微生物营养修改

微生物营养修改第一页，共七十七页，2022年，8月28日第一节微生物需要的营养物质第二节微生物的营养类型第四节培养基本章内容第三节微生物对营养物质的吸收方式第二页，共七十七页，2022年，8月28日

重点:

1、微生物的营养物质及其功能(水分、碳源、氮源、

无机盐、生长因子)；

2、微生物的四种营养类型(化能有机异养型);

3、四种运输营养物质方式的比较；

4、配制培养基的原则；

5、鉴别性培养基与选择性培养基；

固体培养基与半固体培养基；

天然培养基与合成培养基；

速效碳源与迟效碳源；

速效氮源与迟效氮源。

第三页，共七十七页，2022年，8月28日微生物细胞水：70%-90%干物质有机物蛋白质、糖、脂、核酸、维生素等及其降解产物

无机物（盐）微生物、动物、植物之间存在“营养上的统一性”细胞化学元素组成：主要元素：碳、氢、氧、氮、磷、硫、钾、镁、钙、铁等；微量元素：锌、锰、钠、氯、钼、硒、钴、铜、钨、镍、硼等。第一节微生物需要的营养物质微生物细胞的化学组成第四页，共七十七页，2022年，8月28日第五页，共七十七页，2022年，8月28日

一、水分

水是微生物生长不可缺少的物质。水在细胞中的生理功能主要有：①作为细胞原生质胶体的主要成分。②具有溶剂与运输介质的作用，即营养物质必须先溶解于水中才能被微生物吸收和利用，以及营养物质的吸收和代谢产物的排出都必须通过水来完成。③参与细胞内一切生化反应，并作为代谢过程的内部介质。④水是热的良导体，有利于散热，可调节细胞的温度。⑤水的比热高，能有效吸收代谢过程中放出的热，降低热能，使菌体温度不致过高。第六页，共七十七页，2022年，8月28日二、碳源(sourceofcarbon)

在微生物生长过程中，凡是为微生物提供碳素来源的营养物质称为碳源。第七页，共七十七页，2022年，8月28日碳源主要生理功能：是构成微生物细胞物质和代谢产物，并为微生物生命活动提供能量。凡是能被微生物直接吸收利用的碳源(如葡萄糖)称为速效碳源。凡是不被微生物直接吸收利用的碳源(如乳糖或半乳糖)称为迟效碳源。

实验室中常用的碳源：葡萄糖和蔗糖。发酵工业中常用碳源：糖类物质。如：饴糖谷类淀粉(玉米、大米、高梁米、小米、大麦、小麦等)

薯类淀粉(甘薯、马铃薯、木薯等)

野生植物淀粉麸皮、米糠、酒糟、废糖蜜、造纸厂的亚硫酸废液等。

第八页，共七十七页，2022年，8月28日三、氮源(sourceofnitrogen)在微生物生长过程中，凡是为微生物提供氮素来源的营养物质称为氮源。第九页，共七十七页，2022年，8月28日氮源生理功能：是用于合成细胞物质和代谢产物中的含氮化合物，一般不提供能量。凡是能被微生物直接吸收利用的氮源称为速效性氮源。例如：铵盐、硝酸盐、尿素等水溶性无机氮化物易被细胞吸收后直接利用。凡是不能被微生物直接吸收利用的氮源称为迟效性氮源。例如：饼粕中的氮主要以大分子蛋白质的形式存在，需进一步降解成小分子的肽和氨基酸后才能被微生物吸收利用。实验室中常用的氮源有：硫酸铵、硝酸盐(硝酸铵、硝酸钾、硝酸钠)、尿素及牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、多肽、氨基酸等。发酵工业中常用的氮源有：鱼粉、蚕蛹粉、黄豆饼粉、花生饼粉、玉米浆、酵母粉等作氮源。第十页，共七十七页，2022年，8月28日

有机物：化能异养微生物的能源(同碳源)

