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文档简介
关于肠杆菌科细菌第一页,共一百九十四页,2022年,8月28日第八章肠杆菌科细菌
第一节概述第二节埃希菌属第三节志贺菌属第四节沙门氏菌属第五节耶尔森菌属第六节枸橼酸杆菌属第七节克雷伯菌属第八节肠杆菌属第九节多源菌属第十节哈夫尼亚菌属第十一节沙雷菌属第十二节变形杆菌属第十三节普罗威登菌属第十四节摩根菌属第十五节邻单胞菌属第十六节其他肠杆菌科细菌第二页,共一百九十四页,2022年,8月28日第一节概述第三页,共一百九十四页,2022年,8月28日肠杆菌科细菌的基本描述肠杆菌科细菌是一大群形态、生物学性状相似的革兰阴性杆菌多数有周身鞭毛,有动力发酵利用葡萄糖还原硝酸盐为亚硝酸盐氧化酶(-)触酶(+)营养要求不高第四页,共一百九十四页,2022年,8月28日分类
与人类感染有关的肠杆菌科细菌有31个菌属,其中临床标本中常见的菌属有15种克雷伯菌属爱德华菌属邻单胞菌属变形杆菌属普罗威登斯菌属沙门菌属耶尔森菌属志贺菌属沙雷菌属肠杆菌属埃希菌属哈夫尼亚菌属枸橼酸杆菌属摩根菌属多源菌属
第五页,共一百九十四页,2022年,8月28日有些菌属对人类有明显的致病作用有些菌属与医院感染有关多数菌属是肠道正常菌群,也是条件致病菌临床意义第六页,共一百九十四页,2022年,8月28日内毒素细菌细胞壁成分肠毒素细菌所释放的外毒素不耐热肠毒素(LT):对热不稳定,65℃,30min即失活。分子量大,有免疫原性耐热肠毒素(ST):对热稳定,100℃,20min仍不被破坏,分子量小,免疫原性弱定居因子也称粘附素,即细菌的菌毛细菌产生的酶和溶血素等致病物质第七页,共一百九十四页,2022年,8月28日所致疾病肠道外感染:泌尿道、呼吸道、伤口感染,脑膜炎、败血症等肠道感染:急、慢性肠道感染、食物中毒、旅行者腹泻及肠热症等第八页,共一百九十四页,2022年,8月28日形态与结构革兰阴性杆菌无芽孢多有鞭毛多有菌毛少数有荚膜或包膜第九页,共一百九十四页,2022年,8月28日
培养特征
营养要求不高需氧或兼性厌氧生长在普通营养平板上生长良好在肠道选择性培养基上根据其能否分解乳糖可形成各种颜色菌落第十页,共一百九十四页,2022年,8月28日生化反应葡萄糖发酵阳性硝酸盐还原阳性氧化酶阴性触酶阳性肠杆菌科细菌第十一页,共一百九十四页,2022年,8月28日抗原构造
菌体(O)抗原:具有属、种特异性,耐热鞭毛(H)抗原:不耐热荚膜或包膜抗原:能阻止O抗原与相应的抗体发生凝集(Vi抗原,K抗原)第十二页,共一百九十四页,2022年,8月28日特点:对理化因素的抵抗力不强原因:无芽孢应用:氯消毒饮水加温消毒餐具胆盐、煌绿用以制备肠道选择性培养基
抵抗力第十三页,共一百九十四页,2022年,8月28日特点:易出现变异菌株变异的方式:自发突变、转导、结合、溶原性转换常见的变异类型:耐药性变异、产毒性变异、H-O抗原变异、光滑-粗糙性菌落变异(S-R变异)意义:使受体菌获得新的性状,使细菌致病性发生改变,导致细菌鉴定困难变异第十四页,共一百九十四页,2022年,8月28日易变异溶源性转换生化反应性变异通过引起耐药性变异毒力性变异转导接合自发突变抗原性变异第十五页,共一百九十四页,2022年,8月28日种属鉴定科的特征硝酸盐还原+葡萄糖发酵氧化酶-触酶+属间鉴定特征属内种间鉴定特征血清学分型报告细菌种名报告细菌血清型第十六页,共一百九十四页,2022年,8月28日第二节埃希菌属第十七页,共一百九十四页,2022年,8月28日分类大肠埃希菌(E.coli):代表菌种蟑螂埃希菌(E.blattae)弗格森埃希菌(E.fergusonii)赫尔曼埃希菌(E.hermannii)伤口埃希菌(E.vulneris)不脱胺/凝集埃希菌(E.adecarboxylata/agglomerans)第十八页,共一百九十四页,2022年,8月28日
临床意义——致病物质
侵袭力:K抗原和菌毛与侵袭力有关内毒素:毒性部位为细胞壁的类脂A肠毒素:不耐热肠毒素(LT)
耐热肠毒素(ST)第十九页,共一百九十四页,2022年,8月28日临床意义——所致疾病
肠道外感染以泌尿系统感染为主,亦可引起腹膜炎、胆道感染、肺炎、严重者可引起败血症肠道内感染能引起轻微腹泻至霍乱样严重腹泻,并能引起致死性并发症,如溶血性尿毒综合征(HUS)第二十页,共一百九十四页,2022年,8月28日根据不同的血清型别、毒力和临床症状致泻性E.coli分为5类:肠毒素型大肠埃希菌(ETEC)
肠致病性大肠埃希菌(EPEC)
肠侵袭型大肠埃希菌(EIEC)
肠出血型大肠埃希菌(EHEC)
肠凝聚型大肠埃希菌(EAggEC)第二十一页,共一百九十四页,2022年,8月28日肠产毒型大肠埃希菌
(enterotoxigenicE.coli,ETEC)
