药物质量控制分析方法验证技术

关于药物质量控制分析方法验证技术第一页，共三十一页，2022年，8月28日一、方法验证的定义与一般原则二、方法验证涉及到的三个主要方面三、方法验证的具体内容四、方法再验证五、方法验证的评价第二页，共三十一页，2022年，8月28日一、方法验证的定义与一般原则

定义：根据检测项目的要求，预先设置一定的验证内容，并通过设计合理的试验来验证所采用的分析方法能否符合检测项目的要求原则：每个检测项目采用的分析方法，均需要进行方法验证科学性准确性可行性第三页，共三十一页，2022年，8月28日第四页，共三十一页，2022年，8月28日二、方法验证涉及到的三个主要方面（一）需要验证的检测项目（二）分析方法（三）验证内容第五页，共三十一页，2022年，8月28日二、方法验证涉及到的三个主要方面（一）需要验证的检测项目鉴别：杂质检查（限度试验、定量试验）：

葡萄糖输液：5-羟甲基糠醛对人体横纹肌和内脏有损害；

普罗布考：微量杂质会导致严重的眼毒性，其杂质A、B、C限量分别为5×10－6、5×10－5和0.5%

克林霉素磷酸酯：总杂质（BP）5种杂质；毒性定量测定（含量测定、溶出度、释放度等）：其他特定检测项目：

防腐剂

苯酚的检测骨肽注射液/动物四肢骨/静脉滴注/2mL-10~20mL。15mL/次不得添加任何防腐剂。第六页，共三十一页，2022年，8月28日（二）分析方法

化学分析方法仪器分析方法分析方法原理、仪器及仪器参数、试剂、系统适用性试验、供试品溶液制备、对照品溶液制备、测定、计算及测试结果的报告

（三）验证内容方法的专属性、线性、范围、准确度、精密度、检测限、定量限、耐用性和系统适用性等二、方法验证涉及到的三个主要方面第七页，共三十一页，2022年，8月28日三、方法验证的具体内容

（一）专属性（二）线性（三）范围（四）准确度（五）精密度（六）检测限（七）定量限（八）耐用性（九）系统适用性试验第八页，共三十一页，2022年，8月28日三、方法验证的具体内容

（一）专属性1、鉴别反应2、杂质检查3、含量测定杂质可获得杂质不可获得：降解第九页，共三十一页，2022年，8月28日第十页，共三十一页，2022年，8月28日第十一页，共三十一页，2022年，8月28日三、方法验证的具体内容

（二）线性测试结果与供试品中被测物浓度直接呈正比关系的程度考察的方法:

可用一贮备液经精密稀释，或分别精密称样，配制一系列不同浓度的测定组分溶液（至少5份）。以测得的响应信号作为被测物浓度的函数作图，观察是否呈线性，再用最小二乘法进行线性回归。第十二页，共三十一页，2022年，8月28日第十三页，共三十一页，2022年，8月28日三、方法验证的具体内容

（三）范围指能达到一定精密度、准确度和线性，测试方法适用的高低限浓度或量的区间1、原料药和制剂含量测定：为测试浓度的80%～120%2、制剂含量均匀度：70%～130%3、溶出度或释放度：±20%4、杂质：±20%第十四页，共三十一页，2022年，8月28日氯雷他定(loratadine)

：抗组胺药物/过敏性疾病氯雷他定(A)N-甲基地洛他定(C)地洛他定(B第十五页，共三十一页，2022年，8月28日第十六页，共三十一页，2022年，8月28日三、方法验证的具体内容

（四）准确度指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度。1、含量测定2、杂质定量试验以回收率%验证

9/6第十七页，共三十一页，2022年，8月28日第十八页，共三十一页，2022年，8月28日三、方法验证的具体内容

（五）精密度

指在规定的测试条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。用偏差、标准偏差（SD）或相对标准偏差（RSD）来表示。1、重复性

在相同条件下，由一个分析人员测定所得结果的精密度

2、中间精密度

在同一个实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备测定结果之间的精密度

3、重现性

在不同实验室由不同分析人员测定结果之间的精密度第十九页，共三十一页，2022年，8月28日第二十页，共三十一页，2022年，8月28日中国药典2010年版(一部)项下规定含量限度,确定重复性RSD应不大于5.0%；平均回收率在90.0%~110.0%之间，RSD应不大于5.0%,第二十一页，共三十一页，2022年，8月28日三、方法验证的具体内容

（六）检测限1、直观法2、信噪比法（七）定量限1、直观法2、信噪比法第二十二页，共三十一页，2022年，8月28日

维生素C：《美国药典》32版/比浊法-特定杂质草酸盐-限度检查,《中国药典》/欧洲药典

第二十三页，共三十一页，2022年，8月28日三、方法验证的具体内容

（八）耐用性

指在测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度。

被测溶液的稳定性样品的提取次数、时间。薄层色谱法：不同品牌的薄层板，点样方式，薄层展开时温度及相对湿度的变化液相色谱法：流动相的组成和pH值,色谱柱，柱温，流速等。气相色谱法：色谱柱、固定相，不同类型的担体，柱温，进样口和检测器温度等。

第二十四页，共三十一页，2022年，8月28日第二十五页，共三十一页，2022年，8月28日三、方法验证的具体内容

（九）系统适用性试验是对整个系统进行评估的指标。拖尾因子:主峰的拖尾因子要求在0.8~1.5之间;重复性:分离度:

相邻峰之间分离度大于1.5理论塔板数:

根据组分、色谱柱和相对保留时间不同而不同检测限度:

应低于相关物质的忽略限度;定量限度:

应等于或小于相关物质的忽略限度。第二十六页，共三十一页，2022年，8月28日四、方法再验证

原料药合成工艺改变、制剂处方改变、分析方法再验证原则：根据改变的程度进行相应的再验证。第二十七页，共三十一页，2022年，8月28日五、方法验证的评价（一）有关方法验证评价的一般考虑系统、合理、规范严谨（二）方法验证的整体性和系统性鉴别-两种第二十八页，共三十一页，2022年，8月28日第二十九页，共三十一页，2022年，8月28日关于定量测定存在的问题:1.验证的内容不全面,忽视部分验证内容,如耐用性、样品溶液稳定性等分析方法验证资料。2.准确度的实验内容不规范，未按要求在规定的范围内，设计3个不同浓度，每个浓度各分别制备3份供试品溶液进行测定。3.未能按四