化学物质：

（化能营养型）无机物：化能自养微生物(不同于碳源)

能源辐射能：光能自养和光能异养微生物的能源

（光能营养型）化能自养微生物的能源是还原态的无机物质，如NH4+、NO2—、S、H2S、H2、Fe2+等，四、能源(energysource)能源是指为微生物的生命活动提供最初能量来源的营养物质或辐射能。第十一页，共七十七页，2022年，8月28日五、无机盐(inorganicsalt)无机盐是指为微生物生长提供的除碳源、氮源以外的各种必需矿物元素。第十二页，共七十七页，2022年，8月28日第十三页，共七十七页，2022年，8月28日无机盐其生理功能是：①构成细胞的组成成分，维持生物大分子和细胞结构的稳定性；②参与酶的组成，作为酶活性中心的组分，以及作为酶的辅助因子和激活剂；③调节并维持细胞渗透压、pH值和氧化还原电位；④作为某些自养微生物的能源物质和无氧呼吸时的氢受体。主要元素：凡是微生物生长所需浓度在

10-3～10-4mol/L(培养基中含量)范围内的矿物元素。微量元素：凡是微生物生长所需浓度在

10-6～10-8mol/L(培养基中含量)范围内的矿物元素。

第十四页，共七十七页，2022年，8月28日六、生长因子(growthfactor)第十五页，共七十七页，2022年，8月28日生长因子概念：又称生长因素。通常指微生物生长不可缺少、本身又不能合成或合成量不足以满足机体生长需要的微量有机化合物。根据生长因子的化学结构及其在机体内的生理作用，分为三大类：维生素氨基酸嘌呤或嘧啶在实验室制备培养基时常用生长因子：酵母膏、牛肉膏、麦芽汁、肝浸液等天然物质。第十六页，共七十七页，2022年，8月28日异养型生物自养型生物生长所需要的营养物质生物生长过程中能量的来源光能营养型化能营养型光能自养型：以光为能源，不依赖任何有机物即可正常生长光能异养型：以光为能源，但生长需要一定的有机营养化能自养型：以无机物的氧化获得能量，生长不依赖有机营养物化能异养型：以有机物的氧化获得能量，生长依赖于有机营养物质第二节微生物的营养类型第十七页，共七十七页，2022年，8月28日

微生物的营养类型

微生物营养类型(Ⅰ)第十八页，共七十七页，2022年，8月28日微生物的营养类型(Ⅱ)

微生物的营养类型光能无机自养型和光能有机异养型微生物可利用光能生长，在地球早期生态环境的演化过程中起重要作用。第十九页，共七十七页，2022年，8月28日无机自养型微生物具有高度的合成能力，能在完全是无机物的环境中生长繁殖。它们具有完整的酶系统，能以CO2或碳酸盐为碳源。需外界供应能量来实现。根据微生物需要的能源不同，又可将之分为两大类:光能无机自养型化能无机自养型一、无机自养型微生物第二十页，共七十七页，2022年，8月28日1．光能无机自养型（光能自养型）碳源：以C02作为唯一碳源或主要碳源；能源：利用光能；电子供体：以无机物如水、硫化氢、硫代硫酸钠或其他无机硫化物作为氢供体将CO2还原成细胞物质，同时产生元素硫；真核藻类和蓝细菌紫硫细菌和绿硫细菌

光能自养型微生物包括蓝细菌（含叶绿素）、红硫细菌和绿硫细菌等少数微生物（含细菌叶绿素），由于含有光合色素，因而能使先能转变成化学能（ATP），供机体直接利用。第二十一页，共七十七页，2022年，8月28日以CO2或碳酸盐作为唯一或主要碳源，以无机物氧化释放的化学能为能源,，利用电子供体如氢气、硫化氢、二价铁离子或亚硝酸盐等使CO2还原成细胞物质。