婴幼儿和旅游者腹泻致病物质肠毒素enterotoxinheatlabileenterotoxin(LT)heatstableenterotoxin(ST)定植因子(菌毛)第二十二页,共一百九十四页,2022年,8月28日肠致病型大肠埃希菌
(enteropathogenicE.coli,EPEC)婴幼儿腹泻致病物质:粘附因子第二十三页,共一百九十四页,2022年,8月28日肠侵袭型大肠埃希菌
(enteroinvasiveE.coli,EIEC)菌痢样腹泻,有脓血便,里急后重致病机理侵袭结肠粘膜上皮并大量繁殖细菌死亡后释放内毒素,引起炎症第二十四页,共一百九十四页,2022年,8月28日肠出血型大肠埃希菌
(enterohemorrhagicE.coli,EHEC)亦称为Vero毒素大肠埃希菌水源性或食源性感染,可有严重并发症,死亡率高。血清型O157:H7型EHEC可引起HUS致病物质菌毛毒素Vero毒素第二十五页,共一百九十四页,2022年,8月28日肠集聚型大肠埃希菌(enteroaggregativeE.coli,EAggEC)婴儿持续性腹泻、脱水致病因子:不明可能与肠集聚耐热毒素(EAST)有关第二十六页,共一百九十四页,2022年,8月28日
形态结构
形态:呈短杆状特殊结构有鞭毛无芽胞少数有荚膜第二十七页,共一百九十四页,2022年,8月28日培养特性对氧需求:需氧或兼性厌氧营养要求:不高菌落:圆形、扁平、灰白色血平板:可有-溶血环肠道鉴别培养基:可形成乳糖发酵型菌落第二十八页,共一百九十四页,2022年,8月28日大肠埃希菌在血平板上的菌落形态
第二十九页,共一百九十四页,2022年,8月28日大肠埃希菌在MAC上的菌落形态
第三十页,共一百九十四页,2022年,8月28日种属鉴定属的特征:甲基红(+),枸橼酸盐(-),尿素(—),能发酵葡萄糖产酸产气第三十一页,共一百九十四页,2022年,8月28日鉴定要点能分解乳糖,在肠道选择性培养基可产生有色菌落,有助于初步鉴定在中国兰平板上为蓝色菌落在伊红美蓝平板上为紫黑色菌落在麦康凯和SS平板上为红色菌落第三十二页,共一百九十四页,2022年,8月28日鉴定要点种间鉴定可根据鉴别特征选择一组生化反应,对照结果进行查表鉴定。如首先根据纤维二糖试验结果,将6种埃希菌分为纤维二糖阳性和阴性两组,再进行鉴别,见表第三十三页,共一百九十四页,2022年,8月28日属内各种间生化反应鉴定表生化反应大肠埃希菌不活跃大肠蟑螂埃希菌弗格森埃希菌霍尔曼埃希菌伤口埃希菌纤维二糖发酵---+++鸟氨酸脱羧酶VV+++-动力+--+++KCN生长----+V丙二酸盐利用--+V-V第三十四页,共一百九十四页,2022年,8月28日鉴定要点目前常用的鉴定方法是使用商品化的细菌鉴定系统进行鉴定(包括编码鉴定和仪器鉴定),方法简单便捷,准确率高 第三十五页,共一百九十四页,2022年,8月28日鉴定要点不活跃大肠埃希菌与志贺菌易混淆,需相互鉴别
醋酸钠葡萄糖铵利用粘质酸盐产酸试验大肠埃希菌+++志贺菌属---第三十六页,共一百九十四页,2022年,8月28日致泻性大肠埃希菌鉴定方法接种筛选培养基生化反应鉴定血清型鉴定毒力检测
第三十七页,共一百九十四页,2022年,8月28日ETECELISA方法检测LT、ST基因探针检测编码肠毒素的基因EIEC豚鼠眼结膜试验检测细菌毒力EPEC特异性抗血清分型ELISA检测细菌毒素细胞培养法检测细菌毒力几种致泻大肠埃希菌检测方法
第三十八页,共一百九十四页,2022年,8月28日EHECSMAC培养基筛选特异性抗血清分型ELISA法测定VT毒素PCR法结合基因探针检测编码毒素的基因EAggEC液体培养-集聚试验检测受检菌的粘附性探针技术测定编码EAST的基因几种致泻大肠埃希菌检测方法第三十九页,共一百九十四页,2022年,8月28日第三节志贺菌属第四十页,共一百九十四页,2022年,8月28日分类:志贺菌属分为4个血清群A群为痢疾志贺菌
B群为福氏志贺菌
C群为鲍氏志贺菌
D群为宋内志贺菌第四十一页,共一百九十四页,2022年,8月28日临床意义——致病物质
侵袭力:即细菌的菌毛,能粘附于肠粘膜上皮细胞内毒素:引起局部和全身症状外毒素:细胞毒,肠毒素,神经毒第四十二页,共一百九十四页,2022年,8月28日急性菌痢慢性菌痢隐匿型菌痢携带者临床意义——所致疾病
第四十三页,共一百九十四页,2022年,8月28日
形态和培养特征
形态:菌体短小,杆状特殊结构:无鞭毛无芽胞无荚膜有菌毛第四十四页,共一百九十四页,2022年,8月28日兼性厌氧菌营养要求不高普通平板:中等大小、半透明、光滑鉴别培养基:乳糖不发酵的菌落形态和培养特性菌落形态(麦康凯平板)
