校园河水中的生物检测与水体水质评述实验报告

12121220237214一、试验目的：学会运用环境微生物学、环境监测和环境评价等课程的相关学问点和试验技能，结合环境评价学问对所检测的水样〔水体〕作综合分析和评述。通过对相关学问点的综合学习和应用，进一步加深对根底学问的理解，并强化根本功的训练。二、试验原理：浮游生物泛指生活于水中而缺乏有效移动力量的漂流生物，其中分有浮游植物及浮游动环境的变化格外敏感，故在环境监测中，也有重要作用。水中细菌总数往往同水体受有机物污染的程度呈正相关。因此，它是评价水质污染程度菌数少的水样中并不能排解这些物质的污染。本试验承受标准平皿法对水样中细菌作计数，这是测定水中好氧和兼性厌氧异养细菌密度的方法1mL水样在养分琼脂培育基中，37℃24h培育后所生长的菌落数。一般规定，1mL100个。大肠菌群是一群需氧或兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌3724~28h能发酵中查出大肠菌群的近似值。我国规定：每升自来水中大肠菌群数不得超过3个。三、仪器与试剂：6副10支〔10个〔2mlx2个；+盖玻片；玻璃棒；旧报纸；麻绳；pH试纸；酒精灯；托盘天平；显微镜；浮游生物网；采水器；塞氏圆盘；电热枯燥箱；手提式灭菌锅3C培育箱等。液；革兰氏碘液；95％乙醇；番红(沙黄)染色液四、试验内容及步骤：玻璃器皿的预备：取62支移液管〔一支1m，一支10m。将培育皿洗净晾干，挨次排列，1cm，将其分别包装好。将包装好的培育皿和移液管进展干热灭菌160~172。取一个锥形瓶，1059ml250ml100ml2g5支试管，分别取5ml3倍浓缩初发酵培育基，先将小试管加满，并将剩余培育基参加试管中，再将小试管倒置划入试管底部，盖上试管盖，重复操作于剩余4支试管。将1010支试管扎紧；用报纸已同样方法将锥形瓶顶部包装，以细绳扎紧。将10支试管与锥形瓶一同进展湿热灭菌121.℃，20mi。培育基的配置：原理：培育异养细菌最常用的培育基是牛肉膏蛋白胨培育基〔一般培育基。培育基的种类很多，依据养分物质的来源不同，可分为自然培育基、合成培育基和半合成培育基等。盐。配制格外便利，能充分满足微生物的养分需要，大多数微生物都能在此培育基上生长。本试验配制的培育基就属此。510mL9mL自来水，盖上试管塞。用烧杯从冰箱里取一局部乳糖蛋白胨培育基单倍浓缩液和三倍浓缩液1010mL移液管移取10mL单倍浓缩液，先将小支管装满后，再将剩余的液体放入试管中，小支管液一并放到试管中，55mL5mL三倍浓缩液，有气泡，盖上试管塞。用100mL100mL固体培育基放入三角瓶中，用天平测出2g的琼脂，放到三角瓶中，用电炉加热，同时，用玻璃棒不停搅拌，使琼脂溶解。水样采集：采水器：使用时留意先夹住出水口橡皮管,再将两个半圆形上盖翻开。让采水器沉入水中,底部入水口则自动开启。下沉深度应在系绳上有所标记,当沉入所需深度时,即上提系绳,上盖和下入水口自动关闭,提出水面后,不要碰及下底,杯口,松开铁夹,水样即注入烧杯。浮游生物网：先将开关关闭，在水面下至少10cm的位置，来回摇摆几次，取离水面，翻开开关，将取出的水样倒入小烧杯中。面平行。始终留意观看沉入水中的透亮度盘，当它刚好看不见时，登记圆盘在水中的深度，这就是河水的透亮度。pH：用玻璃棒蘸取少量水样于试纸上，半分钟后与标准比色卡比照，读出pH值。