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文档简介
第三章
实验动物饲养与应用条件的
标准化
蒋灵芝意义实验动物饲养与应用条件标准化的意义:保证实验动物的质量和动物实验结果的正确性。豚鼠:特点是毛短而光滑,生长快,抗病力强,繁殖性能好。广泛用于药物学、传染病学、免疫学、营养学、耳科学等各项医学及生物学的研究中。SD大鼠:白色,产仔多,生长发育较Wistar大鼠为快,对疾病的抵抗力尤以呼吸道疾病的抵抗力强。自发肿瘤发生率较低,对性激素感受性高。C57BL/6J小鼠:黑色,对放射物质耐受性强,但照射后肝癌发生率高。眼畸形,对结核杆菌有耐受性嗜酒精性高,是肿瘤学、生理学、遗传学研究常用品系。Lewise大鼠:近交系大鼠,白化,对诱发自身免疫心肌炎高度敏感,可诱发过敏性脑脊髓炎、过敏性关节炎和自身免疫复合物血管球性肾炎等立刻移植多种肿瘤,高脂肪食物容易引起肥胖症。
C57BL/6J小鼠新西兰兔第一节实验动物的环境包括饲养环境和实验环境。实验动物的环境——围绕动物的所有条件。分自然因素和人为因素两方面。见书上P37页。(一)控制环境的重要意义R=(A+B+C)×D±ER代表实验动物总的反应。A实验动物物种的反应。B实验动物品种或品系的特有反应。C个体差异。D表示环境影响。E代表实验误差。D与R呈正比,说明环境因素起主要作用。(二)环境因素对实验动物的影响1.环境温度:哺乳动物为恒温动物,最适温度18-29Cº,温度通过改变机体新陈代谢影响实验动物的生命体征。不同动物适应不同的最适温度,不同温度对动物实验结果的影响不同。2.湿度:大气中水分的含量。有绝对湿度和相对湿度之分。绝对湿度:每立方米的空气中含水分的量。相对湿度:在特定温度下,空气中实际含水量与该温度的饱和含水量的百分比值。通常用相对湿度表示。动物体温受环境温度、相对湿度、气流速度的共同影响。3.气流:气流能够调节环境的温度和湿度。气流影响皮肤水分的蒸发和散热。气流过大或过小对实验动物均有影响。饲养室的换气次数以10-20次/h最好。4.光照:包括照度、光线波长、光照时间,明暗交替时间的规律性。红光:0.77-0.62微米;绿光:0.58-0.49微米;
蓝光:0.49微米-.
蓝光比红光更能促进动物的性成熟。5.噪声:噪声对实验动物的影响非常复杂。造成心理和生理的不利影响,严重噪声还可以导致动物的死亡。室内噪声控制在60分贝以下。6.空气洁净度:指室内空气中的尘埃颗粒、微生物、有害气体三个方面的污染程度。污染源很多,包括实验动物自身排除的废物。我国对空气洁净度分级见书上P43页。第二节实验动物设施定义:生产实验动物和从事实验动物的建筑物及设备。实验动物设施根据其功能和使用目的不同在国标中将其分为实验动物繁育、生产设施和动物实验设施。
实验动物繁育、生产设施(LaboratoryAnimalFacility)是指用于实验动物繁育、生产的建筑物、设备以及运营管理在内的总和。动物实验设施(AnimalExperimentalFacility)是指以研究、试验、教学、生物制品和药品生产等为目的,进行实验动物饲育、试验的建筑物、设备以及运营管理在内的总和。一、实验动物设施的分类(一)按微生物控制程度分类(二)按设施功能分类(三)按设施的平面布局分类(四)按屏障设施内气流组织形式分类(二)按设施功能分类(一)按微生物控制程度分类1.普通环境实验动物的生存环境直接与外界大气相通。饲料、饮水要符合卫生要求,垫料要消毒,有防野鼠、防虫设施。是饲养普通级实验动物的场所,亦称普通级动物设施。
2.屏障环境实验动物生存在与外界隔离的环境内。进入实验动物生存环境的空气须经净化处理,其洁净度相当于10,000级。进入屏障内的人、动物及物品如饲料、水、垫料和实验用品等均需有严格的微生物控制,通常称SPF级动物设施。
3.隔离环境实验动物生存在与外界完全隔离的环境内。进入实验动物生存环境的空气须经净化处理,其洁净度相当于100级。人不能直接接触动物。进入隔离系统内的动物和物品都要经过严格的净化和/或灭菌处理。是饲养无菌级,SPF级实验动物或进行同级动物实验的场所,通常也称无菌设施。(二)按设施功能分类1.实验动物生产设施:主要用于各种实验动物品种(品系)的保种、育种、繁殖、生产、育成、供应的设施。2.动物实验设施:主要以动物实验或以动物为原材料进行临床前药物研究、药品和生物制品等的检定以及特殊品系的培育、保种、繁殖的设施。3.特殊实验动物设施:包括感染动物实验设施和应用放射性物质或其他特殊化学物质等进行动物实验的设施。(三)按设施的平面布局分类1.无走廊式;此类设施一般面积较小,能最大限度地利用空间,用于饲养单一品种或以实验为主的设施。一般用于小型动物研究或改造作为临时动物房。由于人流物流交叉,进出路线交叉,而且污染物品容易影响洁净物品的清洁度,一般为普通级动物设施。