第四十五页,共一百九十四页,2022年,8月28日种属鉴定菌属特征发酵葡萄糖产酸不产气赖氨酸(-)H2S(-)尿素(—)动力(—)第四十六页,共一百九十四页,2022年,8月28日鉴别要点在肠道鉴别培养基生长形成无色透明,中等大小,光滑的不分解乳糖的菌落,有助于初步鉴定。痢疾志贺菌不能发酵甘露醇宋内志贺菌鸟氨酸脱羧酶(+),迟缓发酵乳糖鲍氏和福氏志贺菌生化反应难以鉴别第四十七页,共一百九十四页,2022年,8月28日鉴定要点与不活跃E.coli的鉴别:采用醋酸钠、葡萄糖铵和粘质酸盐试验,大肠埃希菌均为(+),而志贺菌为(-)与类志贺邻单胞菌的鉴别:采用氧化酶和ONPG试验,类志贺邻单胞菌均为(+),而志贺菌为(-)与沙门菌伤寒血清型鉴别:采用动力,H2S试验,沙门菌伤寒血清型均为(+),而志贺菌为(-),也可采用因子血清凝集试验鉴别第四十八页,共一百九十四页,2022年,8月28日凡生化反应符合Shigella者均需做血清学鉴定和分型,生化反应可作为引导血清学分型诊断的依据,两者必须相互配合。鉴定要点第四十九页,共一百九十四页,2022年,8月28日主要有O和K二种抗原。O抗原是血清学分类的依据,可将志贺菌分为4个血清群和40余个血清型(含亚型)K抗原在血清学分型上无意义,但可阻止O抗原与相应抗血清的凝集反应,通过加热100℃,15~30min可将其破坏。抗原构造和血清学分型-抗原构造第五十页,共一百九十四页,2022年,8月28日志贺多价血清做玻片凝聚试验进一步用分群血清,鉴定到种、型如分离的细菌生化鉴定符合志贺菌,而与多价血清不凝聚,应考虑为K抗原的阻断作用,可通过将菌液加热100℃,15~30min,破坏K抗原后重复进行O抗原凝聚试验。抗原构造和血清学分型-血清学鉴定第五十一页,共一百九十四页,2022年,8月28日第四节沙门氏菌属第五十二页,共一百九十四页,2022年,8月28日分类肠沙门菌:亚种Ⅰ为肠亚种亚种Ⅱ为撒拉姆亚种亚种Ⅲa为亚利桑那亚种亚种Ⅲb为双相亚利桑那亚种亚种Ⅳ为豪顿亚种亚种Ⅵ为因迪卡亚种本哥利沙门菌第五十三页,共一百九十四页,2022年,8月28日临床意义——致病物质
侵袭力有vi抗原的沙门菌具有侵袭力,具有抗吞噬作用,能在细胞内寄生。内毒素沙门菌死亡后可释放出内毒素第五十四页,共一百九十四页,2022年,8月28日
胃肠炎(食物中毒)菌血症或败血症伤寒和副伤寒(肠热症)携带者临床意义——所致疾病第五十五页,共一百九十四页,2022年,8月28日伤寒由S.ser.Typhi。细菌随污染的食品或饮料经口感染,侵入肠粘膜上皮细胞,被巨噬细胞吞噬,随巨噬细胞至肠系膜淋巴结大量繁殖,并经胸导管进入血流(第一次菌血症)。细菌随血流播散至肝、脾、胆囊、肾和骨髓等实质器官,并大量繁殖,再次进入血流(第二次菌血症),细菌随血液扩散至全身各器官及皮肤,胆囊中的细菌随胆汁进入肠腔,可经粪便排出;肾脏中的细菌随尿排出体外。第五十六页,共一百九十四页,2022年,8月28日标本采集一般伤寒发病的第1周取外周血培养;
第2周起取粪便和尿液培养;
全程均可取骨髓做培养胃肠炎患者可取粪便、呕吐物和可疑食物培养
败血症应进行血液培养第五十七页,共一百九十四页,2022年,8月28日形态和培养特征
形态杆状特殊结构有鞭毛无芽胞无荚膜第五十八页,共一百九十四页,2022年,8月28日形态和培养特征
兼性厌氧菌营养要求不高菌落呈中等大小、无色、半透明、光滑在SS平板上,因产生H2S可形成黑色中心的菌落伤寒沙门菌菌落形态(SS平板)第五十九页,共一百九十四页,2022年,8月28日种属鉴定菌属特征不发酵乳糖吲哚(-)尿素(-)VP(—)甲基红(+)枸橼酸盐利用(+)大多产生硫化氢发酵葡萄糖产酸产气(伤寒沙门菌产酸不产气)第六十页,共一百九十四页,2022年,8月28日鉴别要点肠道选择性培养基:无色、透明的不发酵乳糖菌落或因产生H2S而形成黑色中心菌落为可疑菌落,有助于初步鉴定。
第六十一页,共一百九十四页,2022年,8月28日生化鉴别方法查表鉴定:可选择丙二酸盐试验将2个种和6个亚种分为丙二酸盐阳性和阴性两组,再继续鉴定,见表商品化的细菌鉴定系统鉴定第六十二页,共一百九十四页,2022年,8月28日沙门菌种及亚种鉴定生化反应肠沙门菌本哥利亚种肠亚种萨利姆亚种亚利桑拉亚种双相亚利桑拉豪顿亚种英迪卡亚种丙二酸盐利用-+++---半乳糖醛酸发酵-+-++++β-半乳糖苷酶--++-V+KCN生长----+-+第六十三页,共一百九十四页,2022年,8月28日与其他产硫化氢的肠杆菌细菌鉴别种属赖氨酸脱羧酶阿拉伯糖迟钝爱德华菌+-沙门菌伤寒血清型++枸橼酸杆菌-+变性杆菌--第六十四页,共一百九十四页,2022年,8月28日鉴别要点生化反应符合沙门菌属,必须用沙门诊断血清进行确认和血清分型,并且将分型结果报告临床。第六十五页,共一百九十四页,2022年,8月28日抗原构造O抗原是分群的依据,可分为42个群,可刺激机体产生IgM抗体H抗原是分型的依据,可刺激机体产生IgG抗体Vi抗原表面抗原,与细菌毒力有关,当机体有细菌存在时可产生一定的抗体,当细菌消除后抗体消失,可用以检测带菌者。不是细菌分型的依据,但能阻止O抗原与相应的抗体结合第六十六页,共一百九十四页,2022年,8月28日常用的血清有:O多价血清(含A~F群),O、H、Vi抗原因子血清生化反应提示为沙门菌,血清不凝聚,应考虑是否有Vi抗原?
