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文档简介
具有两个或两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2+反应生成络合物含醛基的可溶性还原糖将Cu(OH)2还原为Cu2O沉淀反应原理0.01g/mLCuSO4溶液0.1g/mL
NaOH溶液0.05g/mLCuSO4溶液0.1g/mL
NaOH溶液B液A液乙液甲液成分双缩脲试剂斐林试剂比较项目都含有NaOH、CuSO4两种成分,且所用NaOH溶液浓度都是0.1g/mL相同点样液变紫色样液浅蓝色→棕色→砖红色反应现象不需加热50~65℃水浴加热反应条件先加入A液2mL摇匀,再加3~4滴B液摇匀甲、乙两液等量混匀后立即使用添加顺序选项取样时间检测试剂检测结果A第10d斐林试剂不显色B第20d双缩脲试剂不显色C第30d苏丹Ⅲ染液橘黄色D第40d碘液蓝色
第10d有可溶性糖,不排除有还原糖的可能,故加入斐林试剂,水浴加热后可能出现砖红色沉淀;种子中一定有蛋白质,加入双缩脲试剂后会出现紫色反应;第30d种子中有脂肪,与苏丹Ⅲ染液发生反应,呈现橘黄色;第40d种子中无淀粉,加入碘液后不会呈现蓝色。发芽的小麦种子匀浆中含有淀粉酶,淀粉酶能使小麦种子中的淀粉水解产生麦芽糖等还原糖。
1~4号试管中加入斐林试剂后,因1、3号试管中是蒸馏水而无还原糖,故显示斐林试剂本身的蓝色,2号试管中虽含还原糖,但未水浴加热,故仍呈蓝色,4号试管进行水浴加热后出现砖红色沉淀。
用于鉴定还原糖的斐林试剂甲液和乙液,必须混合均匀后再使用,而鉴定蛋白质时需先加A液,再加B液,且两者CuSO4溶液浓度也不同;用双缩脲试剂鉴定蛋白质时,不需要加热。
溶液双缩脲试剂碘液斐林试剂甲+--乙-++-甲、乙混合+++根据溶液甲中的颜色变化可知其含有蛋白质;根据乙溶液中的颜色变化可知其含有淀粉;甲、乙混合后,两溶液中的物质发生反应产生了还原糖,由此可知,甲溶液中含有淀粉酶,乙溶液中含有淀粉。20℃和30℃培养条件下相比较,30℃时淀粉酶的活性相对较高,淀粉酶催淀粉水解成麦芽糖的速率更快,相同条件下产生的麦芽糖更多。麦芽糖属于还原糖,与斐林试剂反应生成砖红色沉淀,麦芽糖越多显色越明显,斐林试剂本身为蓝色,可得出甲试管呈浅砖红色,乙试管呈砖红色,丙试管呈蓝色。试剂种类碘液苏丹
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