性。含量测定方法：微生物检定法、HPLＣ法（注：除氨苄西林钠采用微生物检定法，其余均采用HPＬC法。）氨基糖苷类抗生素性质结构：链酶胍、链酶双糖胺(链霉素)、环己多元醇（苷元）。典型药物:链霉素、庆大霉素、奈替米星、阿米卡星等。理化性质:溶解性(水)、碱性、旋光性、水解性与稳定性(苷键）、紫外特性。（注:链霉素在2３0nm处有最大吸取,庆大霉素、奈替米星等无紫外吸取,可用于鉴别庆大霉素。）鉴别实验茚三酮反映：氨基糖苷类含α-氨基酸,反映显蓝紫色，可用于鉴别。Moliｓch反映:具有五碳糖或六碳糖,在盐酸作用下，与α-萘酚（紫红色)或蒽酮（蓝紫色)显色反映。N-甲基葡萄糖胺反映：经水解后，在碱性条件下与乙酰丙酮、对二甲氨基苯甲醛反映，呈樱桃红色。麦芽酚反映：链霉素分特性反映。麦芽酚与Fe3+作用，显紫红色。坂口反映：链酶胍的特有反映。反映产物显橙红色。TLC法、HＰLＣ法:略。特殊杂质与检查项目:有关物质（链霉