血清学分型加热或传代去除Vi抗原凝集:AFO不凝集:A~F以外第六十七页,共一百九十四页,2022年,8月28日有关沙门菌的命名国内尚无统一规定大多数实验室使用细菌种名代替血清型报告,如伤寒沙门菌,猪霍乱沙门菌建议使用Salmonella参比研究实验室推荐的血清型方式报告鼠伤寒沙门菌报告为沙门菌鼠伤寒血清型猪霍乱沙门菌报告为沙门菌猪霍乱血清型第六十八页,共一百九十四页,2022年,8月28日常见方法:肥达试验、间接血凝试验和ELISA
试验等,其中肥达试验较普及。肥达试验:用已知伤寒沙门菌菌体(O)抗原和鞭毛(H)抗原,测定受检血清中有无相应抗体及其抗体的效价血清学诊断
第六十九页,共一百九十四页,2022年,8月28日正常值O凝集效价≥1:80,H凝集效价≥1:160,A、B、C凝集效价≥1:80时有诊断价值。动态观察效价逐次递增或恢复期效价比初次≥4倍者有意义血清学诊断
第七十页,共一百九十四页,2022年,8月28日O、H凝集效价均超过正常值,则肠热症可能性大两者均低,患病可能性小若O不高、H高:预防接种或非特异性回忆反应如O高、H不高:感染早期或与O抗原有交叉反应的其他沙门菌感染。O抗体、H抗体的诊断意义第七十一页,共一百九十四页,2022年,8月28日第五节耶尔森菌属第七十二页,共一百九十四页,2022年,8月28日
分类小肠结肠炎耶尔森菌假结核耶尔森菌鼠疫耶尔森菌弗氏耶尔森菌中间耶尔森菌克氏耶尔森菌奥氏耶尔森菌伯氏耶尔森菌莫氏耶尔森菌罗氏耶尔森菌鲁氏耶尔森菌第七十三页,共一百九十四页,2022年,8月28日临床意义——致病物质鼠疫耶尔森菌内毒素外毒素(鼠毒素)其他封套抗原、毒力抗原、色素形成能力、凝固酶、纤维蛋白因子等第七十四页,共一百九十四页,2022年,8月28日鼠疫耶尔森菌腺鼠疫局部淋巴结(多为腹股沟淋巴结)的肿胀,继而发生坏死和脓肿。败血型鼠疫由细菌侵入血流大量繁殖所致。肺鼠疫原发性肺鼠疫多由呼吸道传染所致。临床意义——所致疾病第七十五页,共一百九十四页,2022年,8月28日小肠结肠炎耶尔森菌侵袭性毒素某些血清型菌株能产生耐热性肠毒素某些菌体抗原与人机体组织有共同抗原临床意义——致病物质第七十六页,共一百九十四页,2022年,8月28日小肠结肠炎耶尔森菌:有小肠、结肠炎菌血症结节性红斑反应性关节炎临床意义——所致疾病第七十七页,共一百九十四页,2022年,8月28日假结核耶尔森菌主要对啮齿类动物致病,人类感染少见,大多数人类病例为肠道感染,有时可引起肠系膜淋巴结炎,症状类似于急性或亚急性阑尾炎临床意义——所致疾病第七十八页,共一百九十四页,2022年,8月28日鼠疫耶尔森菌形态特性形态:直杆菌或球杆菌染色性:革兰染色阴性,两端钝圆,两极浓染特殊结构:无鞭毛,无芽胞,有荚膜鼠疫耶尔森菌形(wayson染色)第七十九页,共一百九十四页,2022年,8月28日兼性厌氧菌营养要求不高血琼脂上形成柔软、粘稠的粗糙菌落在肉汤培养基中24h沉淀生长,48h形成菌膜,稍加摇晃后呈钟乳石状下垂在肠道培养基上呈不发酵乳糖小菌落鼠疫耶尔森菌在麦康凯平板上的菌落鼠疫耶尔森菌培养特性第八十页,共一百九十四页,2022年,8月28日小肠结肠炎耶尔森菌形态特性形态:球杆菌染色性:革兰染色阴性,偶有两极浓染特殊结构:无芽胞,无荚膜第八十一页,共一百九十四页,2022年,8月28日小肠结肠炎耶尔森菌培养特性耐低温,在4℃~40℃均能生长营养要求不高血琼脂:灰白色菌落麦康凯琼脂:无色、半透明、扁平较小的菌落第八十二页,共一百九十四页,2022年,8月28日
共同特征甲基红(+)苯丙氨酸(-)丙二酸盐(-)
H2S(-)
37℃培养动力(-)种属鉴定第八十三页,共一百九十四页,2022年,8月28日耶尔森菌属种间鉴别特征生化反应鼠疫耶尔森菌假结核克氏耶尔森菌伯氏耶尔森菌罗氏耶尔森菌莫氏耶尔森菌奥氏耶尔森菌小肠结肠炎中间耶尔森菌弗氏耶尔森菌动力-+++++++++VP------++++蔗糖发酵---+++-+++山梨醇发酵--+-++-D++枸橼酸盐----+-D-+D蜜二糖发酵D+--D---+-第八十四页,共一百九十四页,2022年,8月28日鉴定要点生化反应在25~30℃比35℃更活跃鼠疫耶尔森菌两段浓染典型的细菌形态,血平板上表面粘稠的菌落,肉汤培养基中呈“钟乳石状”生长现象,有助于初步鉴定。第八十五页,共一百九十四页,2022年,8月28日鼠疫耶尔森菌生化特征:25℃和37℃动力均为(-),鸟氨酸、蔗糖和尿素均(-)小肠结肠炎耶尔森菌生化特征:25℃动力(+)、37℃动力(-)有嗜冷性,4℃可生长
