微生物知识及卫生教育

微生物知识及卫生教育第一页，共四十二页，2022年，8月28日目录微生物定义微生物特点药品生产为什么要控制微生物如何控制微生物污染

第二页，共四十二页，2022年，8月28日微生物定义微生物是指个体微小，必须借助于显微镜才能看清它们外形的一群低等的、原始的微小生物。它们都是些个体微小，结构简单的低等原始物生，包括属于原核类的细菌、放线菌、立克氏体和非细胞类的病毒及属于真核类的霉菌、酵母菌、小型藻类和原生动物等。

第三页，共四十二页，2022年，8月28日微生物特点微生物在生物界的七个之最*最小的个体

细菌：0.5～5μm

霉菌：菌丝直径2-10μm

放线菌：菌丝直径约0.6μm

酵母菌：1-5μm×5-30μm

病毒：30-300nm

微生物因个体微小所具有的优势：任何物体被分割得越细小，则其单位体积所占的表面积越大。微生物就有这样的特点，可以使它极大地扩大与外界的接触面，有利于物质交换、能量和信息的交换。微生物的一切特征都基于此特点。

第四页，共四十二页，2022年，8月28日微生物特点*最大的“胃口”

微生物通过细胞膜的渗透作用来吸收营养，由于表面积大，所以“胃口”特别大。例如，在适合环境下，一个大肠杆菌每小时吸收消耗的糖，是它自身重量的200倍。如果以人来换算，这自身重量200倍的糖，要从吃500年的粮食中才能吸收得到。第五页，共四十二页，2022年，8月28日微生物特点*最广的食谱微生物什么都“吃”，凡是一切动植物能吃的东西它都吃，动植物不能吃的东西，它能吃，甚至有毒的或极毒的东西它也能吃。例如，纤维素、木质素、几丁质、角蛋白、石油、甲醇、天然气、塑料、酚类、合成药物、极毒的氰化物，微生物都吃。可以这样说，凡有机化学家所能合成出来的东西，不管它们的结构是何等复杂、新颖，一到微生物的“嘴巴”中，全部分解。

第六页，共四十二页，2022年，8月28日微生物特点*最快的繁殖这是微生物最高超的本领，任何高等生物都要甘拜下风，望尘莫及。以大肠杆菌为例，如果它每20分钟分裂一次，24小时后，可产生4，722，000，000万亿个后代，总重要可达4722吨。如果让它继续分裂下去，48小时后，则一个大肠杆菌竟可繁殖成2。2×1043个后代.假如一个细菌重10-12克,那么它的总重量达22×1022吨，相当于4000个地球之重！当然，因种种因素的限制，它生得快，死得也快，否则大家都被它理在土层底下变化石了。可是人类利用它惊人的繁殖力，为遗传工程作出了巨大贡献。

第七页，共四十二页，2022年，8月28日微生物特点*最高的数量由于微生物个体小、胃口大、食谱广、繁殖快，所以无处不在，而且数量巨大。一克土壤中含量：细菌（几亿）>放线菌(几千万孢子)>霉菌(几百万孢子)>酵母菌(几十万)。

人体肠道中：一百多种微生物，数量达100万亿左右。

每克新鲜叶子上约有100多万个微生物。

旧的纸币：50%都沾有大肠杆菌。

一个喷嚏含有1~2万个飞沫，其中含有细菌4500~15万个，而患感冒的“高质量”喷嚏含有细菌8500万个。

闹市里没有绿化的街道，每立方米含有细菌400万个，林荫道约60万个，公园里4000个，森林里不到50个。

第八页，共四十二页，2022年，8月28日微生物特点*最强的抗性

微生物对外界各种恶劣环境的抵抗能力，可谓生物界的“绝对冠军”。

细菌有很强的抗热性。可在90℃的温泉中生长。耐高温芽孢杆菌，可在当地水温93℃下生活，如果把它培养在恒温器内升温，到100℃还能生长，同时加压再加温，升至105℃还能生长，可谓生命的奇迹。