2.单走廊式;有效面积充分利用,为实验动物的生产、实验提供最大空间。缺点是无法将污染区和清洁区分隔开来,形成动物粪便、废弃物与清洁物品的运行交叉,人流物流交叉,易受到污染。国内外已经广泛采用此类设计,但必须加强管理,方能安全运行。
3.双走廊式;是常用的一种实验动物屏障设施类型。可有效地分割清洁区和污物区。作为亚屏障和屏障设施使用,比较容易控制微生物的危害。缺点是有效利用面积减小。
4.三走廊式;动物隔离良好,人员、动物、物品进入有专门通道,可有效避免污物和洁净物品交叉行走,人员物品进出互不影响,可以大量长期饲养实验动物,但空间利用率低,而且投资大维持费用高。(四)按屏障设施内气流组织形式分类按屏障设施内气流组织形式可划分为单流式、乱流式、辐流式和混合式。一般为乱流式屏障设施,单流式、辐流式和混合式一般较少使用。乱流式屏障设施也称为非单向流洁净室,是指气流以不均匀的速度成不平行的流动,伴有回流或涡流的洁净室。其原理是依靠送风气流不断稀释室内空气把室内污染逐渐地排出。表示乱流洁净室的技术性能指标主要有以下三项:(1)换气次数换气次数越多,空气洁净度越高,能量消耗也越大。(2)气流组织其作用是确保均匀地送风和回风,充分发挥干净气流稀释作用,单个风口要有足够的扩散作用,全室风口布置均匀,数量尽可能多一些,以尽量减少涡流和气流回旋。(3)自净时间指洁净室从污染状态回复到正常稳定状态的能力,越短越好,一般不超过30分钟。屏障设施
是指一个相对密闭的实验动物设施环境,设有恒温、恒湿和除菌换气系统。要求送入空气的洁净度达10000级,室内保持正压,具有严格的微生物控制系统,用以饲养清洁级或SPF级动物。屏障设施的布局屏障设施一般分为清洁区、污染区和外部。
凡是进入该设施内的物品均需经过消毒灭菌处理,人员经过专门培训,进入清洁区前经淋浴,更换无菌衣帽,遵循严格的操作规程和管理制度,保证屏障内不被污染。一般应根据设施内产生的污染物的特点,采取行之有效的方法。如用水洗法可除去气体中的氨、细菌和尘埃,用酸碱洗净法或用活性炭、硅胶等吸附剂可以除去恶臭成分。在国际上除少数国家外,一般都不用清洁级这个概念。最初是由于我国经济还不够发达,总体基础设施条件、人们的观念、科学素质等比较落后的情况下提出的。随着我国经济的发展,科学水平的提高,与国际交流的增加,科研人员今后将越来越多的采用SPF级动物进行实验。第三节实验动物笼器具1.隔离器隔离器,层流柜2.笼具:有兔笼、大鼠笼、小鼠笼、豚鼠笼、仓鼠笼、犬笼、猴笼、猫笼、层流架、动物专用电子秤、耳号钳、固定器、解剖台等。62220240000020980403饮水设备:大、小鼠的饮水瓶多用不锈钢或无毒塑料瓶,规格250-500ml.定期清洗、消毒。无菌饮水机,是安装了一层超滤膜滤去0.5微米以上的悬浮颗粒、细菌、真菌。用紫外线照射,杀死病毒。第四节实验动物的饲料、饮水、垫料一、饲料1.饲料:实验动物的饲料应该富含蛋白质、糖类、脂肪、维生素、矿物质,同时保证每天足够的饮用水。2.饲料的种类:按物理性状分:粉状、颗粒状、膨化饲料。按来源分动物性饲料与植物性饲料。按营养特性分:粗饲料、青绿饲料、能量饲料、蛋白饲料、矿物质饲料、维生素饲料、添加剂。3.饲料的质量要求:1)原料来源清楚;没有污染,符合国家卫生许可标准。2)储存要保持通风干燥,防止霉变。3)饲料加工及生产过程中注意消毒灭菌。4)成品包装要严密,防止污染。5)饲料配方科学合理,符合饮食习惯。二、饲料配合技术(一)名词定义1.饲料:能被动物利用,且在合理饲养的情况下不发生有害现象,有利于动物营养的物质。2.日粮:指一只实验动物一昼夜所采食的饲料总量。3.饲粮:指按日粮中各种饲料的合理比例配制成的混合饲料。4.配合饲料:按一定的饲料配方配制成的多种饲料混合料。(二)饲料营养素对动物实验结果的影响1.通过实验动物进食量而影响实验结果。2.影响动物的生长发育而影响实验结果。3.影响动物生理生化指标而影响实验结果。4.影响动物营养而影响实验
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