第七章 人工授精

第七章

人工授精

第一节概述第二节采精第三节精液品质检查第四节精液的稀释第五节精液的保存第六节输精第一节概述

一、人工授精的概念及在家畜生产中的意义

（一）概念

人工授精（AI）：使用器械采集公畜的精液，再用器械把经过检查和处理后的精液输入到母畜生殖道内，以代替公母畜自然交配而繁殖后代的一种繁殖技术。（二）意义1、提高优秀公畜的配种效能；2、充分利用优秀的遗传物质，加速遗传进展。3、便于繁殖管理。4、降低成本提高经济效益；5、有效地控制疾病的传播；6、克服公、母畜体格悬殊造成的交配困难。7、促进良种公畜的地区和国际交流。8、是推广繁殖新技术的一项基本措施。（三）应注意的问题

使用人工授精技术必须严格遵守操作规程，对种公畜进行严格的健康检查和遗传性能鉴定，防止遗传缺陷和某些通过精液传播疾病的扩散和蔓延，以及受胎率下降等问题的发生。

二、人工授精的发展概况

（一）试验阶段

1780年意大利的生理学家L.Spallanzani用处于体温温度的公狗精液给一只母狗进行人工授精，62d生了3只小狗。1782年他的试验被P.Rossi和Branchi教授成功地重复出来。他后来证实通过过虑可使精液和精清分开。1803年他又报告用雪把精子冷却后精子并未死亡，但停止了运动，加热后又恢复了运动，且能持续数小时，这可能是最早的冷冻研究。

1899年俄国学者开始研究家畜的人工授精，并于20世纪初在马的人工授精获得成功，随后成功地进行了牛和绵羊的人工授精。丹麦于1936年成立了世界第一个人工授精协会。在政府的支持下丹麦的育种者们一直在牛的人工授精的受胎率上处于领先地位。美国也比较早地开展了这项研究。（二）应用阶段20世纪40～60年代，人工授精进入全面推广阶段，成为家畜改良重要手段。许多国家，尤其是欧洲、北美、大洋洲、前苏联、日本等畜牧业发达的国家和地区，各家畜的人工授精在当时已相当普及，其中以奶牛的普及率最高，发展最快，技术水平最高，效果最好。（三）冷冻精液阶段1951年产下世界上第一头冷冻精液牛犊，使人工授精进入了一个崭新的发展阶段。（四）促进人工授精发展的几项关键技术1、假阴道的发明2、稀释液的开发：卵黄-磷酸盐卵黄-柠檬酸盐3、抗生素的应用4、输精方法的改进5、冷冻精液的发明与甘油的使用6、液氮的使用及液氮容器的开发7、塑料细管用于分装精液（五）国内人工授精的发展历史和现状我国家畜人工授精始于1935年的句容种马场，到20世纪40年代初期以后推广于绵羊和奶牛，1951年以后主要在东北大力推广于马匹。此后，人工授精的重点又转向奶牛和猪。奶牛人工授精于20世纪50年代中期开始，到70年代已普及，对中国黑白花奶牛的培育起到极其重要的作用。

目前，奶牛应用冷冻精液的普及率已在90％以上，重点奶源区已达100％。猪的人工授精自20世纪50年代起，相继在广西、江苏、北京、黑龙江、广东等地推广，主要应用于规模化养猪场。鸡的人工授精由于笼养鸡的发展得到普及应用。总之，目前应用最广的还是牛的人工授精。马的很有限了，绵羊、山羊也局限于大的养殖场。三、人工授精的基本技术环节

采精;精液品质检查;精液的稀释;精液的保存（液态保存、冷冻保存）;精液的运输;冷冻精液的解冻与检查;输精等。

第二节采精一、采精前的准备1、采精场的准备2、台畜的选择和利用3、采精公畜的准备4、采精器械的准备（一）采精场地采精应有专用的场地，以便使公畜建立稳固的条件反射。

（二）台畜的准备台畜的选择要尽量满足种公畜的要求，可利用活台畜或假台畜。

假台畜？（三）公畜的准备--种公畜的准备和调教1、在假台畜旁牵一发情母畜，诱使其爬跨数次，但不使其交配，当公畜性兴奋达高峰时即牵向假台畜使其爬跨。2、在假台畜后躯涂抹发情母畜的阴道分泌物或尿液，刺激公畜的性欲并引诱其爬跨假台畜，经过几次采精后即可调教成功。3、将待调教的公畜栓系在假台畜附近，让其观看另一头已调教好的公畜爬跨假台畜采精，然后再诱导其爬跨假台畜。公畜调教时应注意的事项1.调教过程中，要反复进行训练，耐心诱导，切勿施用强迫、恐吓、抽打等不良剌激；2.调教时应注意公畜外生殖器的清洁卫生；3.最好选择在早上调教，早上精力充沛，性欲盛；4.调教时间、地点要固定，每次调教时间不宜过长；