细菌有很强的抗寒性。有些嗜冷菌可在—12℃低温下生活，在南极—50℃低温还有低等藻类生活。一般说低温对微生物仅起“催眠”作用，多数不会冻死，所以在干冰造成的—70℃或液态氮造成的—196℃都冻不死，甚至在—253℃还不能杀死某些细菌呢。

细菌还能抗压力。在6000米的深海中，可以找到小球菌、芽孢杆菌、弧菌等。在10000米的深海，1140个大气压大，还可找到嗜压菌。微生物能在短时间内耐高压是普遍现象，如各种细菌、酵母菌、病毒在数分钟的短时间内耐12000个大气压还不会死亡。

第九页，共四十二页，2022年，8月28日微生物特点*最广的分布微生物的足迹，除了活火山中心外，可以说遍布全球，包括85公里的高空。第十页，共四十二页，2022年，8月28日葡萄球菌第十一页，共四十二页，2022年，8月28日酵母菌芽痕第十二页，共四十二页，2022年，8月28日棒状杆菌大肠杆菌

大肠杆菌放线杆菌第十三页，共四十二页，2022年，8月28日分裂的大肠杆菌黑曲霉

黑曲霉弧状菌第十四页，共四十二页，2022年，8月28日脚气真菌酵母菌

蜡状芽孢杆菌链球菌

第十五页，共四十二页，2022年，8月28日面包酵母啤酒酵母

球菌沙门氏菌第十六页，共四十二页，2022年，8月28日SARS病毒噬菌体

禽流感病毒噬菌体第十七页，共四十二页，2022年，8月28日药品生产为什么要控制微生物污染原料药微生物超标导致的不良后果给后续制剂产品带来微生物方面的质量风险制剂产品微生物污染导致的不良后果

剂型微生物污染后果口服制剂肠道不良反应（腹泄、恶心、呕吐等）局部给药制剂（用于手术、烧伤及严重创伤、眼部、耳鼻及呼吸道等）感染、炎症注射剂输液反应：热原物质（细菌内毒素）导致病人发烧，主要表现为发冷、寒战、面部和四肢发绀，可伴恶心、呕吐、头痛、头昏、烦躁不安、谵妄等，严重者可有昏迷、血压下降，出现休克和呼吸衰竭等症状而导致死亡。

第十八页，共四十二页，2022年，8月28日药品生产为什么要控制微生物污染细菌毒素；由细菌产生的毒素，分为细菌内毒素和细菌外毒素两种细菌内毒素什么是细菌内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁上的一种脂多糖和微量蛋白的复合物。它不是细菌或细菌的代谢产物，而是细菌死亡或解体后才释放出来的一种具有生物活性的物质。热原物质的本质就是细菌内毒素。第十九页，共四十二页，2022年，8月28日药品生产为什么要控制微生物污染细菌内毒素的生物活性1、致热性。2、致死性毒性。3、白细胞减少。4、降低血压，休克5、激活凝血系统。6、诱导对内毒素的耐受性。7、鲎细胞溶解物（鲎试剂）的凝集。8、刺激淋巴细胞有丝分裂。9、诱导抗感染的特异性抵抗力。10、肿瘤细胞坏死作用。

第二十页，共四十二页，2022年，8月28日药品生产为什么要控制微生物污染药品中细菌内毒素的测试热原检查法：本法系将一定剂量的供试品，静脉注入家免体内，在规定的时间内，观察家免体温升高的情况，以判定供试品中所含热原的限度是否符合规定。细菌内毒素检查法：本法系利用鲎试剂来检测或量化由革兰氏阴性菌产生的细菌内毒素，以判定供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法第二十一页，共四十二页，2022年，8月28日第二十二页，共四十二页，2022年，8月28日第二十三页，共四十二页，2022年，8月28日药品生产为什么要控制微生物污染细菌外毒素细菌在生长过程中由细胞内分泌到细胞外的毒性物质。能产生外毒素的细菌大多数是革兰氏阳性菌，少数是革兰氏阴性菌。细菌内毒素与细菌外毒素的区别

