天然药毒物分析课件

天然药毒物天然药毒物的中毒原因原因多方面、形式多样化投毒：味苦，多混于中药、茶等味较重的液体中。误食：多为小孩误饮：多为药酒用药不当：偏方、处理不当、过量等。长期吸毒或吸毒过量天然药毒物中毒特点多成分、结构复杂；有些将成分提取出来制成的药物制剂或毒品，成分可比较单纯。多具有较强的药理作用，有许多是常用中草药。毒性差异大，毒理作用也不同，多有特殊的中毒症状和病理改变。作为中草药的品种区域性较强，有些名称较乱，存在一种多名和同名异物的情况。天然药毒物检验方法方法形态学动物试验理化法化学反应光谱法色谱法免疫法联用法形态学检验——外观性状鉴别通过感观对天然药毒物的外观性状进行鉴别形状：根、茎、叶、花、果实、种子等大小：大小、长短、粗细等颜色：表面和内部的色泽表面特征：光滑还是粗糙，皱褶、槽沟、皮孔、毛茸等质地：软硬、脆韧、轻重、粘性、粉性等折断面：平整－粗糙、致密－疏松、断面纹路及颜色。气味形态学检验方法——显微形态鉴别利用显微镜观察药毒物的组织结构、细胞种类和形态以及细胞后含物的种类及形态等，通过与已知物核对进行鉴定。细胞种类包括纤维细胞、石细胞、栅栏细胞、薄壁细胞等）。后含物包括如淀粉粒、菊糖、草酸钙结晶、钟乳体、油珠等。常用封片试剂及作用（1）常用试剂作用水或稀甘油观察细胞及其后含物的形态和全貌。水合氯醛使收缩的细胞膨胀，溶解淀粉、蛋白－甘油质、叶绿素、树脂等，起净化和透化作用，便于某些特征形态的观察。乙醚－乙醇可溶解除去脂肪油、挥发油、树脂、鞣质等，便于后含物的鉴别。间苯三酚试剂使木化的石细胞、纤维、导管等细胞壁显红色。常用封片试剂及作用（2）常用试剂作用氯化锌碘试剂使纤维细胞显红色。碘试剂使淀粉显蓝色。苏丹Ⅲ试剂使油滴显桔红色。1∶1硫酸试剂使各种草酸钙结晶变成针状硫酸钙结晶。醋酸试剂使碳酸钙晶体（钟乳体）溶解，并释放出二氧化碳。盐酸使草酸钙和碳酸钙均溶解，并释放出二氧化碳。动物毒理学试验大多毒性大，且具有较强的生理活性和特殊的中毒症状。体外检材充裕、新鲜时，可用动物作急性毒性试验或毒效试验，以预试是否有剧毒或有某类毒物存在。常用颜色反应和沉淀反应试剂颜色反应和沉淀反应的选择性和实用性选择性一种试剂通常可与多种生物碱发生反应。一种生物碱一般不可能与所有试剂发生反应。许多含氮化合物（碱性药物、蛋白质等）可能发生类似的反应。适用性

