干化学技术及优势项目

强 生 干化学技术

及优势项目

介绍内容：干化学技术优势项目Vitros950临床实验室类产品（生化）：DT60,V350/250,V950,Fusion5.1DT60IIVitros350VitrosFusion5.1OrthoClinicalDiagnosticsMicroSlide－多涂层薄膜干片技术扩散层扩散层试剂层试剂层指示剂层指示剂层支持层支持层标本MicroSlide多涂层薄膜干片技术：将所需试剂预固相在多层薄膜和邮票大小的透明支持基垫之上。当血浆，血清，尿液或脑脊液与这些已含化学物质的干式薄膜接触时发生反应并对反应信号进行测量。干片分类CM/RTPMIR干片(MicroSlide)钠钾氯地高辛苯巴比妥卡马西平苯妥因C反应蛋白胆固醇 甘油三酯总蛋白 白蛋白高密度酯蛋白脂肪酶尿蛋白

脑脊液蛋白谷丙转氨酶谷氨酸转移酶碱性磷酸酶 r谷氨酰转酞酶乳酸脱氢酶 肌酸激酶肌酸激酶同工酶尿素氮肌酐 尿酸

乳酸 铁、总铁结合力磷 锂淀粉酶胆碱脂酶总胆红素结合/非结合胆红素血氨乙醇水杨酸茶碱醋氨酚镁二氧化碳比色/速率法干片免疫速率法干片电极法干片

指示剂层支持层扩散层试剂层比色/速率法干片通过测定干片颜色变化来确定化合物浓度

指示剂层支持层

多孔结构，允许标本通过均匀分布标本过滤大分子（蛋白质，脂肪等）去除干扰物质（溶血，黄疸等）提供反射测定的背景扩散层试剂层扩散层比色/速率法干片结构试剂层

扩散层试剂层指示剂层支持层

包含检测反应所需的酶，缓冲液，催化剂等多层试剂，控制反应顺序比色/速率法干片结构葡萄糖干片指示剂层

扩散层试剂层

指示剂层支持层试剂层产物与指示剂层中的染料结合时，形成有色复合物，其与分析物浓度成正比。比色/速率法干片结构支持层

扩散层试剂层

指示剂层

支持层

提供反应支持基垫允许光路自由通过比色/速率法干片结构反射光的测定干扰物质反光背景成色层生成纯净的反射光光源滤光片接收器接收器接收器透射与反射光线经过干扰物质光线不经过干扰物质受影响不受影响尿酸优异的抗干扰能力MicroSlide多层涂膜技术可以针对不同检测项目使用加以不同成份的薄膜以达到最佳的检测结果某些干片中有清道夫层（如尿酸）：去除维他命C和钙的干扰某些干片试剂层下有半透膜层（如尿素氮）：去除药物干扰半透膜尿素氮－溶血－血脂－胆红素等能有效排除标本中对检测结果造成的影响优异的抗干扰能力优势项目——胆红素HPLC分离的胆红素各组分巨细胞肝炎婴儿血清a=游离胆红素b=单葡萄糖醛酸酯结合胆红素g=双葡萄糖醛酸酯结合胆红素d=和白蛋白共价结合胆红素Figure1,OstreaEM,OngtengcoEA,ToliaVA,ApostolE.JPediatrGastroenterolNutr1988;7:511-516.△胆红素在血液循环中结合胆红素和白蛋白形成的。白蛋白缓慢地非酶作用置换了原葡萄糖醛酸酯。类似于糖化血红蛋白。在长期的高结合胆红素血症后，才能检测出来。在血液循环中的清除缓慢。半衰期和白蛋白一样，2～3周。因为胆红素不存在氢键的影响，所以胆红素可以与重氮直接胆红素反应。传统的胆红素检测方法偶氮方法(Ehrlich1883).由vandenBerghandMuller(1916)应用于胆红素检测。直接胆红素反应快速。间接胆红素反应缓慢或不反应（分子折叠，不溶性）。需要某些物质的存在，才会打开游离胆红素，使溶解在水，并和偶氮试剂反应。直接胆红素国内长期来，误解了结合胆红素参与反应非常快，整个反应只要1分钟，被称为“1分钟胆红素”。结合胆红素参与反应的影响因素很多。例如：反应时使用的重氮试剂的浓度、pH、反应时间等。结合胆红素的重氮反应的初期确实很快，但是，要使所有结合胆红素完全参与反应，需要30分钟以上。目前推荐10分钟的方法。目前任何一个在自动分析仪上的直接胆红素测定都是不完全的（如：反应时间太短）。少量游离胆红素也参与直接反应血清中的少量游离胆红素也会参与直接反应。因为血清中有尿素、尿酸等，早期的研究已经肯定，这些物质的存在，具有促使游离胆红素打开氢键、参与直接反应的可能。按照胆红素的代谢途径，在健康人的血清中，只有由白蛋白携带的游离胆红素；被肝脏处理过的结合胆红素经胆管进入肠道，不会进入血液。所以健康人的血清内不应该有结合胆红素。传统胆红素检测方法具有加速剂的偶氮反应=总胆红素。不加加速剂的偶氮反应=“直接反应胆红素”(vandenBergh)或简称为直接胆红素。间接胆红素为总胆红素减去直接胆红素。Vitros胆红素检测方法现今已广泛应用(2003年的CAP调查中在4964个实验室中，有1191个使用该法）。总胆红素干片还是传统的偶氮方法。

