第三章 多标记分析仪

2023/2/5现代仪器分析

modern

InstrumentalAnalysis

2023/2/52023/2/5第三章

多标记分析仪PEVictorTMX4

2023/2/5第三章多标记分析仪功能：比色读数功能化学发光功能荧光读数功能时间分辨荧光读数功能第一节、多标记分析仪原理2023/2/5一、比色读数功能2023/2/5酶联免疫检测ELISA2023/2/5二、化学发光功能Luminescence=theemissionoflightfromanysubstanceoccursfromelectronicallyexcitedstatesChemiluminescence=lightemittedbyachemicalreactionBioluminescence=typeofchemiluminescencechemicalreactioniscatalyzedbyanenzymeimportantinstudiesofgeneexpressionandgeneregulation2023/2/5三、荧光读数功能分子荧光：基态(S0)→激发态(S1、S2激发态振动能级)：吸收特定频率的辐射。符合什么公式？激发态→基态：多种途径和方式；速度最快、激发态寿命最短的途径占优势。符合什么公式？分子荧光是激发光将电子激发到激发态，由激发态最低振动能级跃迁到基态所发出的辐射光。浓度很低时，荧光强度

If

=2.3I0lc

=Kc

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镧系元素铕、钐、铽、镝的螯合物经紫外光激发后不仅荧光强度高，而且其衰变时间也长，可达几百个s，而样品中蛋白质天然本底荧光的衰变时间为1-10ns，相差5-6个数量级，因此在时间分辨荧光光度计上测量时，利用延迟测量时间，待短半衰期的天然本底荧光完全衰变后测定，所测信号完全为稀土螯合物的荧光，从而消除了非特异干扰的影响。

四、时间分辨荧光读数功能2023/2/5背景荧光激发周期超长衰减时间发射光强度时间检测窗口四、时间分辨荧光读数功能2023/2/52023/2/5第二节多标记分析仪的光学系统2023/2/5Photodiode一光吸收模块光路图2023/2/5二化学发光模块光路图2023/2/5三荧光检测模块光路图2023/2/5激发光源、激发光单色器或滤光片，样品池、荧光单色器及设有门控的检测器四时间分辨荧光模块光路图2023/2/5五与分光光度计不同之处1、光路不同2、样品池不同3、单色器不同4、通量不同5、样品量不同6、应用学科不同2023/2/52023/2/5第三节多标记分析仪的应用2023/2/5核酸和蛋白质的光吸收检测酶联免疫检测（ELISA）细胞活性检测（MTT）酶动力学分析细菌内毒素检测浓度测定乙酰胆碱脂酶检测环境监测一、光吸收主要应用2023/2/5报告基因基因检测化学发光免疫分析核酸定量(PCRQuantification)酶活分析活性氧分析二、发光主要应用2023/2/5浓度检测活性分析荧光ELISA酶联免疫检测（ELISA）研究分子之间相互作用三、荧光主要应用2023/2/5时间分辨荧光免疫激素：甲状腺激素、甾体类激素。病毒性肝炎标志物。肿瘤相关抗原。药物。多肽类。四、时间分辨荧光主要应用2023/2/5

更广的动力学范围更强的灵敏度每孔更少的试剂更少的实验步骤信号稳定性超过