预试：选几种非特异的试剂检验，在有足够覆盖面和灵敏度的情况下，结果均为阴性时，基本可排除生物碱：结果为阳性时，不能作为肯定生物碱存在的依据，需用其它方法确证。

鉴别：预试结果为阳性时，可选择专一性较强的特殊结晶反应或颜色反应鉴别。光谱法和色谱法光谱法毒性成分大多结构复杂，一般都具有紫外吸收，有些甚至有荧光。体外纯品药物制剂或较纯的毒品可直接用光谱法检验。中草药、植物、掺假毒品、体内检材，因成分复杂，一般需与色谱联用。色谱法和色－质联用因具分离能力，灵敏度较高，是天然药毒物常用的分析手段。色－质联用是目前最有效的手段。乌头生物碱的结构母体结构为由19个碳构成的乌头胺。毒性大的一般是在C8和C14位上的醇基与有机酸形成的双酯型生物碱。C8接的为乙酸，C14多接苯甲酸，少数为大茴香酸。注：LD50为小鼠按mg/kg（干燥根）i.v.给药。乌头的外观形态大致可分为两类纺锤形或圆锥形，中部多向一侧膨大，有的稍有弯曲，如川乌（乌头根）、草乌（北乌头根）。长圆锥形或长圆柱形，直径较小，质坚较脆，如雪上一支蒿。个别品种由数个根呈链状连生，如多根乌头。乌头的显微形态乌头生物碱的性质和检材处理不溶于水、石油醚，溶于醇、乙醚、氯仿等有机溶剂。碱性，可与酸成盐。酯键极易水解，酸、碱、加热均可加速水解。一般在氨碱性条件下用有机溶剂提取。不宜用Stta-Otto法提取分离。HPLC-MS检测乌头生物碱及其代谢产物无需复杂的衍生化处理可同时检测各种乌头生物碱及其代谢产物，包括乌头胺。不必每次用标准品对照。二、马钱子（番木鳖）来源：马钱科植物马钱或云南马钱的干燥成熟种子。成分：士的宁（strychnine,番木鳖碱）和马钱子碱（brucine,布鲁生）。药用：中医用于治疗风湿顽痹、麻木瘫痪、跌打损伤等。硝酸士的宁注射液西医临床用作脊髓中枢兴奋剂。毒性：剧毒，治疗量与中毒量接近。硝酸士的宁治疗1～3毫克，中毒5～10毫克，致死30毫克。马钱子碱毒性仅为士的宁的1/8～1/3。马钱子生品属剧毒中草药管制品种。马钱子的显微形态表皮为单细胞毛，细胞分化向一侧斜伸，基部膨大，似石细胞，壁极厚，强烈木化，有纵向扭曲纹孔，，毛体有数条脊状增厚，胞腔断面类圆形；种皮内层为颓废的棕色薄壁细胞；内胚乳细胞呈多角形、长多角形或类圆形，壁厚，隐约可见胞间连丝（碘液可使之明显），细胞中含有脂肪、油滴和糊粉粒。士的宁和马钱子碱的结构士的宁和马钱子碱的性质及检材处理无色或白色晶体；难溶于水，溶于乙醇、氯仿；士的宁几乎不溶于乙醚，马钱子碱溶于乙醚；碱性，可与酸成盐；硝酸士的宁和硫酸马钱子碱溶于水、乙醇、氯仿；性质稳定一般碱性条件下，有机溶剂提取；挥干残渣或乙醚液里，用酸水液反提净化；Stas-Otto法可适用于腐败检材。士的宁和马钱子碱的化学反应

反应方法及结果适用钒酸铵－硫酸士的宁蓝紫红橙预试马钱子碱红棕士的宁硫酸液＋重铬酸钾晶体重铬酸钾－硫酸紫堇色线状条纹放置紫红较特殊橙黄色H2O

变黄马钱子碱氧化深红

氯化亚锡紫区别士的宁硝酸士的宁淡黄蒸干和马钱子碱残渣氨气紫红士的宁和马钱子碱的紫外光谱二者光谱不同，可以区别。酸水液中，士的宁最大吸收为254nm。酸水液中，马钱子碱最大吸收为265nm和300nm.马钱子的青蛙毒性试验机理：脊髓中枢兴奋症状：间歇性、强直性四肢肌肉痉挛，蛙体及后腿僵直，前肢合抱，外界稍有声或光刺激，立即再次引起全身强直痉挛。三、颠茄生物碱

来自茄科几个属的植物，是由莨菪烷衍生的氨基醇类与有机酸形成的酯类生物碱，又称莨菪生物碱（tropanealkaloids).

