GMP质量体系四环素片中间产品检验操作规程

目的：为检验四环素片中间产品规定一个标准的程序，以便获得准确的实验数据。范围：适用于四环素片中间产品的检验。职责：检验员，检验室主任对本规程实施负责。规程：1性状：本品为黄色片。2鉴别：2.1试剂与仪器2.1.1四环素对照品2.1.2乙醇2.1.3硫酸2.1.4三氯化铁试液2.1.5量杯2.1.6烧杯2.1.7漏斗2.2.8水浴锅2.1.9电子天平2.2顶目与步骤2.2.1取本品的细粉适量(约相当于盐酸四环素25mg)，加热乙醇25ml，浸渍20分钟后，滤过，滤液置水浴上蒸干，取残渣约0.5mg，加硫酸2ml，即显深紫色，再加三氯化铁试液化1滴，溶液变为红棕色为符合规定。3检查3.1试剂与仪器3.1.1电子天平(万分之一克)3.1.2FAB-2片剂脆碎仪3.1.3BJ2A片剂崩解仪3.2项目与步骤3.2.1重量差异：照片剂重量差异测定法（SOP-QC-334-00）检查，±7.5%重量差异限度为符合规定。3.2.2崩解时限：取本品6片，按崩解时限检查法（SOP-QC-330-00）检查，各片应在15分钟内全部崩解，如有1片崩解不完全，应另取6片按同样方法复试，均应为符合规定。3.2.3脆碎度：取本品约20片，用吹风机吹去脱落的粉末，精密称重，按脆碎度检查法（SOP-QC-333-00）检验，减失重量不得过1%，且不得检出断裂、龟裂及粉碎的片；如减失重超过1%时，可复检2次，3次的平均减失重量不得过1%，并不得检出断裂、龟裂及粉碎的片为符合规定。4含量测定：4.1试剂与仪器4.1.1四环素标准品4.1.2磷酸盐緩冲液（pH6.0）4.1.3四环素标准品抗生素检定培养基Ⅱ(6.5-6.6)4.1.4藤黄微球菌4.1.5容量瓶(50ml,100ml)4.1.6灭菌刻度吸管、滴管4.1.7双碟4.1.8陶瓦盖 4.1.9钢管放置器4.1.10电热隔水培养箱 4.1.11称量瓶4.1.12CHB-1抗生素效价测量仪 4.1.13电子天平(万分之一克) 4.1.14超净工作台 4.1.15酒精灯4.1.16三角烧瓶(50ml,150ml) 4.1.17量筒(100ml)4.1.18镊子，按种棒检验步骤：取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于盐酸四环素0.25g），加0.1N盐酸液（按标示量计算每10mg加酸液2ml），振摇，使四环素溶解后，再加灭菌水称释至每1ml中约含1000单位的悬浮液，静置，精密量取上层液适量，照四环素微生物检定法（SOP-QC-339-00）操作。4.2.1培养基的制备:称取抗生素检定培养基Ⅱ（Ph6.5-6.6）28.5g，加1000ml水，加热溶解，分装121℃高压灭菌30分钟。4.2.2磷酸盐缓冲液(pH6.0)制备：称取磷酸氢二钾2g，5磷酸二氢钾8g，加水使成1000ml，滤过，经121℃蒸气灭菌30分钟，备用。4.2.3藤黄微球菌(28001)的营养琼脂斜面培养物，接种于盛有营养琼脂培养基的培养瓶中,在26-27℃培养24小时，临用时，用培养基Ⅲ将菌苔洗下，合并菌液至灭菌大试管中，备用。4.2.4标准品溶液的制备:4.2.4.1将标准品从冰箱取出，使与室温平衡，准确称取四环素对照品约58.0mg，置50ml容量瓶中，加N/10盐酸液5.8ml溶液后，加灭菌水至刻度。精密吸取10ml，置25ml容量瓶中，用磷酸盐缓冲液（pH6.0）稀释至刻度，备用。4.2.4.2高剂量标准品的制备:精密吸取4.2.4.1制备的标准溶液5ml，置50ml容量瓶中，用磷酸盐缓冲液（pH6.0）稀释至刻度，备用。4.2.4.3低剂量标准品的制备:精密吸取4.2.4.1制备的标准溶液5ml，置100ml容量瓶中，用磷酸盐缓冲液（pH6.0）稀释至刻度，备用。4.2.5样品溶液的制备：4.2.5.1取样20片,精密称定，研细，精密称取重约0.66g置250ml容量瓶中，加N/10盐酸液100ml溶液后，加灭菌水至刻度，摇匀。精密吸取上清液10ml，置25ml容量瓶中，用磷酸盐缓冲液（pH6.0）稀释至刻度，备用。4.2.5.2高剂量样品溶液的制备:精密吸取4.2.5.1制备的样品溶液5ml，置50ml容量瓶中，用磷酸盐缓冲液（pH6.0）稀释至刻度，备用。4.2.5.3低剂量样品溶液的制备:精密吸取4.2.5.1制备的样品溶液5ml，置100ml容量瓶中，用磷酸盐缓冲液（pH6.0）稀释至刻度，备用。4.2.6双碟的制备:按抗生素微生物检定法(SOP-QC-339-00)操作；4.2.7小钢管的放置：按抗生素微生物检定法(SOP-QC-339-00)操作；4.2.8滴管、培养基与测量：按抗生素微生物检定法(SOP-QC-339-00)操作；5记录与计算用电脑测试，计算、统计分析的打印纸贴附记录后。本品含四环素按盐酸四环素（C22H24O8N2·HCl）计算,应为标示量的90.0%-110.0%PT=P×按下列计算四环素的最终效价PT：为样品的真实效价；P：为样品(相当于标示量或估计效价)的百分数；对照品：ds=