浮游生物的镜检：物台上，用物镜的低倍、中倍、高倍依次检查。认真观看并比照书本上的图片，记录所看到的浮游生物种类和数量，遇到书上没有的浮游生物，则将它画下来。细菌总数：菌种分别方法〔连续稀释分别法：取出一支2mL的无菌移液管；保持在离火焰1mL9mL1中，移液1吹吸三次，进一步将水样分散、混匀。再11mL9mL自来水23410—4，试管,5中水样10—5。1537°C24h。稀释平板计数法：1ml10-3、10-410-51ml，对号放入编好号的无菌平板中，每个平板放0.2ml1ml0.2ml稀释菌液放入平板中，这样简洁加大同一稀释度几个重复平板间的操作误差。倒平板：尽快向上述盛有不同稀释度菌液的平板中倒人溶化后冷却至45℃左右的培育基约15毫升／平板，置水平位置快速旋动平板，使培育基与菌液混合均匀，而又不使培育基荡出平板或溅到平板盖上。待培育基凝固后，将平板倒置于37℃恒温培育箱中培育。大肠菌落：1〕5mL三倍浓缩乳糖蛋白胨培育液的5〔内有倒管，分别参加10mL水样；于各装有10mL乳糖蛋白胨培育液的5个试管中〔内有倒管，分别参加1mL水样；再于各装有10mL乳糖蛋白胨培育液的5个试管中〔内有倒管0.1mL15管，三个稀释度。将各管充分混匀，置于3724h。革兰氏染色法：1片水滴中，混和均匀后涂成薄片，面积不宜过大。固定在空气中自然枯燥，使菌体的位置不再移动(也可将玻片置酒精灯火焰高处稍稍加热以枯燥之，涂抹面应向上)。于酒精灯火焰中通过3～4次(以玻片与手接触面感到略微烫手为度)，使菌体固定于玻片上而不易脱落。固定也可使标本简洁着色。初染放标本于水平位置，在上面滴加草酸铵结晶紫染色液。染色时间1min.染色到达需要的时间后，倾去染色液，并以水冲洗，至冲下的水无色时为止。1~2min，水洗。脱色滴加95％酒精脱色，将酒精滴至涂片上，静置约45s后水洗。镜检油镜镜检3〕显微镜油镜镜检：将聚光镜提升至最高点，转动转换器，移开高倍镜，使高倍镜和油镜成“八”字形，在标本中心滴一小滴香柏油，使油镜镜头浸入香柏油中，微微转动细调整器，可见清楚物像，假设油镜上升已离开油面还未看清物像的话。需重调整。此时可从侧面注视，用粗调整器将镜筒留神地降下，使油镜浸在香柏油中，其镜头几乎与标本相接。应特别留意不能压在标本上，更不能用力过猛否则不仅压碎玻片，也会损坏镜头。用左手向上转动粗调整器，当视野中有模糊的标本物像时改用细调整器，直到看清物象为止。五．试验结果与分析：浮游生物藻类++ 未知浮游生物纤毛虫++线虫+水蚤++盘星藻+++丝藻++++不同稀释度的平均菌落数不同稀释度的平均菌落数次数两个稀释度菌落数之比细菌总数〔CFU/ml〕报告方式〔CFU/ml〕1 2 310-415181710-51410121.43550003.55*10^5比照566大肠菌群结论依据实测结果：校园河水pH=6.5,透亮度=85.20cm=0.852m《地表水环境质量标准》ⅠⅠⅡⅢ Ⅳ6～9ⅤpH透亮度/m 15 42.5 1.5 0.5水质评价细菌总数水质评价细菌总数/ml极清洁水10-100个清洁水100-1000个不太清洁水1000-10000个不清洁水不清洁水10000-100000个极不清洁水由以上数据可得出结论：依据地表水标准，苏州科技学院石湖校区河水属Ⅳ类～Ⅴ类地表水。依据细菌总数测定值以及水质评价标