含量测定药味的选择药味的指标成分的选择既要考虑到指标成分

一、含量测定药味的选择：药味的指标成分的选择既要考虑到指标成分的性质，又要考虑到可否对新药的有效性、安全性、可控性进行评论及中医的君臣佐使的关系，还有考虑到当前现有剖析技术等！选择合理的药味，合理的指标性成分，关于拟订含量测定标准能够说已经成功了一半！所以，含量测定药味、指标性成分选择至关重要！选择时侧重从以下几个方面进行：需考虑含测指标与新药的安全性、有效性的关系。首选新药的有效成分及毒性成分为含测指标。如含有罂粟壳的止咳药中药，应测定吗啡的含量，并确立合理的含量限度范围。需考虑含测指标成分的理化性质。当新药中所含有效成分或毒性成分，因缺乏标准品、或因其余成分的扰乱而的确难以成立含测方法时，可考虑选择与有效成分化学构造相像、理化性质邻近的指标成分，或大类成份为含测指标，以间接反应新药的有效性或安全性。需考虑新药稳固性研究的需要。稳固性研究需要反应新药稳固性的敏捷指标。如含有苷类成分的新药，如采纳水解后苷元的含量为含测指标则难以反应在储存期问苷类成分水解成苷元的状况。新药中有几个有效成分都可测定含量时，需选择稳固性较差的成分，以反应药物的稳固性。传统中药需考虑中医理论的指导作用。传统中药复方制剂为，以中医理论为指导，采纳传统工艺制成、以传统功能主治表述的中药复方制剂。其含测指标应试虑君臣佐使的配伍理论，首选君药的成分为含测指标。需考虑含测指标成分与工艺的关系。如含何首乌的复方，以其水提工艺制成的制剂中大黄素的含量很低，而用四羟基二苯乙烯苷为含测指标较好。需考虑中药多成分多靶点的特色。处方中含有多个明确有效成分的，或许处方中药味分别按不一样路线提取的，建议研究成立多个含测指标；鼓舞将有效成分、大类成分、浸出物等指标联合起来，以更全面控制产质量量。(7)中药含量测定指标的选择需要考虑与基础研究的关系，表现基础研究与应用研究的关系。应充分利用已有的基础研究成就，为新药的研究和评论供给参照；同时，应联合新药应用研究的需要进行必需的基础研究，以提升中药质量控制的水平。已有的研究成就、文件资料是药质量量控制研究的基础，应加以充分利用，表现研究的继承性。如板蓝根向来缺乏适合的含测指标，现发现其所含喹唑酮成分拥有抗病毒活性，且溶于水及乙醇，含量稳固，有代表性，合用于作为板蓝根的质控指标。其余。含量限度过低者(如低于万分之一)，应增添含量测定指标或浸出物测定。在成立化学成分的含量测定有困难时，也可考虑成立生物测定等其余方法。中西药合用的复方制剂，需成立中药及每个化学药的含测方法。二、含量测定方法介绍：测定方法：含量测定的方法主要有薄层扫描法；紫外分光光度法；高效液相色谱等。当前主假如使用高效液相色谱法（HPLC）进行，下边将做详尽介绍高效液相色谱法的应用。高效液相色谱法简介：2.1色谱柱：最常用的填补剂为化学键合硅胶。反相色谱系统使用非极性填补剂，以十八烷基键合硅胶最为常用，即C18，其余还有C8柱，氰基柱,氨基柱等，正相色谱系统使用极性填补剂，常用的填补剂有硅胶等。2.2检测器：最常用的检测器为紫外检测器、

二极管阵列检测器、荧光检测器、示差检测器、蒸发光散射检测器、电化学检测器和质谱检测器。2.3流动相：可采纳固定比率（等度洗脱）或按规定程序改变比率（梯度洗脱）的溶剂构成作为流动相系统。三、方法学观察：现已*片为例，进行方法学研究。在

*片中选择其君药中所含的

A成分作为指标性成分进行含量测定的方法学研究。3.1检测波长的选择：取A比较品溶液，在200～700nm谱图在530nm波优点有最大汲取，故测定波长选定为530nm