25℃VP试验(+)、37℃VP试验(-)尿素(+)鉴别要点第八十六页,共一百九十四页,2022年,8月28日第六节枸橼酸杆菌属第八十七页,共一百九十四页,2022年,8月28日分类:枸橼酸杆菌属(Citrobacter)包括11个种弗劳地枸橼酸杆菌布拉吉枸橼酸杆菌法玛丽枸橼酸杆菌库斯枸橼酸杆菌雷登枸橼酸杆菌塞拉克枸橼酸杆菌无丙二酸盐枸橼酸杆菌魏克曼枸橼酸杆菌扬哥枸橼酸杆菌吉乐枸橼酸杆菌穆利枸橼酸杆菌第八十八页,共一百九十四页,2022年,8月28日
该菌属广泛存在于自然界,是人和动物肠道的正常菌群,凡是粪便污染的地方,均可发现本菌属的存在,也是条件致病菌,与腹泻和某些肠道外感染有关。临床意义第八十九页,共一百九十四页,2022年,8月28日形态和培养特性革兰阴性杆菌,有周身鞭毛,无芽胞,无荚膜。兼性厌氧生长,营养要求不高,普通培养基:灰白色、湿润、隆起,边缘整齐的菌落。肠道鉴别培养基:乳糖发酵型的菌落。弗劳地枸橼酸杆菌在SS平板上,因产生H2S可形成黑色中心的菌落。第九十页,共一百九十四页,2022年,8月28日弗劳地枸橼酸杆菌在麦康凯平板上的菌落第九十一页,共一百九十四页,2022年,8月28日差异枸橼酸杆菌在麦康凯平板上的菌落
第九十二页,共一百九十四页,2022年,8月28日共同特征枸橼酸盐(+)赖氨酸脱羧酶(-)甲基红(+)苯丙氨酸(-)有特征性气味、能发酵利用甘露醇、山梨醇、甘露糖、阿拉伯糖、麦芽糖等多种糖醇类物质
种属鉴定第九十三页,共一百九十四页,2022年,8月28日注意:很多鉴定系统的数据库中不包括枸橼酸杆菌属新种名称和分类资料种间鉴定,见表鉴定要点第九十四页,共一百九十四页,2022年,8月28日枸橼酸杆菌种间鉴定表生化反应弗劳地穆利杨哥吉乐魏克曼无丙二酸盐法玛丽布拉吉库斯赛拉克雷登鸟氨酸脱羧酶-----++++++丙二酸盐利用---++---+++尿素水解VV(+)-+(+)VVV++卫矛醇发酵-+(+)----VV+-KCN生长++++++++-+-蔗糖发酵+V(-)V--+-V--D-阿拉伯醇发酵--------+--蜜二糖发酵+V-V--+(+)-+-第九十五页,共一百九十四页,2022年,8月28日与其他产硫化氢的肠杆菌细菌鉴别种属赖氨酸脱羧酶阿拉伯糖迟钝爱德华菌+-沙门菌伤寒血清型++枸橼酸杆菌-+变性杆菌--第九十六页,共一百九十四页,2022年,8月28日第七节克雷伯菌属和柔特勒菌属第九十七页,共一百九十四页,2022年,8月28日原克雷伯菌属有5个种,2个亚种肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、解鸟氨酸克雷伯菌、植生克雷伯菌、土生克雷伯菌肺炎克雷伯菌臭鼻亚种、肺炎克雷伯菌鼻硬结亚种现克雷伯菌属仅有2个种,2个亚种肺炎克雷伯菌臭鼻亚种、肺炎克雷伯菌鼻硬结亚种肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、有3个种归属于柔特勒菌属解鸟氨酸柔特勒菌、植生柔特勒菌、土生柔特勒菌分类第九十八页,共一百九十四页,2022年,8月28日临床意义
肺炎克雷伯菌在临床标本中较常见,可引起典型的原发性肺炎,常见有肺炎、支气管炎、泌尿道和创伤感染,有时引起严重的败血症、脑膜炎、腹膜炎等肺炎克雷伯菌臭鼻亚种可引起萎缩性鼻炎(臭鼻症)和鼻粘膜的化脓性感染肺炎克雷伯菌鼻硬结亚种常引起呼吸道粘膜、口咽部、鼻和鼻旁窦的感染,导致肉芽肿性病变和硬结形成第九十九页,共一百九十四页,2022年,8月28日形态和培养特征形态:球杆菌排列:常端端成对排列特殊结构:无芽胞无荚膜无鞭毛肺炎克雷伯菌形态(革兰染色)第一百页,共一百九十四页,2022年,8月28日形态和培养特征血琼脂上菌落较大,呈黏液状,以接种环挑取时易拉成丝在肠道培养基上呈不发酵乳糖小菌落在液体培养基内生长混浊、浓厚、可见菌膜,管底有粘性沉淀物
肺炎克雷伯菌在血平板上的菌落第一百零一页,共一百九十四页,2022年,8月28日肺炎克雷伯菌丝状粘连(麦康凯平板)
第一百零二页,共一百九十四页,2022年,8月28日肺炎克雷伯菌在麦康凯平板上的菌落特第一百零三页,共一百九十四页,2022年,8月28日种属鉴定共同特征粘性菌落无动力赖氨酸(+)能发酵利用多种糖醇类物质对羧苄西林和氨苄西林天然耐药第一百零四页,共一百九十四页,2022年,8月28日细菌形态呈球杆状,有多形性;在普通平板和血平板上生长可形成典型的粘液性菌落,有拉丝现象;无动力。这些特征有助于初步鉴定。荚膜肿胀试验阳性有助于细菌鉴定。鉴定要点第一百零五页,共一百九十四页,2022年,8月28日两菌属之间生化反应特征相互交叉,属间鉴别需要通过温度生长试验和碳源同化试验。菌属间和菌种间的鉴定主要依据生化反应,可选择一组生化试验,进行查表鉴定(见表)。