主要几种生物碱又名莨菪碱(hyoscyamin)天仙子胺，其外消旋体称阿托品（atropine）东莨菪碱(scopalamine)天仙子碱山莨菪碱(anisodamine)654–2樟柳碱(anisodine)含颠茄生物碱的药物常用西药：硫酸阿托品及东莨菪碱、山莨菪碱和樟柳碱的氢溴酸盐。抗胆碱药。有抑制腺体分泌、松弛平滑肌、加速心率、扩大瞳孔、解痉止痛等作用，阿托品常用于有机磷农药中毒抢救。含颠茄生物碱药毒物的检验方法形态学方法化学反应UV各种色谱动物试验体外中草药检材中生物碱的鉴别扩瞳试验洋金花的形态洋金花粉末的显微形态天仙子和南天仙子的形态天仙子：茄科莨菪属（莨菪）或赛莨菪属（三分三）植物的干燥种子。南天仙子：爵床科植物水蓑衣的种子、颠茄生物碱的结构和性质水中难溶，易溶于醇、氯仿、乙醚等；碱性，可与酸成盐，易溶于水；碱性或酸性条件下，酯键易水解，受热加速。一般在弱碱性条件下，有机溶剂提取。提取时应注意避免水解。颠茄生物碱的化学反应反应原理和结果适用硝化反应莨菪酸结构中的苯硝化成三硝基颠茄生物碱(Vitali反应)衍生物，后者在碱性条件下分子预试重排成醌式结构显紫色。阿托品的碱性可使氧化汞分解成氯化汞反应黄色氧化汞，加热变红。东莨菪可区别阿碱碱性较弱，只能与氯化汞生成托品与东白色复盐。莨菪碱樟柳碱的邻二羟基结构可被过碘可区别樟氧化缩合反应酸氧化成甲醛，后者在醋酸铵中柳碱和其可与乙酰丙酮缩合而显黄色。他碱碘－碘化钾稀硫酸中，阿托品可形成似飞鸟阿托品确结晶反应状的结晶。证颠茄生物碱的紫外吸收吸收主要来自结构中含苯环的莨菪酸部分，呈“山”字形苯环B带吸收。各种颠茄生物碱吸收光谱相似。乙醇中阿托品最大吸收为252nm，257nm和263nm.可用于现场药剂、安剖、注射器等体外检材的预试和筛查。色谱法检验颠茄生物碱碱性较强，薄层展开剂中常加入少量碱抑制斑点拖尾；HPLC一般采用反相离子对色谱法，在流动相中加入十二烷基磺酸钠（SDS）等离子对试剂，酸性条件下，十二烷基磺酸根离子与带正电荷的生物碱形成离子对，可使结构相似的几种颠茄生物碱得到较好分离。

猫眼扩瞳试验机理：阿托品和东莨菪碱具有强扩瞳作用，利用猫作试验，观察猫眼瞳孔变化。山莨菪碱和樟柳碱的扩瞳作用较弱。古柯碱有类似生理作用。四、斑蝥来源：是芫青科昆虫，南方大斑蝥或黄黑小斑蝥的干燥虫体。主要成分：斑蝥素(cantharidin)药用：治疗腰腿痛、风湿痛、疥癣、恶疮等，现有用来治疗肿瘤的。毒性：大毒。生品属国家规定的剧毒中草药管制品种。斑蝥的检验方法形态学方法理化方法GC、GC/MS斑蝥虫斑蝥素斑蝥形态绿芫青（青娘子）：与斑蝥同科不同属，有些也含斑蝥素。红娘子：蝉科。早年文献认为含斑蝥素，80年代有研究认为不含斑蝥素。青娘子和红娘子也属于剧毒中草药管制品种。斑蝥素的理化性质和检材处理无色结晶，熔点218℃，120℃开始升华；不溶于水，难溶于石油醚，微溶于热水、乙醇、乙醚，较易溶于丙酮、氯仿；斑蝥素是斑蝥酸的内酸酐，遇碱可开环成盐而溶于水，遇酸立即闭环。可利用升华和开环性质进行分离净化。斑蝥素的理化检验方法结果对二甲基苯甲醛反应紫红或樱红色其他一些酚类、吲