第二十四页，共四十二页，2022年，8月28日第二十五页，共四十二页，2022年，8月28日药品生产为什么要控制微生物污染《中国药典》对药品微生物的控制要求非无菌药品微生物限度标准第二十六页，共四十二页，2022年，8月28日剂型微生物限度控制标准口服给药制剂细菌数：每1g不得过1000cfu。每1ml不得过100cfu。霉菌和酵母菌数：每1g或1ml不得过100cfu。大肠埃希菌：每1g或1ml不得检出。耳鼻喉给药制剂细菌数：每1g、1ml或10cm2不得过100cfu。霉菌和酵母菌数：每1g、1ml或10cm2不得过10cfu。金黄色葡萄球菌、铜绿假单孢菌：每1g、1ml或10cm2不得检出。大肠埃希菌：鼻喉给药制剂，每1g、1ml或10cm2不得检出。生殖道、尿道给药制剂细菌数：每1g、1ml或10cm2不得过100cfu。霉菌和酵母菌数：每1g、1ml或10cm2不得过10cfu。金黄色葡萄球菌、铜绿假单孢菌、白色念珠菌：每1g、1ml或10cm2不得检出。直肠给药制剂细菌数：每1g不得过1000cfu。每1ml不得过100cfu。霉菌和酵母菌数：每1g或1ml不得过100cfu。金黄色葡萄球菌、铜绿假单孢菌：每1g或1ml不得检出霉变长霉者以不合格论原料及辅料参照相应制剂的微生物限度标准执行第二十七页，共四十二页，2022年，8月28日药品生产为什么要控制微生物污染《中国药典》对药品微生物的控制要求无菌药品微生物控制标准剂型检查项目标准用于手术、烧伤及严重创伤的局部给药制剂无菌应符合规定注射剂无菌热原或细菌内毒素应符合规定第二十八页，共四十二页，2022年，8月28日药品生产为什么要控制微生物污染抗生素及其抗菌谱抗生素（antibiotics）：是由微生物（包括细菌、真菌、放线菌属）或高等动植物在生活过程中所产生的具有抗病原体或其它活性的一类次级代谢产物，能干扰其他生活细胞发育功能的化学物质。

抗菌谱：系泛指一种或一类抗生素（或抗菌药物）所能抑制（或杀灭）微生物的类、属、种范围。广谱抗生素能抗所有的微生物

可以对防止微生物污染的措施打折扣第二十九页，共四十二页，2022年，8月28日药品生产为什么要控制微生物污染●

微生物污染导致的药难事件*欣佛事件

发生时间：2006年8月严重后果：11人死亡，80多人严重不良反应，涉及10个省。原因分析：灭菌时间被缩1分钟，灭菌不彻底。悲惨结局：吊销许可证，巨额赔偿，工厂关闭，工人倒霉，总经理自杀罪！第三十页，共四十二页，2022年，8月28日如何控制微生物污染几个定义污染：在生产、取样、包装、或重包装、存储或运输中将化学或微生物杂质或异物不期望地引入到原材料、中间体、或原料药中。交叉污染：一个物料或产品与其它物料或产品混杂产生的污染。消毒：用物理方法或化学方法杀灭物体表面微生物的过程。灭菌：用物理方法或化学方法杀灭物体内外所有生命体的过程。菌落总数：是指样品经过处理，在一定条件下培养后，所得1g或1ml样品中所含微生物菌落的总数。以CFU表示。第三十一页，共四十二页，2022年，8月28日如何控制微生物污染影响微生物生长因素*温度：温度是微生物生长的重要因素，合适的温度范围内，微生物能进行正常的生命活动，过高或过低的温度微生物的活动会降低甚至停止，乃至死亡。*水分：如果没有水，微生物不会繁殖。