可使用商品化的细菌鉴定系统进行鉴定。应注意肺炎克雷伯菌臭鼻亚种和鼻硬结亚种生长缓慢,所有的商品化鉴定系统都很难正确鉴定。。鉴定要点第一百零六页,共一百九十四页,2022年,8月28日肺炎克雷伯菌和柔特勒菌种间鉴定表生化反应肺炎克雷伯菌产酸克雷伯菌解鸟氨酸柔特勒菌植生柔特勒菌肺炎克雷伯菌臭鼻亚种肺炎克雷伯菌鼻硬结亚种土生柔特勒菌脲酶++++---吲哚产生-++--(-)-鸟氨酸--+---(-)甲基红-(-)++++VV-P++V+--+丙二酸盐++++-++枸橼酸盐++++V-V第一百零七页,共一百九十四页,2022年,8月28日第八节肠杆菌属第一百零八页,共一百九十四页,2022年,8月28日分类:现有13个种2个生物型原有7个种2个生物型产气肠杆菌阴沟肠杆菌杰高维肠杆菌坂崎肠杆菌泰洛肠杆菌(重新命名为癌生肠杆菌)中间肠杆菌聚团肠杆菌(现已归属于多源菌属)河生肠杆菌生物群1、河生肠杆菌生物群2、后增加7个菌阿氏肠杆菌何氏肠杆菌溶解肠杆菌超压肠杆菌克沃尼肠杆菌考伯肠杆菌帕瑞勒肠杆菌
第一百零九页,共一百九十四页,2022年,8月28日临床意义
以阴沟肠杆菌和产气肠杆菌最常见一般引起肠道外感染,如泌尿道、呼吸道和伤口感染亦可引起菌血症和脑膜炎该菌属细菌在使用三代头孢菌素等抗生素治疗时,可以诱导产生持续高产的AmpC酶,应引起重视。第一百一十页,共一百九十四页,2022年,8月28日形态和培养特性形态:粗短杆菌特殊结构:有周身鞭毛无芽胞少数有荚膜阴沟肠杆菌形态(革兰染色)第一百一十一页,共一百九十四页,2022年,8月28日形态和培养特性营养要求不高血琼脂上形成大而湿润的粘液性菌落坂崎肠杆菌在肠道培养基上形成乳糖发酵型菌落阴沟肠杆菌在血平板上的菌落第一百一十二页,共一百九十四页,2022年,8月28日坂崎肠杆菌在麦康凯平板上的菌落第一百一十三页,共一百九十四页,2022年,8月28日阴沟肠杆菌在麦康凯平板上的菌落第一百一十四页,共一百九十四页,2022年,8月28日共同特征VP(+)枸橼酸盐(+)丙二酸盐(+)H2S(-)种属鉴定第一百一十五页,共一百九十四页,2022年,8月28日本菌属的细菌生化反应不典型,常用的商品化鉴定系统均很难达到90%以上的鉴定正确率。坂崎肠杆菌以及部分克沃尼肠杆菌和聚团多源菌菌株能产生黄色素,阴沟肠杆菌、产气肠杆菌对头孢菌素天然耐药,这些特性有助于细菌鉴别。肠杆菌属种间生化反应鉴定见表鉴定要点第一百一十六页,共一百九十四页,2022年,8月28日肠杆菌属种见鉴定表生化反应产气杰高维帕瑞勒聚团河生,生物群1癌生阪崎何氏阴沟克沃尼中间考伯阿氏河生,生物群2溶解超压赖氨酸脱羧酶+++-------------山梨醇+--V----++++++++VP试验++VV+++++++--+++七叶苷+++V+++-V++V++++蜜二糖++VV+-+-++++-+++蔗糖+++V+-++++V++-+-精氨酸脱氢酶-----++V+--+VV+-鸟氨酸脱羧酶+++-V++++-V+++++核糖醇+-------V-------鼠李糖+++V++++++++-+++α-甲基-D-葡萄糖苷+---V-+VV-++++++黄色素---V--+--V------第一百一十七页,共一百九十四页,2022年,8月28日第九节多源菌属第一百一十八页,共一百九十四页,2022年,8月28日多源菌属是1989年建立的一个新菌属目前这个菌属包括7个种仅聚团多源菌可以从人体标本中分离分类第一百一十九页,共一百九十四页,2022年,8月28日临床意义
本属细菌在自然环境中广泛存在,其中聚团多源菌是人类的条件致病菌,也是肠道正常菌群,能引起多种条件致病性感染,如引起早产儿、新生儿的感染,以及多发性创伤,应用免疫抑制剂患者的感染等第一百二十页,共一百九十四页,2022年,8月28日形态和培养特性形态:粗短杆菌特殊结构:有周身鞭毛无芽胞无荚膜聚团多源菌在血平板上的菌落第一百二十一页,共一百九十四页,2022年,8月28日形态和培养特性营养要求不高血平板:光滑、湿润、边缘整齐、灰白色的菌落普通营养平板:多数菌株产生黄色素肠道鉴别培养基:形成乳糖发酵或不发酵型菌落聚团多源菌在普通营养平板上的菌落第一百二十二页,共一百九十四页,2022年,8月28日种属鉴定多源菌属以前归属于肠杆菌属,在生化反应上与肠杆菌属的其他细菌难以区别,鉴定的关键试验为:鸟氨酸、赖氨酸脱羧酶和精氨酸双水解酶均为阴性。该种细菌生化反应很不规则,有较高的异质性,在DNA水平可以分为18个杂交群。大多数菌株能产生黄色素,有助于细菌鉴定。第一百二十三页,共一百九十四页,2022年,8月28日第十节哈夫尼亚菌属第一百二十四页,共一百九十四页,2022年,8月28日哈夫尼亚菌属只有一个种,称为蜂房哈夫尼亚菌分类第一百二十五页,共一百九十四页,2022年,8月28日该菌属医院感染机会致病菌,通常与呼吸道感染、泌尿道感染、菌血症、脑膜炎或伤口和脓肿的混合感染有关