（四）采精器械的准备二、采精方法假阴道法；手握法；电刺激法；按摩法等。（一）假阴道法假阴道：模仿母畜阴道的生理解剖特点而设计的采精器具。主要包括外筒、内胎、集精杯、附件等。假阴道法适用于各种家畜。该方法是模拟母畜阴道环境条件，并诱导公畜在其中射精，从而获取精液的方法。假阴道法采精要满足三个条件：假阴道的温度、压力和润滑度。牛的假阴道（美式）牛的假阴道（苏式）（外壳、内胎、集精杯、附件）1、假阴道的安装步骤：（1）洗涤（2）安装内胎（3）消毒

（4）冲洗（5）注水（6）涂润滑剂（7）调压（8）测温2、采精操作假阴道法对不同的动物采精的注意事项：（1）公牛和公羊对温度比压力敏感，对假阴道温度要求较高，应用手握包皮将阴茎导入假阴道；牛、羊交配时间短，向前一冲即行射精，操作要迅速准确。（2）公马、公驴对假阴道内压力比温度更为敏感，可以直接用手握住阴茎导入假阴道；采精时要牢固地将假阴道固定于台畜尻部，阴茎基部、尾根部呈有节奏收缩和搏动即为射精。（3）公猪对压力要求高，阴茎龟头被固定才能射精。为此，要通过双联球有节奏地施加压力。公猪射精时间长达5～7min，且精液量大，注意防止精液倒流。常用手握法。（二）手握法

手握法采精一般适用于公猪及犬的采精，具有设备简单、操作方便，能选择采集精子浓厚部分的精液。但也存在精液容易污染和精子易受低温打击等缺点，应加以注意。

公猪手握法采精诱导公猪爬跨假台畜挤出包皮液并擦干包皮用三个手指锁定龟头接取含精子多的精液（三）电刺激法（四）按摩法主要用无爬跨能力的公牛和禽类。三、采精频率

采精频率是指每周内对公畜的采精次数。为维持种公畜正常的性生理机能，保持健康的体况和最大限度的提高射精量及精液品质，合理安排利用种公畜的采精频率是十分重要的。

成年公牛一般每周2次，羊因附睾贮存量大而射精量少，因此在配种季节可每天采精。公猪、公马射精量大，可适当减少采精次数。

正常成年公羊的采精频率及其精液特性

品种每周采精次数平均每次射精量(ml)平均每次射出精子总数（亿个）平均每周射出精子总数（亿个）精子活率（%）正常精子量（%）绵羊7～250.8～1.216～36200～40060～8080～95山羊7～200.5～1.515～60250～35060～8080～95第三节精液品质检查

目的：1、鉴别精液品质的优劣，决定精液样品的取舍，以此作为新鲜精液稀释、保存的依据。2、能确定种公畜的配种负担能力，反应种公畜的饲养管理水平、生殖器官的机能状态和采精技术的高低。3、衡量精液在稀释、保存、冷冻和运输过程中的品质变化及处理效果。一、外观检查：（一）感观正常未经稀释的牛、羊精液因精子密度大而混浊不透明，肉眼观察时，可见精液呈现旋涡云雾状。马、猪的精子浓度低，云雾状不明显或不能观察到。色泽：正常牛、羊精液呈乳白或乳黄色，水牛为乳白或灰白色，猪、马、兔的精液为淡乳白或浅灰白色。色泽异常表明公畜生殖器官有疾患。例如浅绿色是混有浓液；淡红色是混有血液；黄色是混有尿液。但有的公牛持续地产生黄色精液，是由于其中含有核黄素的结果，对精液品质没有影响。和混有尿液的区别是有无尿味。二、射精量:射精量可以从刻度集精杯上读出。品种和个体间有差异。评定是多次的平均值为依据，不包括胶状物。一般青年公畜和较小的个体产生的精液量少。频繁采精导致平均射精量少，连续二次时第二次的少。射精量少并非有害，但同时伴随有精子浓度降低，则获得的总精子数就会减少。射精量的异常减少可能是公畜的健康因素所导致，也可能是采精程序有问题。正常成年公畜的采精频率及其精液特性

