标准解读
《LY/T 2745-2016 仁用杏品种鉴定技术规程 SSR分子标记法》是一项专门针对仁用杏(Prunus armeniaca L.)品种进行准确鉴定的技术标准。该标准采用SSR(简单序列重复,Simple Sequence Repeat)分子标记技术作为主要手段,以实现对不同仁用杏品种的精确区分与识别。
在具体操作上,首先需要从待检测的仁用杏样品中提取DNA,这一步骤是整个实验的基础,要求所提取的DNA纯度高、完整性好。接着,依据已知且适用于仁用杏的SSR引物序列信息,通过PCR(聚合酶链反应)扩增目标区域。这些特定的SSR位点因其高度多态性而成为品种间差异的良好指示器。完成扩增后,利用凝胶电泳等方法分离并观察扩增产物,根据片段大小的不同来判断各品种间的遗传差异。
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....
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- 现行
- 正在执行有效
- 2016-10-19 颁布
- 2017-01-01 实施
文档简介
ICS67060
B21.
中华人民共和国林业行业标准
LY/T2745—2016
仁用杏品种鉴定技术规程
SSR分子标记法
Identificationofkernel-usingapricotcultivars—SSRmarkermethod
2016-10-19发布2017-01-01实施
国家林业局发布
LY/T2745—2016
目次
前言
…………………………Ⅰ
范围
1………………………1
术语和定义
2………………1
原理
3………………………1
仪器设备与主要试剂耗材
4、………………2
溶液配置
5…………………2
核心引物
6…………………2
操作步骤
7…………………2
指纹比对
8…………………3
结果判定
9…………………4
附录资料性附录仪器设备与主要试剂耗材
A()、………5
附录资料性附录溶液配置
B()…………6
附录规范性附录核心引物
C()…………8
附录资料性附录仁用杏品种指纹图谱鉴定报告书
D()SSR………10
参考文献
……………………11
LY/T2745—2016
前言
本标准按照给出的规则起草
GB/T1.1—2009。
本标准由中国林业科学研究院提出
。
本标准由国家林业局归口
。
本标准起草单位中国林业科学研究院经济林研究开发中心北京林业大学
:、。
本标准主要起草人傅大立刘梦培秦玥朱高浦赵罕
:、、、、。
Ⅰ
LY/T2745—2016
仁用杏品种鉴定技术规程
SSR分子标记法
1范围
本标准规定了利用简单重复序列分子标记法鉴定仁用杏
(Simplesequencerepeats,SSR)
Armeniacacathayana品种的技术规程
(D.L.Fuetal.)。
本标准适用于仁用杏品种的分子指纹比对鉴定
SSR。
2术语和定义
下列术语和定义适用于本文件
。
21
.
待检品种testcultivar
待鉴定的仁用杏品种由送检人提供
,。
22
.
对照品种comparingcultivar
用于与待检品种进行指纹比对的若干品种待检品种为新品种则对照品种为近似品种待检品种
(,;
为假冒品种则对照品种为真品种由送检人或他人提供
,),。
23
.
核心引物coreprimer
扩增产物具有高度的稳定性和一致性没有干扰谱带并具有较强鉴别能力可以用于建立仁用杏
(),,
指纹比对的人工合成引物
。
24
.
指纹图谱SSRfingerprint
采用核心引物或相当于核心引物扩增出的待检品种和对照品种的片段通过聚丙烯
SSR()DNA,
酰胺电泳或毛细管电泳得到不同大小的片段图谱
,DNA。
25
.
指纹比对SSRfingerprinting
将待检品种与对照品种的指纹图谱进行比对分析待检品种与对照品种的指纹是否具
SSR,SSR
有差异并确定其大小
,。
3原理
简单重复序列分子标记通常又称为微卫星标记分布于仁用杏整个基因组的不同位置
(SSR),“”,,
不同品种每个位点上重复单位的数量可能不同因而形成标记的多态性由于每个简单重复序列
,SSR。
两端的序列是高度保守的单拷贝序列因此可根据其两端的序列设计特异引物利用技术对两条
,,PCR
引物间的重复序列进行扩增通过电泳分离得到大小不同的扩增产物片段经荧光染料标记加以
DNA
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