生物化学的实习报告

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（实习报告）

院系:专业：应用化学学号：姓名：指导教师：任梅蓉李靖赵宇贾璐日期：201x年06月21日

序言

生物化学是用化学的原理和方法，研究生命现象的学科。通过研究生物体的化学组成、代谢、养分、酶功能、遗传信息传递、生物膜、细胞布局及分子病等表明生命现象。

生物体内几乎全体的化学回响都是酶催化的。酶的作用具有催化效率高、专一性强等特点。酶的布局与功能的关系、回响动力学及作用机制、酶活性的调理操纵等是酶学研究的根本内容。通过X射线晶体学分析、化学修饰和动力学等多种途径的研究，一些具有代表性的酶的作用原理已经对比领会。70年头进展起来的亲和标记试剂和自杀底物等专一性的不成逆抑制剂已成为探讨酶的活性部位的有效工具。多酶系统中各种酶的协同作用，酶与蛋白质、核酸等生物大分子的相互作用以及应用蛋白质工程研究酶的布局与功能是酶学研究的几个新的方向。酶与人类生活和生产活动关系特别紧密，因此酶在工农业生产、国防和医学上的应用一向受到广泛的重视。

生物化学对其他各门生物学科具有深刻的影响，最精细的有细胞学、微生物学、遗传学、生理学等领域。通过对生物高分子布局与功能举行深入的研究，透露了生物体物质代谢、能量转换遗传信息传递、光合作用、神经传导、肌肉收缩、激素作用、免疫和细胞间通讯等大量奥秘，使人们对生命本质熟悉跃进到一个崭新的阶段。应用一向受到广泛的重视。

分开纯化意义：（1）分开大分子，研究其布局与功能，对于了解生命活动规律有重要意义（2）得志工业生产的需要（3）得志医疗的需要（4）得志基因工程的需要生物体内几乎全体的化学回响都是酶催化的。酶的作用具有催化效率高、专一性强等特点。酶的布局与功能的关系、回响动力学及作用机制、酶活性的调理操纵等是酶学研究的根本内容。通过X射线晶体学分析、化学修饰和动力学等多种途径的研究，一些具有代表性的酶的作用原理已经对比领会。70年头进展起来的亲和标记试剂和自杀底物等专一性的不成逆抑制剂已成为探讨酶的活性部位的有效工具。多酶系统中各种酶的协同作用，酶与蛋白质、核酸等生物大分子的相互作用以及应用蛋白质工程研究酶的布局与功能是酶学研究的几个新的方向。酶与人类生活和生产活动关系特别紧密，因此酶在工农业生产、国防和医学上的应用一向受到广泛的重视。

生物大分子的分开纯化一般可以分为以下几个阶段：○1材料的选择和预处理；○2破碎细胞及提取；○3分开和纯化：包括粗分级分开和细分级分开；其中前两个阶段为生物大分子分开纯化的前处理。

离心的原理：将样品放入离心机转头的离心管内，离心机驱动时，样品液就随离心管做匀速圆周运动，于是就产生了一个向外的离心力。由于不同颗粒的质量，密度，大小及外形等彼此各不一致，在同一固定大小的离心场中沉降速度也就不同，由此便可以得到相互间的分开。受到的力：离心力、介质的摩擦阻力、浮力、重力及重力浮力(均可疏忽不计)

本次试验包括“各谷物中养分成分的测定”和“苯丙氨酸解氢酶的纯化及活性测定”两个试验。

苯丙氨酸解氨酶（L-phenylalanine：ammonielyase，简称PAL；EC4.3.1.5）是植物体内苯丙烷类代谢的关键酶，与一些重要的次生物质如木质素、异黄酮类植保素、黄酮类色素等的合成紧密相关。在植物生长发育和抗拒病菌侵害的过程中起重要作用。PAL催化L-苯丙氨酸裂解为反式肉桂酸在290nm处有强大的吸收值。规定1h内增加0.01为PAL的一个活力单位。酶的比活力是指样品中每毫克蛋白所含的酶活力单位数。在测验中将会看到随着PAL的逐步被纯化，其比活力也在逐步增加。

在蛋白质溶液中参与确定量的中性盐（如硫酸铵、硫酸钠等）使蛋白质沉淀析出称为盐析。溶液的盐浓度通常以盐溶液的饱和度表示，饱和溶液称100%饱和度。沉淀一种酶所需的概括浓度需要经试验确定。

谷类含蛋白质在8-12%之间，因谷粒外层蛋白质较里层含量高，因此，精制的大米和面粉因过多的去除外皮，使蛋白质含