项目每周采精适宜次数（次）每次射精量（ml）每次射出精子总数（亿）每周射出精子总数（亿）精子活率（%）正常精子率（%）奶牛2-65-1050-150150-40050-7570-95肉牛2-64-850-150100-35040-7565-90水牛2-63-636-8980-30060-8080-95马2-630-10050-150150-40040-7560-90驴2-620-8030-100100-3008090猪2-5150-300300-6001000-150050-8070-90绵羊7-250.8-1.516-36200-40060-8080-95山羊7-200.5-1.515-60250-35060-8080-95兔2-40.5-2.03.0-7.040-80二、显微镜检查精子活率；精子密度；精子形态精子畸形率精子顶体完整率（一）精子活率也叫活力，是指精液中前进运动精子所占有的百分率。作前进运动的精子是指精子近似直线地从一点移动或前进到另一点。精子活率是精液品质评定的一个重要指标，因为它与受精率高度相关。

精子活率是一个经常评定的指标，一般在采精后、精液稀释后、降温平衡后、冷冻后、解冻后、输精前都要评定。稀释液中的卵黄、甘油和乳汁等会使精子的运动速度减慢，但并不影响精子活率。

精子活率评定常采用目测法，主观性强是其主要缺点。评定时借助光学显微镜放大200～400倍，在37～40℃的环境下（保温箱、电热恒温板），对精液样品中前进运动精子所占百分率进行估测。采用0～1.0的10级评分标准。100％直线前进运动者为1.0分，90％直线前进运动者为0.9分，以此类推。

各种家畜鲜精活率一般在0.7～0.8左右，输精用的液体保存精液一般应在0.5以上，冷冻精液活率应在0.3以上。为看清单个的精子的运动情况，在评定精子活率时应对精液样品用等渗的稀释液进行稀释，牛、羊通常稀释100倍，猪、马需稀释10倍。可用生物电视显微镜多人评价。（二）精子密度1、目测法

与检查活率的方法相同，往往与观察活率同时进行，只是精液不作稀释，按照精子密度的大小粗略分为密、中、稀三个等级。密：整个视野内充满精子，很难见到单个精子，几乎看不到空隙。牛,10-20亿/ml;羊,25亿/ml以上;猪、马,2亿/ml以上.中：视野内精子之间有相当于一个精子长度的空隙，可见到单个精子活动。牛，8-10亿/ml；羊，20-25亿/ml;猪、马,1-2亿/ml。稀：视野内精子之间空隙很大，超过一个精子长度的空隙，可查数到精子的个数。牛，8亿/ml以下；羊，20亿/ml以下；猪、马,1亿/ml以下.2、计数法

用血细胞计数法可准确的测定每毫升精液中的精子数量。

3、光电比色计测定法根据精子数越多，精子浓度越高，其透光性越低的特性，利用光电比色计通过反射光和透光度来估测精子密度。

（三）精子形态1、精子畸形率畸形精子是指精液中形态不正常的精子，精子畸形率是精液中畸形精子数占精子总数的百分率。a.正常精子b.游离原生质滴c.各类畸形精子d.头部脱离e.附有原生质滴f.附有远端原生质滴g.尾部扭曲h.顶体脱落

大多数公畜的精液都有一定比例的畸形精子，正常精液的精子畸形率一般不超过20％，优秀精液的畸形率必须在一定数量之下：牛18％，水牛15％，羊14％，猪18％，马12％。精子畸形率检测方法：取一小滴被测精液，在载玻片上制成抹片，用0.5%龙胆紫酒精或蓝墨水染色3min，自然干燥、酒精固定、水洗后在400倍显微镜下观察，检查不同视野的精子数（不少于200个），计算出畸形精子百分率。也可和血细胞计数计算精子数同时进行。精子抹片示意图人工授精中心的常规检查中，畸形精子的分类：头部畸形或头尾分离;

精子尾部中段的前段、中部或末端附着

有原生质小滴;

尾部卷圈或弯曲和其他形式畸形。2、精子顶体异常率精子顶体异常率是指精液中顶体异常的精子数占精子总数的百分率。应特别注意顶体异常情况，因为顶体在受精过程中起重要作用。出现异常的原因:可能和精子生产过程和副性腺分泌物异常有关。精液在体外保存时间过长，遭受低温打击，特别是冷冻方法不当等原因造成的。