波进步行光谱扫描，发现光。说明：一般选择待测样品化合物汲取度最大，即汲取曲线最高点为测定波长。化合物的最大汲取峰λmax或该化合物经显色后的最大汲取峰，经过分光光度计进行扫描后确立或经过二极管阵列检测来确立，并与该化合物文件值对比较应一致。在最大汲取峰处测准时敏捷度高，偏差小。所以一般状况下选择最大汲取波长作为检测波长。3.2样品提取方法、溶剂观察：取*片0.5克，精细加入不一样溶剂目标成分的含量。结果见下表：

25ml

进行超声提取

30分钟，进行含量测定，计算以上结果表示，70%醇提取和乙醇提取含量最高，而两者含量又无显然差别，故确立提取溶剂为70%乙醇。观察方法：依据指标性成分的性质采纳易提取的几种溶剂进行提取对照试验，选择提取率高的一种溶剂作为提取溶剂。3.3提取时间观察：取*片0.5克，精细加入70%乙醇进行超声提取5、10、15、20、分钟，进行含量测定，计算目标成分的含量。结果见下表：以上结果表示，超声办理15分钟，含量不再增添，为了保证提取完整，故确立超声办理时间为20分钟。观察目的：主假如选择把目标成分完整提拿出来，剖析方法。

所需的最短的时间，以便拟订合理的3.4标准品纯度观察：比较品纯度要求达到

98％以上。比较品纯度一般都能够达到要求。3.5标准曲线制作：配制不一样浓度的

A比较品溶液，观察线进样量与峰面积的性关系、线性范围、有关系数等。以进样量为横坐标峰面积为纵坐标做标准曲线：以上结果表示，在

0.0114

～0.0569μg范围内，本品峰面积值与进样量有优秀的线性关系。说明：做标准曲线的目主假如（1）确立样品进样量与峰面积能否呈线性关系；（2）、确立线性范围，即合用的样品进样量的确定；（3）、标准曲线能否经过原点，经过原点时，采纳一种浓度的标准品称一点法，进行含量测定；不经过原点时，采纳两种浓度的标准品（称两点法）进行含量测定。3.6阴性试验：要求样品溶液在与比较品液同样地点有同样保存时间的色谱峰，而阴性则无，主假如观察方法的专属性。常用阴阳比较法，即含以被测成分的药材样品与除掉该成分的药材的样品作比较，可观察被测成分的地点能否与扰乱组分重迭，以确证测定指标能否仅为被测成分的响应，防备假阳性的误判。3.7稳固性试验：观察不一样时间点能否对测定方法和测定结果有影响，用同一被测样品的供试液在不一样间隔时间用同一测定方法所获得的测定结果。一般观察36小时，计算RSD%不得大于3％。比较和样品均要做.稳固性试验试验结果表示，样品供试液和比较品溶液在24小时内稳固性优秀3.8精细度试验：是指用同样方法对同同样品溶液进行多次测定，观察各测定值相互接近的程度。详细以下：取同同样品，连续测定五次，相对标准偏差RSD％不得大于3％。比较和样品均要做，详细以下：精细度试验试验表示，仪器精细度优秀。3.9重复性试验：是指在同一条件下对同一批样品，从样品供试品液制备始，制备多份供试品溶液。每份供试品液再分别进行测定，测定所获得的数据进行统计学办理，计算其含量的均匀值和相对标准偏差（RSD%）。详细以下：同一批号样品，分别取低、中、高三个样品量，每个样品量3份，按样品测定方法操作，相对标准偏差RSD％不得大于3％。3.10加样回收试验：一般回收率要求在95～105％。试验结果表示：回收率在95％～100％之间，加样回收优秀详解：加样回收试验即于已知被测成分含量的成药中再精细加入必定量的被测成分纯品，依法测定。用实测值与原样品中含测成分之差，除以加入纯品量计算回收率。此法不用制备空白比较，模拟真切性好。注意事项：１、纯品的加人量与取样量中被测成分之和一定在标淮曲线线性关系范围以内；２、外加纯品的量要适合，过小则惹起较大的相对偏差，过大则扰乱成分相对减少，真实性差。３、一般加入量与所取样品含量之比控制在1：1左右。４、做加样试验时，有人将比较品加至制备好的供试品溶液中，这是不对的，这样不可以观察提取、纯化过程中被测成分能否损失，不可以代表含量测定方法的回收率。所以要在称样开始时就加入比较品！3.11含量限度的拟订：申报临床，一定依据原料根源不一样的三批以上样品测定结果，确立含量范围三批样品含量每克样品