标准解读

《GB/T 40249-2021 斑节对虾杆状病毒病诊断规程 PCR检测法》是一项国家标准，旨在通过聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction, PCR）技术来诊断斑节对虾中的杆状病毒感染情况。该标准详细规定了从样品采集到最终结果分析的全过程要求。

首先，在样品采集方面，标准明确了适合进行PCR检测的样本类型以及如何正确地收集这些样本以确保后续实验的有效性。这包括但不限于活体或冷冻保存的斑节对虾组织样本的选择与处理方法。

接着是核酸提取步骤，此部分介绍了使用何种试剂盒或者手工操作流程来进行高质量DNA的提取，并强调了避免污染的重要性，因为即使是微量的外源DNA也可能导致假阳性结果。

然后进入PCR扩增阶段，这里描述了推荐使用的引物序列、反应条件设置等关键参数，同时也指出了选择合适对照组（如阴性对照和阳性对照）对于验证实验系统可靠性的必要性。

最后是对PCR产物的检测与结果判定环节。根据扩增曲线及熔解曲线特征，结合凝胶电泳图像或其他形式的数据展示方式，可以准确判断样品中是否存在斑节对虾杆状病毒DNA片段。此外，还提供了重复性和再现性指标，用以评估不同实验室之间采用相同方法时的一致性水平。

整个文件不仅为从事水产动物疾病研究的专业人士提供了一套科学严谨的操作指南，也促进了行业内关于斑节对虾健康监测技术交流与发展。


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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2021-05-21 颁布
  • 2021-12-01 实施
©正版授权
GB/T 40249-2021斑节对虾杆状病毒病诊断规程PCR检测法_第1页
GB/T 40249-2021斑节对虾杆状病毒病诊断规程PCR检测法_第2页
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文档简介

ICS6502030

CCSB.41.

中华人民共和国国家标准

GB/T40249—2021

斑节对虾杆状病毒病诊断规程

PCR检测法

CodeofdiagnosisforinfectionwithPenaeusmonodon-typebaculovirus—

PCRmethod

2021-05-21发布2021-12-01实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

GB/T40249—2021

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由中华人民共和国农业农村部提出

。

本文件由全国水产标准化技术委员会归口

(SAC/TC156)。

本文件起草单位中国水产科学研究院黄海水产研究所全国水产技术推广总站

:、。

本文件主要起草人杨冰万晓媛黄倢李清史成银张锋宋晓玲余卫忠张庆利李晨刘莉

:、、、、、、、、、、、

许华

。

Ⅰ

GB/T40249—2021

斑节对虾杆状病毒病诊断规程

PCR检测法

1范围

本文件规定了斑节对虾杆状病毒病诊断规程中普遍适用的核酸检测技术的要求针对斑节对虾杆

,

状病毒Penaeusmonodon给出了检测法所需试剂或材料仪器设备

(-typebaculovirus,MBV),PCR、、

样品试验步骤和结果判定

、。

本文件适用于对虾各生活期样品中带毒情况的定性检测以进行斑节对虾杆状病毒病的流

MBV,

行病学调查诊断检疫和监测

、、。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

。,

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

,;,()

本文件

。

白斑综合征诊断规程第部分组织病理学诊断法

GB/T28630.4—2012(WSD)4:

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义

。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

碱基对

bp:(basepair)

脱氧核糖核酸

DNA:(deoxyribonucleicacid)

脱氧核糖核苷三磷酸

dNTPs:(deoxy-ribonucleosidetriphosphate)

溴化乙啶

EB:(ethidiumbromide)

乙二胺四乙酸

EDTA:(ethylenediaminetetraaceticacid)

盐酸

HCl:(hydrogenchloride)

斑节对虾杆状病毒Penaeusmonodon

MBV:(-typebaculovirus)

氢氧化钠

NaOH:(sodiumhydroxide)

聚合酶链式反应

PCR:(polymerasechainreaction)

十二烷基硫酸

SDS:(sodiumdodecylsulfate)

Taq水生栖热菌

:(thermusaquaticus)

盐酸和缓冲液

TE:TrisE

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