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实验二芦荟粗多糖的提取

实验性质：验证性实验学时数：3学时生物制药实验课程【实验目的与要求】

掌握水提醇沉法提取多糖的原理和方法掌握旋转蒸发器的使用掌握组织匀浆机的使用【实验原理】水提醇沉法（水醇法）系指在中药水提浓缩液中，加入乙醇使某些药物成分在醇溶液中溶解度降低析出沉淀，固液分离后使水提液得以精制的方法。一般操作过程是：将中药水提液浓缩至1︰2，药液放冷后，边搅拌边缓慢加入乙醇使达规定含醇量，密闭冷藏24～48h，滤过，滤液回收乙醇，得到精制液。操作时应注意以下问题：①适当浓缩，以减少乙醇用量。控制浓缩程度，过浓，有效成分易包裹于沉淀中而造成损失。②浓缩液冷却后方可加入乙醇，以免乙醇受热挥发损失。③选择适宜的醇沉浓度。一般药液中含醇量达50％～60％可除去淀粉等杂质，含醇量达75％以上大部分杂质均可沉淀除去。④慢加快搅。应快速搅动药液，缓缓加入乙醇，以避免局部醇浓度过高造成有效成分被包裹损失。⑤密闭冷藏。可防止乙醇挥发，促进析出沉淀的沉降，便于滤过操作。⑥洗涤沉淀。沉淀采用乙醇（浓度与药液中的乙醇浓度相同）洗涤可减少有效成分在沉淀中的包裹损失。【实验材料、试剂与仪器】试剂：无水乙醇。烧杯、玻璃棒、小刀、纱布、量筒、电子天平、高速冷冻离心机、旋转蒸发仪、真空泵、水浴锅、组织匀浆机。【实验方法与步骤】①取芦荟鲜叶50g，洗净，去掉叶尖和叶底，在自来水（蒸馏水）中浸泡0.5h，以除去由表皮渗出的黄色液汁。然后切去表皮，将内层凝胶置于烧杯中，加入3倍量自来水（蒸馏水），置于55℃恒温水浴锅中加热浸提4h。②浸提液减压浓缩，用6mol/L的盐酸调pH值3.2左右，向经过调酸处理的芦荟凝胶浓缩汁中缓慢加入6倍量的95%乙醇，边加边搅拌大约需要15~30min，室温下静置2h，离心分离(2500r/min，7min)得多糖沉淀。依次用乙醇、丙酮和乙醚洗涤，然后真空干燥，最终得到的沉淀即为芦荟多糖粗品。或：减压浓缩至原来的1/3,向浓缩汁中缓慢加入6倍体积冷的无水乙醇，边加边搅拌大约需要15~30min，室温下静置2h，得粗多糖沉淀。【注意事项】加入乙醇沉淀多糖时要边加边搅拌，时间要长一些;注意仪器的规范使用；实验结果与记录:记录实验条件、过程和实验现象。【思

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