BuBc干片(游离胆红素Bu、结合胆红素Bc）为非传统方法。BuBc干片由EastmanKodak在1980s早期开发。使用染媒剂，不是试剂。染媒剂是什么？染媒剂可以区分结合胆红素和游离胆红素的最大反射差。在技术上的一个机遇。BuBc干片技术原理实线为Bu,虚线为Bc.反射最大峰:Bu460,Bc420nm.在400(二者反射强度相同)和460nm(最大反射差)阅读。FromWuT-W,DappenGM,SpaydRWetal,ClinicalChemistry1984;30.8:1304-9.HPLCPEAKHPLC峰ALPHAα峰BETAβ峰GAMMAγ峰DELTAδ峰BilirubinSpecies胆红素类别Unconjugated未结合型胆红素SinglyConjugated单一结合型胆红素DoublyConjugated双重结合型胆红素Conjugatedtoalbumin白蛋白结合型胆红素TraditionalMethods传统测定方法TotalBilirubin(T-BIL)总胆红素(T-BIL)Indirect#（I-BIL）(Total－Direct)间接胆红素(I-BIL)（T-BIL－D-BIL）*灰色区域DirectBilirubin（D-BIL）直接胆红素(D-BIL)VITROSMethodsVITROS测定方法TotalBilirubin(TBIL)总胆红素（TBIL）Unconjugated(Bu)未结合胆红素（Bu）Conjugated(Bc)结合胆红素（Bc）Delta(DELB)#(TBIL－[Bu＋Bc])Delta胆红素(DELB)（TBIL－[Bu＋Bc]）BuDirectBilirubin(D-BIL)#(TBIL－Bu)直接胆红素（D-BIL）(TBIL－Bu)NeonateBilirubin(NBIL)#(Bu＋Bc)

新生儿胆红素(NBIL)(Bu＋Bc)DELB胆红素的临床应用黄疸的鉴别诊断黄疸是指高胆红素血症引起皮肤、巩膜和粘膜等组织黄染的现象。按原因分为溶血性黄疸；细胞性黄疸；胆汁淤积性黄疸；先天性非溶血性黄疸；多因性黄疸。按黄疸发生的部位肝前性黄疸(溶血性和非溶血性)；肝性黄疸(肝细胞性和肝胆小管性即肝内胆淤性)；肝后性(肝外梗阻性)。成功的肝胆梗阻再通后Kubasiketal.AmJClinPath1985:84;518050100123456789Days%总胆百分比BuBcBdeltaDirectTreatment胆红素组分的临床应用△胆红素（Bδ）高结合胆红素血症，尤其是阻塞性黄疸时，Bc的快速下降（Bc的半衰期仅几个小时）是阻塞完全消退的最敏感指标。不能用检测总胆红素来评价高结合胆红素血症，因为在检测的总胆红素中包含了半衰期为2-3周的Bδ。理想的是，使用只检测Bc的方法，临床可较好地评价高结合胆红素血症。

真实的结合胆红素优于直接胆红素胆道阻塞解除后，结合胆红素下降迅速。直接（和总）胆红素仍然保持高水平达数周。（D胆红素的存在）容易产生误解，认为阻塞没有解决。优势项目——电解质电极法干片

离子选择电极技术直接法测定两电极间电势不同钾，钠，氯盐桥S2S1S3S4aIar离子载体膜M+ClAgCl

Ag离子载体膜M+ClAgClAgaIarVV干片常规已知浓度液体(参比液)待测液体(标本)离子选择电极(ISE)盐桥ar直接法vs.间接法ISE游离离子已结合形式复合形式湿化学间接法所测量的离子直接法所测量物质水相(血清)非水相(血脂,蛋白质)直接法测量间接法测试到的体积（93％水相）

直接法直接测量具有临床意义的活性离子。

间接法不能纠正由蛋白质，血脂增高引起的检测结果偏离间接法ISE电解质排斥效应标本10微升，非水相5％，水相9.5微升稀释100倍，加入稀释液990微升，水相999.5微升实际稀释倍数＝999.5／9.5＝105.211如果标本中含K3.50mmol/L;Na14