在正常情况下牛的顶体异常率为5.9%，猪为2.3%，牛超过14％，猪超过4.3%会直接影响其受精率。精子顶体异常有：膨大、缺陷、部分脱落、全部脱落等数种。

检查方法：抹片，自然干燥，用1～2ml福尔马林磷酸缓冲液固定。对含有卵黄、甘油的精液样品需用含2%甲醛的柠檬酸钠液固定。静置15min，水洗后用吉姆萨染液染色90min或用苏木精染液染色15min，水洗、干燥后再用0.5%伊红染液复染2～3min。水洗、干燥后置于1000倍显微镜下用油镜检查，或用相差显微镜观察。每张抹片需观察300个精子，统计出精子顶体异常率。三、精液的细菌学检查目前国内外都十分重视精液的微生物检查，精液中含有的病原微生物及菌落数已列入精液品质评定的重要指标，并作为海关进口精液的重要检验项目。方法：将一支细管精液用37℃水浴解冻后，注入灭菌平皿，然后将凉至50℃左右的普通琼脂以无菌操作倒入平皿内，每皿约15ml，并转动平皿使精液混合均匀，同时作空白对照平皿，待琼脂凝固后翻转平皿，置37℃恒温箱内培养36h取出，计数平皿内菌落数。每头公牛样品取二支做两个平皿，取平均值。我国牛冷冻精液国家标准规定，解冻后的精液应无病原微生物，每剂量精液经培养后观察到的细菌菌落数≤800个。随着生物技术的快速发展，PCR技术也已应用到精液病原微生物的检测中。第四节精液的稀释目的：1、

扩大精液量，增加与配母畜头数；2、供给精子代谢的营养，防止精子遭受冷打击；3、缓冲不良环境的危害，抑制细菌的繁衍，延长精子的存活时间；4、便于精液的保存和运输，提高优良种公畜的利用率。一、稀释液的主要成分及其作用（一）能量物质果糖、葡萄糖等单糖，以及卵黄和奶类（鲜全奶、脱脂乳或纯奶粉）等。（二）保护性物质1.缓冲物质柠檬酸钠、酒石酸钾钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾，三羟甲基氨基甲烷（Tris）、乙二胺四乙酸（EDTA）等。2.抗冻物质抗冻物质有甘油、乙二醇、DMSO等，还有卵黄、奶类等作为防冷保护物质。3.抗菌物质青、链霉素以及氨苯磺胺等。（三）其他添加剂1.酶类如过氧化氢酶能分解精子代谢过程中产生的过氧化氢，消除其危害，维持精子活率；β淀粉酶促进精子获能，提高受胎率。2.激素类催产素、前列腺素等。3.维生素类如VB1、VB2、VB3、VC等，能提高精子或率。

二、精液稀释液的种类、配制方法及注意事项（一）精液稀释的种类

1、现用稀释液

适用于鲜精配种。常用具有等渗透压的糖类和奶类，也可用生理盐水。在生产第一线常用这种稀释液。2、常温保存稀释液

适用于室内的短期常温保存，以糖类和弱酸盐为主体，具有pH值较低的特点。3、低温保存稀释液

适用于精液的低温保存，以卵黄和奶类为主要成分，具有抗冷休克的作用。4、冷冻保存稀释液

适用于精液的超低温冷冻保存，成分复杂，除含有糖类、卵黄外，还要加入甘油、乙二醇或二甲基亚砜等抗冻物质。配制复杂，多种稀释液分步稀释。（二）稀释液的配制方法和注意事项稀释液的种类很多，要根据实际情况合理选择，现用现配。1、所用的用具、容器必须洗涤干净、消毒，用前经稀释液冲洗。2、稀释液必须保持新鲜。可将灭菌的密封稀释液置于冰箱内保存数日。但卵黄、奶类、活性物质及抗生素必须用时加入。3、所用的水必须清洁无毒。蒸馏水或去离子水要求新鲜，使用沸水应在冷却后用滤纸过虑。4、药品成分要纯净。一般用化学纯或分析纯制剂，配制时称量要准确，溶解要充分，过虑后消毒。5、使用的奶类应在水浴中灭菌（90～95℃）10min，除去奶皮；卵黄要取自新鲜鸡蛋，取前要对蛋壳消毒。6、抗生素、酶类、激素、维生素等必须在稀释液冷却至室温时，按用量准确加入。三、精液稀释和稀释倍数（一）精液的稀释方法及注意事项1、稀释应在采精后立即进行。未经稀释的精液很难存活较长时间。2、确定稀释倍数。3、所有用具在稀释前必须用稀释液清洗。4、稀释液温度应与精液温度一致，在稀释过程中要防止温度突然升降。5、稀释时，将稀释液沿瓶壁缓缓倒入精液中，轻轻转动，混合均匀，忌不可把精液往稀释液里倒。6、如做高倍稀释，应分次进行，先低倍稀释，后稀释到高倍。7、稀释后要进行镜检，活力不能有明显下降。（二）精液稀释倍数