2NH4++3O2→2NO2-+2H2O+4H++132Kcal

NO2-+1/2O2→NO3-+18.1Kcal亚硝化细菌硝化细菌H2S+1/2O2→S+H2O+50.1KcalS+11/2O2+H2O→H2SO4+149.8Kcal硫化细菌:（硫杆菌属，硫微螺菌属）

2Fe2++1/2O2+2H+→2Fe3++H2O+21.2Kcal铁细菌H2+1/2O2→H2O+56.7Kcal氢细菌：具有氢化酶，从氢的氧化获取能量，同化CO2化能无机自养型只存在于微生物中，可在完全无机及无光的环境中生长。它们广泛分布于土壤及水环境中,参与地球物质循环；2.化能无机自养型（化能自养型）第二十二页，共七十七页，2022年，8月28日生长所需要的能量来自无机物氧化过程中放出的化学能；以CO2或碳酸盐作为唯一或主要碳源进行生长时，利用H2、H2S、S、Fe2+、NH3或NO2-等作为电子供体使CO2还原成细胞物质。2.化能无机自养型（化能自养型）第二十三页，共七十七页，2022年，8月28日铁细菌

能通过铁的氧化获得能量,将亚铁离子氧化成高铁离子，放出能量。

例如:氧化亚铁硫杆菌具有将硫或硫代硫酸盐氧化生成硫酸和将亚铁氧化成高铁的能力。它们常存在于含铁量高的酸性水中。氧化黄铁矿的化学过程是：

2FeS2+5O2+2H2O—→2FeSO4+2H2SO2

2FeSO4+H2SO4+1/2O2

—→Fe2(SO4)3+H2O

生成的Fe2(SO4)3是强氧化剂和溶剂，可以溶解铜矿(CuS)，目前已用于尾矿或低品矿藏中铜等金属元素的浸出。

第二十四页，共七十七页，2022年，8月28日有机异养型微生物需要提供含碳有机物作为碳源才能生存的微生物。

根据微生物需要的能源不同，又可将之分为两大类:光能有机异养型化能有机异养型二、有机异养型微生物第二十五页，共七十七页，2022年，8月28日不能以CO2为主要或唯一的碳源；以有机物作为供氢体，利用光能将CO2还原为细胞物质；在生长时大多数需要外源的生长因子；例如，红螺菌属中的一些细菌能利用异丙醇作为供氢体，将CO2还原成细胞物质，同时积累丙酮。CHOH+CO2H3CH3C2光能光合色素2CH3C0CH3+[CH2O]+H2O1．光能有机异养型（光能异养型）第二十六页，共七十七页，2022年，8月28日光能无机自养与光能有机异养型主要区别

在于氢供体和电子供体的来源不同前者可单独利用CO2作为唯一碳源或主要碳源，并以无机物作为氢供体，使CO2还原成细胞物质；而后者虽然能利用CO2，但必须在低分子有机物同时存在时才能迅速生长繁殖，并以简单有机物作为氢供体，使CO2还原成细胞物质。

第二十七页，共七十七页，2022年，8月28日生长所需要的能量均来自有机物氧化过程中放出的化学能；生长所需要的碳源主要是一些有机化合物，如淀粉、糖类、纤维素、有机酸等。有机物通常既是碳源也是能源；大多数细菌、真菌、原生动物都是化能有机异养型微生物；所有致病微生物均为化能有机异养型微生物；2．化能有机异养型（化能异养型）第二十八页，共七十七页，2022年，8月28日腐生型(metatrophy)：可利用无生命的有机物(如动植物尸体和残体)作为碳源；寄生型(paratrophy)：寄生在活的寄主机体内吸取营养物质,离开寄主就不能生存；在腐生型和寄生型之间还存在中间类型：兼性腐生型(facultivemetatrophy)；兼性寄生型(facultiveparatrophy)；2．化能有机异养型（化能异养型）第二十九页，共七十七页，2022年，8月28日不同营养类型之间的界限并非绝对：异养型微生物并非绝对不能利用CO2；自养型微生物也并非不能利用有机物进行生长；有些微生物在不同生长条件下生长时,其营养类型也会发生改变；例如紫色非硫细菌(purplenonsulphurbacteria)：没有有机物时，同化CO2，