临床意义第一百二十六页,共一百九十四页,2022年,8月28日形态和培养特性形态染色:革兰阴性杆菌,有周身鞭毛,能运动,无芽孢,无荚膜。培养特性:兼性厌氧生长,营养要求不高,在血琼脂和普通营养琼脂上形成光滑、湿润、边缘整齐、灰白色的菌落。在肠道鉴别培养基上形成乳糖不发酵型的菌落。第一百二十七页,共一百九十四页,2022年,8月28日蜂房哈夫尼菌在麦康凯平板上的菌落第一百二十八页,共一百九十四页,2022年,8月28日种属鉴定
生化反应特征H2S(-)鸟氨酸、赖氨酸脱羧酶(+)靛基质(-)尿素(-)氰化钾生长(+)第一百二十九页,共一百九十四页,2022年,8月28日第十一节沙雷菌属第一百三十页,共一百九十四页,2022年,8月28日粘质沙雷菌粘质沙雷菌生物群1液化沙雷菌深红沙雷菌、芳香沙雷菌生物群1芳香沙雷菌生物群2无花果沙雷菌虫媒沙雷菌,普利毛斯沙雷菌居泉沙雷菌等。分类(7个种和3个生物群)第一百三十一页,共一百九十四页,2022年,8月28日临床意义
近年来发现粘质沙雷菌可引起肺炎、泌尿道感染、败血症,以及外科术后感染;液化沙雷菌可引起泌尿道和伤口感染,芳香沙雷菌、无花果沙雷菌、深红沙雷菌等与呼吸道、伤口感染也有关。由于该菌属细菌在使用三代头孢菌素等抗生素治疗时,可以诱导产生持续高产的AmpC酶,表现为对多种抗生素耐药,应引起重视。第一百三十二页,共一百九十四页,2022年,8月28日形态和培养特性革兰阴性小杆菌周身鞭毛,有动力无芽胞,有的菌种有荚膜第一百三十三页,共一百九十四页,2022年,8月28日形态和培养特性营养要求不高普通琼脂上形成不透明,白色、红色、或粉红色菌落产生色素有两种:灵菌红素和吡羧酸在肠道培养基上形成乳糖发酵型和不发酵型菌落在液体培养基中生长呈均匀混浊,并有薄膜形成,产生色素的菌株表面呈红色环,底部有灰色颗粒沉淀。
粘质沙雷菌在普通营养平板上的菌落第一百三十四页,共一百九十四页,2022年,8月28日粘质沙雷菌部分不产色素的菌株在麦康凯平板上的菌落特征第一百三十五页,共一百九十四页,2022年,8月28日粘质沙雷菌产色素的菌株在麦康凯平板上的菌落
第一百三十六页,共一百九十四页,2022年,8月28日
种属鉴定可产生酯酶、明胶酶和DNA酶(居泉沙雷菌除外)能发酵甘露醇、甘露糖、海藻糖、麦芽糖等苯丙氨酸、尿素和硫化氢均为阴性第一百三十七页,共一百九十四页,2022年,8月28日该菌属中除液化沙雷菌群的群内鉴定以外,其他菌种均容易通过生化反应相鉴别,商品化的细菌鉴定系统有较高的鉴定正确率。液化沙雷菌群内鉴定要依靠碳源同化试验。粘质沙雷菌,普利毛斯沙雷菌和深红沙雷菌能产生红色色素,芳香沙雷菌有特殊芳香气味有助于细菌种间鉴别。种间鉴别见表鉴定要点第一百三十八页,共一百九十四页,2022年,8月28日沙雷菌种间鉴别生化反应粘质沙雷菌粘质生物群1虫媒沙雷菌液化沙雷菌生物群芳香生物群1居泉沙雷菌普利毛斯沙雷菌芳香生物群2无花果沙雷菌深红沙雷菌L-阿拉伯糖发酵---+++++++D-山梨糖醇发酵++-+++V++-鸟氨酸脱羧酶+V-+++----甲基红(-)+(-)++++VV(-)纤维二糖发酵----+-++++VP+V++V-(+)+v+D-阿拉伯醇发酵--V--+--+(+)赖氨酸脱羧酶+V-+++-+-V红色素VNA----+--+第一百三十九页,共一百九十四页,2022年,8月28日第十二节变形杆菌属第一百四十页,共一百九十四页,2022年,8月28日分类(4个种)普通变形杆菌奇异变形杆菌产粘变形杆菌潘氏变形杆菌第一百四十一页,共一百九十四页,2022年,8月28日临床意义
该菌是尿道感染的主要致病菌之一,也可能与肾结石和膀胱结石的形成有关。尿道感染易继发引起菌血症,还常引起伤口、呼吸道等多种感染,由变形杆菌造成的新生儿脐带感染可导致高度致死性菌血症和脑膜炎,奇异变形杆菌亦是婴儿肠炎的病原菌之一。第一百四十二页,共一百九十四页,2022年,8月28日形态和培养特性形态:杆状,有明显多形性,球状或丝状染色性:革兰染色阴性特殊结构:有周身鞭毛,无芽胞,无荚膜普通变形杆菌纯培养的镜下形态(革兰染色)第一百四十三页,共一百九十四页,2022年,8月28日形态和培养特性兼性厌氧营养要求不高在血平板和普通琼脂有迁徙生长现象产生色素有两种:灵菌红素和吡羧酸在肠道培养基上无迁徙生长现象,形成圆形、扁平、无色透明、不发酵乳糖的菌落在SS上菌落中心呈黑色普通变形杆菌迁徙生长现象
