标准解读
《GB/T 5009.159-2003 食品中还原型抗坏血酸的测定》是一项国家标准,旨在提供一种科学方法来检测食品中的还原型抗坏血酸(即维生素C)含量。该标准适用于新鲜水果、蔬菜及其制品中还原型抗坏血酸含量的测定。
根据此标准,主要采用的方法是高效液相色谱法(HPLC),这是一种能够精确测量样品中特定化合物浓度的技术。通过这种方法,可以有效分离并定量分析复杂混合物中的还原型抗坏血酸。具体步骤包括样品处理、提取、过滤以及使用适当的流动相和柱子进行高效液相色谱分析等过程。
在样品制备阶段,通常需要将待测食品样品进行均质化处理,并加入一定量的偏磷酸溶液或其他适宜溶剂以帮助释放并稳定其中的还原型抗坏血酸。接着,经过离心或过滤去除固体杂质后,取上清液作为最终测试样本。
标准还详细规定了仪器条件的选择与优化,如选择合适的色谱柱类型、设定恰当的流速、温度及检测波长等参数,以确保获得最佳分离效果和准确度。此外,为了保证实验结果的准确性,本标准也提出了对照品准备的要求,用于建立标准曲线,从而实现对未知样品中还原型抗坏血酸含量的准确定量。
整个测定过程中需严格按照操作规程执行,并注意控制可能影响测定结果的各种因素,比如光照、氧气暴露等,因为这些都可能导致还原型抗坏血酸分解而影响最终测定值。
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文档简介
ICS67.040C53中华人民共和国国家标准GB/T5009.159—2003食品中还原型抗坏血酸的测定Determinationofreductive-formascorbicacidinfoods2003-08-11发布2004-01-01实施中华人民共和国卫生部发布中国国家标准化管理委员会
GB/T5009.159—2003前本标准附录A是资料性附录本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准负责起草单位:河北省唐山市卫生防疫站·参加起草单位:河北省卫生防疫站、天津市食品卫生监督检验所、吉林省卫生防疫站·本标准主要起草人:张文德、李信荣、韩会新、王荫国、李青.
GB/T5009.159-2003现行国家标准GB/T12392—1990《蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定方法(荧光法和2,4-二硝基苯肼法)》测定的是氧化脱氢型抗坏血酸,不能测定其主要成分还原型抗坏血酸,而且局限于果蔬类试样·操作非常繁项;对营养强化食品、蛋白食品等试样的测定更不适应。为此研制了测定食品中抗坏血酸的标准检验方法。该法具有灵敏度高、准确度好、操作简便、快速、应用范围广等特点。适用于各类食品中抗坏血酸的测定
GB/T5009.159一2003食品中还原型抗坏血酸的测定范围本标准规定了食品中抗坏血酸的分光光度法本标准适用于各类食品中还原型抗坏血酸的测定。本标准不适用于脱氢型抗坏血酸的测定。2原理在乙酸溶液中.抗坏血酸与固蓝盐B反应生成黄色的草酰肼-2-羟基丁酰内酯衍生物。在最大吸收波长420nm处测定吸光度,与标准系列比较定量。3试剂3.1乙酸溶液(2mol/L):吸取11.6mL冰乙酸,加水稀释至100mL3.2乙酸溶液(0.5mol/L):吸取2.9mL冰乙酸,加水稀释至100ml..3.3乙二胺四乙酸二钠溶液(0.25mol/L):称取9.3g乙二胺四乙酸二钠CuHN.O.Na·2H.0于水中,加热使之溶解后,放冷·并稀释至100mL.3.4蛋白沉淀剂3.4.1乙酸锌溶液(220g/L):称取22.0g乙酸锌Zn(CH,COO)。·2H.0],加3mL冰乙酸溶于水并稀释至100mL。3.4.2亚铁氰化钾溶液(106g/L):称取10.6g亚铁氰化钾K,Fe(CN)。·3H.0].加水溶解至100mL。3.5显色剂:固蓝盐B(FastBlueSaltB)溶液(2g/L):淮确称取0.2g固蓝盐B,加水溶解于100mL棕色容量瓶中,并稀释至刻度(该溶液在室温下财存可稳定3d以上)。3.6抗坏血酸标准储备溶液(2.0g/L):精蜜称取0.2000g抗坏血酸,加20mL乙酸溶液(2mol/L)溶解后移人100mL棕色容量瓶中.用水稀释至刻度.混勾。此溶液每毫升相当于2.0mg抗坏血酸(10C下冰箱内购存在2d内稳定)3.7抗坏血酸标准使用溶液(O.1g/L):用移液管精密吸取5.0mL抗坏血酸标准储备溶液(2.0g/L)于100mL.棕色容量瓶内,加5mL乙酸溶液(2mol/L),用水稀释至刻度,混勾。此溶液每毫升相当于100g抗坏血酸(临用时配制)。4仪器4.1分分光光度计。4.2碎机。4.3心沉淀机:4.410mL具塞玻璃比色管5分析步骠
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