为自养型微生物；有机物存在时，利用有机物进行生长，为异养型微生物；光照和厌氧条件下，利用光能生长，为光能营养型微生物；黑暗与好氧条件下，依靠有机物氧化产生的化学能生长，为化能营养型微生物；微生物营养类型的可变性无疑有利于提高其对环境条件变化的适应能力第三十页，共七十七页，2022年，8月28日微生物对营养物质的吸收主要有单纯扩散、促进扩散、主动运输、基团转位4种方式。第三节微生物对营养物质的吸收方式疏水性分子苯、氧气、氮气不带电荷的小的极性分子脲、甘油、水、二氧化碳不带电荷的大的极性分子葡萄糖、蔗糖离子H＋,Na+,K+,Cl,HCO3-,Ca2+,Mg2+内外人工磷脂双分子层膜对不同类型分子的相对透性第三十一页，共七十七页，2022年，8月28日第三节微生物对营养物质的吸收方式一、单纯扩散(diffusion)扩散并不是微生物细胞吸收营养物质的主要方式,水是唯一可以通过扩散自由通过原生质膜的分子,脂肪酸、乙醇、甘油、苯、一些气体分子(O2、CO2)及某些氨基酸在一定程度上也可通过扩散进出细胞。第三十二页，共七十七页，2022年，8月28日物质跨膜扩散的能力和速率与该物质的性质有关,分子量小、脂溶性、极性小的物质易通过扩散进出细胞。第三十三页，共七十七页，2022年，8月28日被动的物质跨膜运输方式物质运输过程中不消耗能量参与运输的载体本身的分子结构不发生变化不能进行逆浓度运输运输速率与膜内外物质的浓度差成正比。通过促进扩散进行跨膜运输的物质需要借助与载体(carrier)的作用才能进入细胞(图2-2)，而且每种载体只运输相应的物质，具有较高的专一性。二、促进扩散(facilitateddiffusion)第三十四页，共七十七页，2022年，8月28日图2-2促进扩散示意图图2-1单纯扩散示意图

第三十五页，共七十七页，2022年，8月28日特点：消耗能量，可逆浓度运输，载体蛋白广泛存在于微生物中的一种主要的物质运输方式运输物质所需能量来源：好氧型微生物与兼性厌氧微生物直接利用呼吸能；厌氧型微生物利用化学能(ATP)；光合微生物利用光能；嗜盐细菌通过紫膜(purplemembrane)利用光能；三、主动运输(activetransport)第三十六页，共七十七页，2022年，8月28日

图2-3主动运输示意图第三十七页，共七十七页，2022年，8月28日微生物细胞对糖类(乳糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、蜜二糖等)氨基酸(丙氨酸、丝氨酸、甘氨酸等)核苷乳酸和葡萄糖醛酸某些阴离子(PO43-、SO42-)和阳离子(Na+