（将药品生产使用的器具、容器、抹布等洗净并干燥是重要的）*

营养：没有营养物质，微生物不会繁殖。（生产结束后及时洗净器具、容器、设备内的附着物是重要的）第三十二页，共四十二页，2022年，8月28日如何控制微生物污染常用化学消毒剂及消毒原理消毒剂名称消毒原理来苏尔、75%乙醇、70%异丙醇、甲醛通过与菌体蛋白质结合，使蛋白质变性、沉淀而达到抑菌或杀菌的作用。双氧水、过氧乙酸通过氧化微生物体内的活性基团而起到杀菌的作用。漂白粉、次氯酸钠、84消毒液通过卤化作用使蛋白质变性起到杀菌的作用。新洁尔灭通过改变细菌胞浆膜的通透性，使胞内物质外渗而起到杀菌作用。第三十三页，共四十二页，2022年，8月28日如何控制微生物污染影响化学消毒剂作用的因素*消毒剂的浓度：消毒剂的消毒效果，一般与其浓度成正比，75-80%的酒精杀菌效力最好；*微生物的种类：微生物的种类如细菌、病毒、真菌等对消毒剂的敏感性不同，*有机物的存在：有机物中的蛋白质易和许多消毒剂结合，严重降低消毒的效果。对物体进行消毒前必须先洗净油污。*温度：温度升高，杀菌力加强。温度升高10℃杀菌力增加2-5倍。*接触时间：细菌与消毒剂接触时间愈久，消毒效果越好。*长期使用一种消毒剂易使微生物产生耐药性。第三十四页，共四十二页，2022年，8月28日如何控制微生物污染消毒剂的正确使用*按SOP规定配制正确的消毒剂浓度；*清洗、消毒应连续进行，顺序必须是先清洗，去除油污等微生物保护膜后，再消毒；*应有足够的消毒时间；*应定期更换消毒剂，防止产生耐药性；*次氯酸钠、漂白粉不得与其它消毒剂混用，以防产生有毒的氯气。第三十五页，共四十二页，2022年，8月28日如何控制微生物药品生产的微生物污染原----水、空气、人、表面*水中的微生物来源：土壤、尘埃、污水、人畜排泄物及垃圾等。静水比活水更易滋生微生物。控制要求：经一系列处理、纯化、消毒达到饮用水标准和纯化水标准后方可用于原料药生产。纯化水系统应定期清洗和消毒，管道应避免死角，纯化水应打循环。制剂所用注射用水应测试细菌内毒素，合格后方可使用。我司工艺用水微生物限度标准：第三十六页，共四十二页，2022年，8月28日如何控制微生物污染饮用水和纯化水微生物控制标准控制项目纯化水标准饮用水标准细菌、霉菌、酵母菌总数

警戒限≤50CFU/ml

≤100CFU/ml

行动限≤80CFU/ml

控制限≤100CFU/ml

大肠杆菌

每100ml中不得检出每100ml中不得检出第三十七页，共四十二页，2022年，8月28日如何控制微生物污染注射用水微生物控制标准控制项目注射用水细菌内毒素每1ml中含内毒素量应小于0.25EU微生物限度细菌、霉菌和酵母菌总数每100ml不得过10个第三十八页，共四十二页，2022年，8月28日如何控制微生物污染*空气中的微生物空气中由于缺乏营养物质、干燥及日光的照射，大部分的微生物被杀死，所以，空气中没有微生物生长发育的条件。但由于空气的流动和风的作用，使地面的微生物飞扬到空中，因而，接近地面的空气层，就含有一定的微生物。虽然空气中的微生物数量较少，但危害大。因为空气流动快，流动的范围广，影响面大。控制要求：进入发酵罐和洁净区的空气应经过初、中、