精液稀释倍数应根据动物种类及其采精量、精子密度、精子活率等来确定。适当倍数可延长精子的存活时间，过高会使精子存活时间缩短，从而影响受胎率。牛10～40倍，在保证每个输精剂量（冻精）含有1000万有效精子的前提下可适当提高稀释倍数；羊的精液采精后数小时用完，习惯上稀释2～4倍，根据当天的发情羊数调整；猪一般稀释2～4倍；马、驴的精液受精力下降很快，应在采精的当天或次日使用，一般稀释2～3倍；禽类一般稀释2～3倍，如用PBSE稀释液可做高倍稀释10倍稀释，受精率仍可达90％以上。第五节精液的保存常温保存低温保存冷冻保存：固态液态一、液态精液的保存（一）精液的常温保存

是指将精液保存在室温（15～25℃）下，也称变温保存。这种方法保存的精液在3d内有正常的受精能力，因设备简单，便于普及推广，特别适宜猪的精液保存。1、原理

利用稀释液的弱酸环境或冻胶环境抑制精子的活动，减少能量消耗，使精子保持在可逆的静止状态下而不失受精能力；另外，补充能量物质延长精子存活时间，加抗菌物质抑制微生物对精子的有害作用。方法：（1）向稀释液中冲入CO2；(2)利用精子自身产生的CO2，自行调节PH；(3)在稀释液中配有酸类物质和冲以氮气等。不同的方法有相应的稀释液。2、稀释液见书中的表格。鸡的精液可用简单的无缓冲稀释液，生理盐水或复方生理盐水。3、保存方法按输精剂量分装，封口后放在室内、地窖或自来水中保存。4、注意事项切记要加入抗生素；保存温度要恒定，不能超过25℃；pH值不能太低，弱酸性即可。（二）、精液的低温保存

精液的低温保存是将精液放在0～5℃下保存，效果比常温保存要好（猪除外），一般可保存7d左右不丧失受精能力。1、原理

利用低温来抑制精子活动，降低代谢和运动的能量消耗。当温度回升后，精子又逐渐恢复正常代谢机能而不丧失受精能量。2、稀释液见书3、保存方法

稀释液中加入卵黄，缓缓降温（从30℃至5～0℃时0.2℃/min左右为宜）后，按一个输精剂量分装至贮精瓶中，封口。用数层纱布或棉花包裹，置于0～5℃的低温下保存。输精前要升温，可将贮精瓶直接放到30℃的环境中。4、注意事项最好加入抗生素；保持温度恒定；必须加入卵黄，防止冷休克发生。二、精液的冷冻保存（一）冷冻导致精子死亡的原因冰晶是造成冷冻精子死亡的主要因素。精液冷冻过程中对精子的伤害主要有两个方面：1、化学伤害冰晶化是水在降温过程中的一定温度条件下，水分子重新按几何图形排列形成冰晶的过程。冰晶使精子膜内的溶质浓度和渗透压增高，水由精子内向外渗透，造成精子细胞脱水，从而使精子细胞发生不可逆的化学毒害而死亡。2、物理伤害精子水分形成冰晶，其体积增大且形状不规则，由于冰晶的扩展和移动，造成精子膜和细胞内部结构的机械损伤，引起精子死亡。精子水分冰晶化、玻璃化图冰晶化只有当温度在0～-60℃温度范围内，缓慢降温条件下形成，降温越慢冰晶越大，-15～-25℃时形成冰晶最多，对精子危害最大。在冷冻精液过程中，只有避开0～-60℃这个有害温度区，才利于精子长期保存。（二）精液冷冻保存的原理精液经过特殊处理后在超低温下形成玻璃化。玻璃化中的水分子能保持原来的无序状态，形成纯粹玻璃样的超微粒结晶，从而避免了原生质脱水和膜结构遭受破坏，使解冻后仍可恢复活力。在稀释液中添加的抗冻物质，如甘油、二甲基亚砜等物质能增强精子的抗冻能力，对防止冰晶发生起重要作用。甘油亲水性很强，它可在水结晶过程中限制和干扰水分子晶格的排列，降低了水形成结晶的温度。（三）精液冷冻保存稀释液1、牛精液冷冻保存稀释液主要有：卵黄－柠檬酸钠－甘油液；卵黄－糖类－甘油液；奶类－甘油液。2、猪精液冷冻保存稀释液一般采用以葡萄糖、乳糖、甘油为主要成分的稀释液。甘油浓度1～3％为宜。不少配方中加入乙二胺四乙酸（EDTA）有良好作用。3、马、绵羊精液冷冻保存稀释液一般采用糖类（葡萄糖、果糖、乳糖、棉籽糖、蔗糖）、乳类、卵黄、甘油为主要成分。（四）精液冷冻技术（制作过程）1、精液的品质检查2、精液的稀释3、降温和平衡4、分装、冻结和保存1、精液的品质检查