、K+)等都是通过主动运输吸收。三、主动运输(activetransport)第三十八页，共七十七页，2022年，8月28日

需特异性载体蛋白的参与；需耗能的一种物质运输方式；其特点是：有一个复杂的运输系统来完成物质的运输溶质分子在运输前后发生化学变化因此，不同于一般的主动运输。四、基团转位(grouptranslocation)第三十九页，共七十七页，2022年，8月28日四、基团转位(grouptranslocation)有一个复杂的运输系统来完成物质的运输溶质分子在运输前后发生化学变化第四十页，共七十七页，2022年，8月28日磷酸烯醇式丙酮酸—磷酸糖转移酶运输系统(PTS)，简称磷酸转移酶系统。PTS一般由4种不同的蛋白质组成：酶Ⅰ、酶Ⅱ、酶Ⅲ(又称因子Ⅲ)和HPr。第四十一页，共七十七页，2022年，8月28日图2-4磷酸转移酶系统输送糖的示意图第四十二页，共七十七页，2022年，8月28日基团转位运输糖和糖的衍生物(如乳糖、葡萄糖、甘露糖、果糖、麦芽糖、N-乙酰葡萄糖胺)丁酸、核苷酸、嘌呤、嘧啶等。主要存在于厌氧和兼性厌氧的大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和乳酸杆菌等细菌中。第四十三页，共七十七页，2022年，8月28日第四十四页，共七十七页，2022年，8月28日培养基几乎是一切对微生物进行研究和利用工作的基础培养基（medium）是人工配制的，适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。任何培养基都应该具备微生物生长所需要六大营养要素：碳源、氮源、无机盐、能源、生长因子、水任何培养基一旦配成，必须立即进行灭菌处理；常规高压蒸汽灭菌：1.05kg/cm2,121.3℃15-30分钟；

0.56kg/cm2,112.6℃15-30分钟某些成分进行分别灭菌；过滤除菌；第四节培养基第四十五页，共七十七页，2022年，8月28日1.根据培养目的需要选择适宜的营养物质2.注意营养物质的浓度与配比要合适3.控制培养基的条件4.原料来源的选择力求节约5.灭菌处理在微生物学研究和生长实践中，配置合适的培养基是一项最基本的要求。一、配制培养基的原则第四十六页，共七十七页，2022年，8月28日培养不同的微生物必须采用不同的培养条件；培养目的不同，原料的选择和配比不同；例如枯草芽孢杆菌：一般培养：肉汤培养基或LB培养基；自然转化：基础培养基；观察芽孢：生孢子培养基；产蛋白酶：以玉米粉、黄豆饼粉为主的产酶培养基；一、配制培养基的原则1.根据培养目的需要选择适宜的营养物质第四十七页，共七十七页，2022年，8月28日营养物质的浓度适宜；营养物质之间的配比适宜；高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不仅不能维持和促进微生物的生长，反而起到抑制或杀菌作用。培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累，其中碳氮比(C/N)的影响较大。2.注意营养物质浓度与配比要合适第四十八页，共七十七页，2022年，8月28日谷氨酸产生菌发酵生产谷氨酸时：

培养基C/N为4/1时，菌体大量繁殖，谷氨酸积累量较少；

当C/N比为3/1时，菌体繁殖受到抑制，谷氨酸大量积累。

通常菌体的数量与代谢产物的积累量成正比。为了获得较多的代谢产物，必须先培养大量的菌体。第四十九页，共七十七页，2022年，8月28日pH氧化还原电位渗透压3.控制培养基的条件第五十页，共七十七页，2022年，8月28日

pH改变的可能有如下情况3.控制培养基的条件(1)控制培养基的pH值第五十一页，共七十七页，2022年，8月28日①磷酸盐类：K2HPO4和KH2PO4是常用的缓冲剂。只能在一定范围(pH6.0～7.6)内起调节作用。K2HPO4溶液呈碱性，KH2PO4溶液呈酸性，它们的等摩尔溶液的pH值为6.8。如果微生物代谢活动产生酸性物质使培养基的酸度增加，则弱碱盐变为弱酸盐。

K2HPO4＋H＋—→KH2PO4＋K＋

如果培养基的碱性增强，则弱酸盐变为弱碱盐：

KH2PO4＋K＋＋OH－—→K2HPO4＋H2O第五十二页，共七十七页，2022年，8月28日②碳酸钙：当微生物生长产酸使培养基的pH值下降时，CaCO3不断解离，游离出CO32-，CO32-不稳定，与H+形成H2CO3，最后释放出CO2，在一定范围内缓解了培养基pH的降低。若微生物(如乳酸菌)产生大量的乳酸，可在培养基中加入1%～5%的CaCO3中和。此外，氨基酸、肽、蛋白质都属于两性电解质，也有缓冲剂的作用。因此在实验室中常用蛋白胨、牛肉膏、氨基酸为天然缓冲系统配制培养基。第五十三页，共七十七页，2022年，8月28日氧化还原电位又称氧化还原电势（redoxpotential），是度量某氧化还原系统中的还原剂释放电子或氧化剂接受电子趋势的一种指标，其单位是V（伏）或mV（毫伏）就向微生物与pH的关系一样，不同类型微生物生长对氧化还原电位(Eh)的要求不同好氧性微生物：+0.1伏以上时可正常生长,

