标准解读

《GB/T 40257-2021 桃拉综合征诊断规程 RT-PCR检测法》是一项国家标准，旨在为桃拉综合征（Taura Syndrome, TS）的诊断提供基于RT-PCR技术的方法指导。桃拉综合征是一种对虾类动物具有高度传染性和致命性的病毒性疾病，该标准通过详细规定了使用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术来检测引起此病的桃拉综合征病毒（Taura Syndrome Virus, TSV），从而帮助快速准确地识别受感染个体或群体。

该标准首先介绍了适用范围，明确指出其适用于所有疑似受到TSV感染的对虾样本，并且可以用于实验室环境下的常规监测与研究目的。接着，文件列出了引用文件列表，这些文件对于理解本标准内容及执行相关操作至关重要。

在术语和定义部分，标准定义了几个关键概念如“桃拉综合征”、“桃拉综合征病毒”等，以确保使用者之间关于疾病及其病原体的理解一致。此外，还提供了有关实验材料、试剂准备的具体要求，包括但不限于核酸提取方法、引物设计原则以及阳性对照的选择等信息，这些都是成功实施RT-PCR检测所必需的知识点。

接下来是详细的实验步骤说明，从样品采集到最终结果分析都给出了具体的操作指南。这其中包括如何正确处理生物样本以避免交叉污染；如何选择合适的RNA提取方法并进行有效的逆转录过程；以及如何设置适当的PCR循环条件来保证扩增效率同时减少非特异性产物产生等问题。此外，标准还强调了质量控制的重要性，建议采用内部对照系统来监控整个实验流程的有效性，并提出了一些可能影响实验结果的因素及解决策略。


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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2021-05-21 颁布
  • 2021-12-01 实施
©正版授权
GB/T 40257-2021桃拉综合征诊断规程RT-PCR检测法_第1页
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文档简介

ICS6502030

CCSB.41.

中华人民共和国国家标准

GB/T40257—2021

桃拉综合征诊断规程RT-PCR检测法

Codeofdiagnosisforinfectionwithtaurasyndromevirus—RT-PCRmethod

2021-05-21发布2021-12-01实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

GB/T40257—2021

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由中华人民共和国农业农村部提出

。

本文件由全国水产标准化技术委员会归口

(SAC/TC156)。

本文件起草单位中国水产科学研究院黄海水产研究所全国水产技术推广总站

:、。

本文件主要起草人万晓媛杨冰黄倢李清史成银张锋宋晓玲余卫忠张庆利李晨许华

:、、、、、、、、、、、

刘莉

。

Ⅰ

GB/T40257—2021

桃拉综合征诊断规程RT-PCR检测法

1范围

本文件规定了桃拉综合征诊断规程中普遍适用的核酸检测技术的要求针对桃拉综合征病毒

,

给出了检测法所需试剂或材料仪器设备样品试验步骤和

(taurasyndromevirus,TSV),RT-PCR、、、

结果判定

。

本文件适用于对虾各生活期样品中带毒情况的定性检测以进行桃拉综合征的流行病学调

TSV,

查诊断检疫和监测

、、。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

。,

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

,;,()

本文件

。

白斑综合征诊断规程第部分组织病理学诊断法

GB/T28630.4—2012(WSD)4:

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义

。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

碱基对

bp:(basepair)

互补脱氧核糖核酸

cDNA:(complementaryDNA)

焦碳酸二乙酯

DEPC:(diethypyrocarbonate)

脱氧核糖核酸

DNA:(deoxyribonucleicacid)

脱氧核糖核苷三磷酸

dNTPs:(deoxy-ribonucleosidetriphosphate)

溴化乙锭

EB:(ethidiumbromide)

乙二胺四乙酸

EDTA:(ethylenediaminetetraaceticacid)

莫洛尼鼠白血病病毒

M-MLV:(moloney-murineleukeminvirus)

聚合酶链式反应

PCR:(polymerasechainreaction)

核糖核酸

RNA:(ribonucleicacid)

逆转录聚合酶链式反应

RT-PCR:-(reversetranscription-polymerasechainreaction)

Taq水生栖热菌

:(thermusaquaticus)

三羟甲基氨基甲烷

Tris:

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