标准解读

《NY/T 540-2002 鸡病毒性关节炎琼脂凝胶免疫扩散试验方法》是一项农业行业标准，用于检测鸡病毒性关节炎病毒（Avian Reovirus, ARV）的抗体或抗原。该标准详细规定了使用琼脂凝胶免疫扩散技术进行检测的具体步骤和要求。

首先，标准明确了试验所需的材料与试剂，包括但不限于特异性抗血清、待检样品（如鸡血清）、琼脂糖等。其中，抗血清需确保其对ARV具有高度特异性和敏感性；而琼脂糖作为介质，则要求纯度高、透明度好以利于观察反应结果。

接着，在制备琼脂板时，按照特定比例将琼脂糖溶解于缓冲液中并加热至完全融化后倒入平皿冷却成固态。随后，在琼脂板上打孔形成圆形小坑，并分别加入适量的参考抗血清及待测样本溶液。放置一段时间让两者在琼脂内部自由扩散相遇，通过观察两者之间是否产生白色沉淀线来判断是否存在特异性免疫反应。

此外，标准还规定了对照设置的重要性，包括阳性对照、阴性对照以及空白对照等，用以验证实验的有效性和准确性。只有当阳性对照出现预期的沉淀线且阴性对照无明显变化时，才能认为本次实验条件符合要求，进而对实际样本的结果做出准确评估。


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  • 被代替
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  • 2002-08-27 颁布
  • 2002-12-01 实施
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s.11.220NY中华人民共和国农业行业标准NY/T540-2002鸡病毒性关节炎琼脂凝胶免疫扩散试验方法Agargelimmunodiffusiontestforviralarthritis2002-08-27发布2002-12-01实施中华人民共和国农业部发布

NY/T540-2002为了更好地适应我国动物卫生工作发展的需求，为基层兽医、科研单位、口岸检疫部门、无特定病原（SPF)鸡场和大、中型鸡场提供一种可操作性强的标准，特制定鸡病毒性关节炎琼脂凝胶免疫扩散试验技术标准本标准是根据实验室多年来在鸡病毒性关节炎琼脂凝胶免疫扩散试验方法研究和应用的基础上制定的。本标准的附录A为规范性附录本标准由农业部畜牧兽医局提出本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。本标准起草单位：农业部动物检疫所。本标准主要起草人：吴晓东、吴延功、朱万光、杜元钊、范根成、刘佩兰。

NY/T540-2002鸡病毒性关节炎琼脂凝胶免疫扩散试验方法1范圃本标准规定了检测鸡血清中鸡病毒性关节炎群特异性抗体的琼脂凝胶免疫扩散方法本标准适用于未免疫鸡群鸡病毒性关节炎的血清学诊断及用鸡病毒性关节炎疫苗免疫后的抗体22琼脂凝胶免疫扩散试验2.1材料准备2.1.1器材：烧杯，直径85mm培养血，孔径3mm打孔器.6号～9号针头·微量移液器及针头。2.1.2抗原：按说明书使用。2.1.3标准阳性血清：按说明书使用2.1.4被检血清:从鸡妞膀静脉或心脏无菌采血，分离血清,4℃或一20℃保存备用2.1.5琼脂板：制作方法见附录A。2.2操作方法2.2.1琼脂板打孔用打孔器在琼脂板上如图1所示打梅花型孔，大批检疫时，亦可按图2所示打孔，孔径3mm.孔距3mm,打孔后挑出孔内琼脂块。然后放在酒精灯火焰上方加热封底图1琼脂板打孔示意图围2琼脂板打孔示意围2.2.2加样用微量移液器加样。2.2.2.1在图1中加样方法如下：“a）7号孔加抗原；b）1、3.5号孔加被检血清;c）2

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