以+0.3～+0.4V为宜；厌氧性微生物：低于+0.1V条件下生长；兼性厌氧微生物：+0.1V以上时进行好氧呼吸,+0.1V以下时进行发酵。(2)氧化还原电位(Eh)第五十四页，共七十七页，2022年，8月28日◆增加通气量(如振荡培养、搅拌)提高培养基的氧分压，或加入氧化剂，从而增加Eh值；◆在培养基中加入抗坏血酸（0.1%）、硫化氢(0.025%)、半胱氨酸(<0.05%)、谷胱甘肽、二硫苏糖醇、巯基乙酸、Na2S庖肉等还原性物质可降低Eh值。培养基中加入氧化还原指示剂刃天青可对氧化还原电位进行间接测定(2)氧化还原电位(Eh)第五十五页，共七十七页，2022年，8月28日氧化还原电位与氧分压和pH有关,也受某些微生物代谢产物的影响(2)氧化还原电位(Eh)第五十六页，共七十七页，2022年，8月28日配制培养基时要掌握营养物质的浓度。常在培养基中加入适量的NaCl以提高渗透压。(3)调节渗透压第五十七页，共七十七页，2022年，8月28日特别是在工业发酵中，培养基用量大，更应注意利用低成本的原料，降低产品成本。

例如：废糖蜜(制糖工业中含有蔗糖的废液)、

乳清废液(乳品工业中含有乳糖的废液)、

豆制品工业废液、纸浆废液、各种发酵废液及酒糟、酱渣等发酵废弃物大量的农副产品如麸皮、米糠、玉米浆、豆饼、豆渣、花生饼、棉子饼、葵花籽饼、菜籽饼、酵母泥等都可以作为发酵工业的良好原料。(4)原料来源的选择力求节约第五十八页，共七十七页，2022年，8月28日采用高压蒸汽灭菌◆一般培养基用0.105Mpa(1.05kg/cm2，121.3℃)条件下维持15～30min◆含糖培养基常用0.056Mpa(0.56kg/cm2，112.6℃)，15～30min◆或先将糖过滤除菌或间歇灭菌，再与其他已灭菌的成分混合。

(因长时间的高温灭菌会使糖类物质形成氨基糖、焦糖)(5)灭菌处理第五十九页，共七十七页，2022年，8月28日根据微生物的种类可分为细菌、放线菌、酵母菌和霉菌培养基。

培养异养型细菌用牛肉膏蛋白胨培养基；

培养自养型细菌用无机合成培养基；

培养放线菌用高氏1号合成培养基；

培养酵母菌用麦芽汁培养基；

培养霉菌则一般用查氏合成培养基。二、培养基的类型及应用1.根据微生物的种类第六十页，共七十七页，2022年，8月28日◆是指含有化学成分尚不清楚或化学成分不恒定的天然有机物的培养基。例如：肉浸膏、酵母浸膏、蛋白胨、豆芽汁、马铃薯、玉米粉、麸皮、牛奶、血清、胡萝卜汁、番茄汁等制成的培养基。