将采集的新鲜精液置于37～40℃下，迅速检测精液品质，精液活率不得低于0.7，精子密度要大，畸形率要低，以上三个指标必须达到畜种的优质精液要求。马、驴、猪和山羊的精液要做过虑或离心处理，猪的精液要取浓份成分。2、精液的稀释1）.一次稀释法快捷但甘油毒害大2）.二次稀释法

稀释一半（无甘油）1小时缓慢降温（30℃→5℃）等温稀释（甘油）3、降温和平衡⑴降温1-2h缓慢降温（30℃→5℃）⑵平衡5℃的精液在冰箱中（5℃）放置1-2h4、分装、冻结和保存分装方法：颗粒、细管、安瓶和袋装冻结：⑴干冰法⑵液氮熏蒸法⑶仪器冷冻法下降4℃/min(5—-60℃)，投入液氮（-196℃）保存：干冰、液氮

312为上海金晖家畜遗传开发有限公司代号，ND为南德文公牛的品种代号，010325为2001年3月25日的生产日期代号，98002为该公牛身份证号码ND31298002的后五位数。

冷冻精液生产过程：5、解冻与输精（1）解冻冷冻精液解冻的温度有三种：低温冰水解冻（0～5℃）、温水解冻（35～40℃）、高温水解冻（50～70℃）。生产中常用的效果较好的是温水解冻。将细管直接投入35～40℃温水中。颗粒的将1ml解冻液装入灭菌细管内，置于30～40℃温水中预热，然后投入1粒冻精，摇动至融化。（2）输精用于输精的冷冻精液，解冻后镜检活率不得低于0.3，解冻后要及时输精。第六节输精一、输精前的准备（一）输精器械的准备（二）精液的准备（三）母畜的准备（四）输精员的准备二、输精要求（一）输精量及其所含有效精子数

输精量及其所含有效精子数应根据母畜、禽的年龄和生理状况及精液类型而定。总原则：对体型大、经产、产后配种和子宫松弛的母畜，适当增加输精量；与正常配种母畜相比，经超数排卵处理的母畜应增加输精次数和输精量；液态保存的输精量一般要大于冷冻精液的输精量，颗粒的要大于细管的。有效精子数的问题。（二）适宜输精时间

是根据排卵时间和进入母畜生殖道内精子获能并保持受精能力的时间来决定。通常以发情鉴定的结果来确定适宜的输精时间，应以接近排卵时刻为宜。

奶牛是在发情后的10～20h，生产上是早发完配，晚发第二天早配，有经验的配种员一是根据发情时间，另一根据直检的结果判定输精时间。

母马的发情持续期较长5～7d，发情开始后的2～3d才排卵，所以一般是发情第2～3d配种，隔日再输精一次；母猪是在接受“压背”试验，或接受公猪爬跨时输精，隔日再输精一次。母羊根据试情来确定。（三）输精次数和间隔时间一般是8～10小时。猪12～18h;鸡4～5d；鸭5～7d；鹅5～6d。（四）输精部位

输精部位也和动物种类不同而异。牛采用子宫颈深部或子宫体输精；马、驴采用子宫内输精；山羊、绵羊采用子宫颈浅部输精；禽类一般采用插入阴道输精。各种家畜的输精要求

项目牛、水牛马、驴猪绵、山羊兔液态冷冻液态冷冻液态冷冻液态冷冻液态冷冻输精剂量(ml)1-20.2-1.015-3030-4030-4020-300.05-0.10.1-0.20.2-0.50.2-0.5输入有效精子数（亿）0.3-0.50.1-0.22.5-5.01.5-3.0