标准解读

《GB/T 40472-2021 柱锈菌科实时荧光PCR检疫鉴定方法》是一项国家标准，旨在规范柱锈菌科（Pucciniales）真菌的检测与鉴定过程。该标准通过应用实时荧光PCR技术来实现对目标病原体DNA片段的特异性扩增及定量分析，适用于进出口植物及其产品中柱锈菌科成员的快速准确识别。

根据文档内容，本标准详细描述了从样本采集到最终结果报告的一系列步骤：

  • 样品制备：包括但不限于植物材料的选择、保存条件以及DNA提取的方法；
  • 引物设计：基于已知序列信息选择或设计用于扩增柱锈菌特定区域的引物对；
  • 实验操作流程：涵盖反应体系配置、循环参数设定等关键环节的操作指南；
  • 结果判读：提供阳性对照、阴性对照设置建议，并说明如何根据Ct值判断样品是否含有目标病原体；
  • 质量控制措施：强调实验过程中需要遵循的质量保证原则，确保检测结果可靠性和重复性。


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....

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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2021-08-20 颁布
  • 2022-03-01 实施
©正版授权
GB/T 40472-2021柱锈菌科实时荧光PCR检疫鉴定方法_第1页
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文档简介

ICS6502001

CCSB.16.

中华人民共和国国家标准

GB/T40472—2021

柱锈菌科实时荧光PCR检疫鉴定方法

DetectionandidentificationofCronartiaceaeusingreal-timePCR

2021-08-20发布2022-03-01实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

GB/T40472—2021

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归口

(SAC/TC271)。

本文件起草单位中华人民共和国宁波海关中国科学院微生物研究所中国检验检疫科学研究院

:、、、

中华人民共和国乌鲁木齐海关

。

本文件主要起草人段维军蔡磊赵鹏郭立新刘芳李雪莲张永江张慧丽王翀陈先锋

:、、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T40472—2021

柱锈菌科实时荧光PCR检疫鉴定方法

1范围

本文件描述了植物病原真菌柱锈菌科的实时荧光聚合酶链式反应以下简称实时荧光检疫

(PCR)

鉴定方法

。

本文件适用于携带柱锈菌科病菌的植物及其产品中柱锈菌科病菌的检测筛查

。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件

。

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义

。

4基本信息

学名

:Cronartiaceae

中文学名柱锈菌科

:

分类地位隶属于真菌界担子菌门柄锈菌纲柄锈菌

:(Fungi),(Basidimycota),(Pucciniomycetes),

目

(Pucciniales)。

传播途径柱锈菌科主要由种苗或病残体等传播也可经风雨水和昆虫传播

:,、。

柱锈菌科基本信息参见附录

A。

5鉴定原理

根据柱锈菌科病菌的序列特征采用实时荧光方法应用所设计引物和探针对柱锈菌

DNA,PCR,

科病菌进行检测鉴定

。

6仪器和试剂

61仪器设备实验用具

.、

天平研钵水浴锅纯水仪旋涡振荡器台式离心机紫外分光光度计高速冷冻离心机冰箱实

、、、、、、、、、

时荧光仪微量移液器

PCR、(0.1μL~2.5μL,1μL~10μL,10μL~50μL,20μL~200μL,100μL~

1000μL)。

62试剂

.

十六烷基三甲基溴化铵提取液

(CTAB)(2%CTAB,1.4mol/LNaCl,20mmol/LEDTA,

三羟甲基氨基甲烷饱和酚三氯甲烷异戊醇异丙醇无水乙

1

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