缺点：成分不清楚，营养成分难控制，做精细的科学实验结果重复性差。2.根据培养基的成分(1)天然培养基(complexmedium)第六十一页，共七十七页，2022年，8月28日适合于一般实验室中的菌种培养，发酵工业中生产菌种的培养和某些发酵产物的生产。第六十二页，共七十七页，2022年，8月28日◆它是由化学成分完全清楚的物质配制而成的培养基。高氏1号培养基和查氏培养基就属于此种类型优点：培养基的组成成分精确，实验结果重复性好，缺点：价格较贵，且培养微生物生长缓慢。在实验室内一般适用于对微生物营养、代谢、分类、鉴定、生物的测定和菌种选育、遗传分析等方面的研究工作。(2)合成培养基(syntheticmedium)第六十三页，共七十七页，2022年，8月28日◆是指在天然培养基的基础上适当加入已知成分的化学试剂，使之更充分满足微生物对营养物质的要求。例如：无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如马铃薯等。培养真菌的马铃薯蔗糖培养基就属于半合成培养基。(3)半合成培养基(semi-syntheticmedium)第六十四页，共七十七页，2022年，8月28日固体培养基半固体培养基液体培养基3．根据培养基的物理状态划分第六十五页，共七十七页，2022年，8月28日1、普通营养琼脂培养基配制方法（细菌）配方：牛肉膏5g，蛋白胨10g，NaCl5g，琼脂15～20g，水1000ml，pH7.4。配法：药品称量→温水溶解→1mol/LNaOH调pH至7.4→液体培养基→分装三角瓶→按量加入1.5%的琼脂→加棉塞→包扎标记→0.1MPa灭菌20min→无菌检查2、马铃薯葡萄糖琼脂培养基配制方法（真菌）配方：马铃薯200g，葡萄糖(蔗糖)20g，琼脂15g，水1000ml，自然pH。配法：取去皮马铃薯200g，切成小块，加水1000ml，加热煮沸25～30min后用纱布过滤，然后补足失水至所需体积。按每100ml马铃薯汁加入2g葡萄糖或蔗糖，再加入所需量的琼脂，继续加热溶化并补足失水。分装、加塞、包扎后，高压蒸汽灭菌0.1MPa(如是葡萄糖，应为0.07MPa)灭菌20min。3、MRS琼脂培养基配制方法(乳酸菌)配方：葡萄糖20g(或10g)，蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母膏(或干粉)5g，柠檬酸二铵2g（或柠檬酸钠5g），磷酸氢二钾2g，乙酸钠5g，MgSO4·7H2O0.58g（或0.2g），MnSO4·4H2O0.25g(或0.05g)、吐温-80lml、琼脂15g，蒸馏水1000ml，pH6.2～6.4。若培养乳酸球菌则应调节pH6.8～7.0。4、高氏1号（放线菌）可溶性淀粉20g，KNO31g,NaCl0.5g,K2HPO40.5,MgSO4·7H2O0.5，FeSO4·7H2O0.01g,琼脂20g，蒸馏水1000ML,pH7.4第六十六页，共七十七页，2022年，8月28日固体培养基为微生物生长提供了一个营养表面，在其上生长的微生物可以形成单个菌落。因此，固体培养基常用于微生物的分离、鉴定、活菌计数和菌种保藏等。食用菌栽培和工业发酵中也常使用。3．根据培养基的物理状态划分(1)固体培养基(solidmedium)

第六十七页，共七十七页，2022年，8月28日在液体培养基中加入少量(0.2％～0.7％)的琼脂制成半固体状态的培养基。半固体培养基常用于观察细菌的运动特征、菌种保藏、厌氧菌培养、菌种鉴定和噬菌体效价的测定等方面。

(2)液体培养基(liquidmedium)(3)半固体培养基(semisolidmedium)

适用于大规模的工业生产和实验室内进行微生物生理代谢等基础理论的研究工作。第六十八页，共七十七页，2022年，8月28日

◆在一定条件下含有某种微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基，也称为基本培养基。◆在一定条件下含有某种微生物生长繁殖所需的所有营养物质的培养基。牛肉膏蛋白胨培养基就是枯草芽孢杆菌等的完全培养基4.根据培养基的用途划分(1)基础培养基(minimummediumMM)完全培养基(compl