第一百四十四页,共一百九十四页,2022年,8月28日普通变形杆菌在麦康凯平板上的菌落第一百四十五页,共一百九十四页,2022年,8月28日种属鉴定
该属的主要特征是迁徙生长现象,能迅速分解尿素,苯丙氨酸阳性。第一百四十六页,共一百九十四页,2022年,8月28日符合肠杆菌科共同生化特征,在血平板和普通平板上有迁徙生长现象,即可鉴定为变形杆菌属。吲哚试验(+),对氨苄西林耐药的菌株可鉴定为普通变形杆菌吲哚试验(-)三个菌种(潘氏变形杆菌
、奇异变形杆菌和产粘变形杆菌)之间的鉴别可选用鸟氨酸脱羧酶、H2S和麦芽糖等3个试验。能产生硫化氢,在SS平板上形成黑色中心菌落。鉴定要点第一百四十七页,共一百九十四页,2022年,8月28日变形杆菌种间鉴定表生化反应奇异变形杆菌普通变形杆菌潘氏变形杆菌产粘变形杆菌吲哚-+--鸟氨酸脱羧酶+---V-PV--+第一百四十八页,共一百九十四页,2022年,8月28日与其他产硫化氢的肠杆菌细菌鉴别种属赖氨酸脱羧酶阿拉伯糖迟钝爱德华菌+-沙门菌伤寒血清型++枸橼酸杆菌-+变性杆菌--第一百四十九页,共一百九十四页,2022年,8月28日抗原构造
以O抗原最为重要,根据O抗原分群,再以鞭毛抗原分型,现至少有100多个血清型。外斐试验:普通变形杆菌的某些菌株(如X19、X2和Xk)含有的菌体O抗原,可与斑疹伤寒立克次体和恙虫病立克次体的部分抗原发生交叉反应,故可用以代替立克次体作为抗原与患者血清进行凝集反应,以辅助诊断有关的立克次体病。第一百五十页,共一百九十四页,2022年,8月28日第十三节普罗威登菌属第一百五十一页,共一百九十四页,2022年,8月28日分类:普罗威登菌属包括5个种
产碱普罗威登菌拉氏普罗威登菌斯氏普罗威登菌雷氏普罗威登菌海氏普罗威登菌
第一百五十二页,共一百九十四页,2022年,8月28日临床意义
本菌属有碱化尿液的作用,有可能促使尿中结晶形成,与泌尿系统结石的形成有关。雷氏普罗威登菌和斯氏普罗威登菌可致泌尿道感染和其他的肠道外感染,并可引起许多医院感染的暴发流行。产碱普罗威登菌可从粪便中分离第一百五十三页,共一百九十四页,2022年,8月28日形态特性革兰阴性杆菌有周身鞭毛无荚膜,无芽孢第一百五十四页,共一百九十四页,2022年,8月28日培养特性兼性厌氧营养要求不高在血平板和普通琼脂无迁徙生长现象在肠道培养基形成圆形、扁平、无色透明、不发酵乳糖的菌落雷氏普罗威登菌在麦康凯琼脂平板上的菌落特征第一百五十五页,共一百九十四页,2022年,8月28日种属鉴定
该菌属枸橼酸盐阳性,而尿素酶和鸟氨酸脱羧酶阴性第一百五十六页,共一百九十四页,2022年,8月28日与变形杆菌属、摩根菌属鉴别表生化反应变形杆菌属普罗威登菌属摩根菌属迁徙生长+--硫化氢+--枸橼酸盐V+-鸟氨酸脱羧酶V-+第一百五十七页,共一百九十四页,2022年,8月28日普罗威登菌属种间鉴定表生化反应雷氏普罗威登菌斯氏普罗威登菌产碱普罗威登菌拉氏普罗威登菌海氏普罗威登菌吲哚产生++++-肌醇++--V海藻糖-+---戊五醇+-+-+第一百五十八页,共一百九十四页,2022年,8月28日第十四节摩根菌属第一百五十九页,共一百九十四页,2022年,8月28日分类摩根菌属只有摩氏摩根菌一个种,可分为摩氏摩根菌摩根亚种,摩氏摩根菌生物群1,摩氏摩根菌塞氏亚种第一百六十页,共一百九十四页,2022年,8月28日临床意义
该菌属可引起呼吸道、泌尿道和伤口等感染,也与败血症和腹泻有关,为医院感染的重要致病菌之一。第一百六十一页,共一百九十四页,2022年,8月28日形态和培养特性形态染色革兰阴性杆菌,有周鞭毛。培养特性血琼脂平板上:形成中等大小,圆形、凸起、光滑、湿润、灰白色的菌落,有些菌株可有溶血;肠道鉴别培养基上:可形成不发酵乳糖的菌落在1%的低浓度琼脂培养基上:可扩展生长。
第一百六十二页,共一百九十四页,2022年,8月28日摩氏摩根菌在麦康凯平板上的菌落第一百六十三页,共一百九十四页,2022年,8月28日
种属鉴定生化反应不活泼,除发酵葡萄糖和甘露糖产酸以外,不发酵其他糖醇类物质苯丙氨酸脱氨酶(+)脲酶(+)
第一百六十四页,共一百九十四页,2022年,8月28日摩根菌属种间鉴别生化反应摩氏摩根菌摩根亚种摩氏摩根菌生物群1摩氏摩根菌赛氏亚种海藻糖--+赖氨酸脱羧酶-+V第一百六十五页,共一百九十四页,2022年,8月28日与变形杆菌属、普罗威登菌属鉴别生化反应变形杆菌属普罗威登菌属摩根菌属迁徙生长+--硫化氢+--枸橼酸盐V+-鸟氨酸脱羧酶V-+第一百六十六页,共一百九十四页,2022年,8月28日第十五节邻单胞菌属第一百六十七页,共一百九十四页,2022年,8月28日分类邻单胞菌属只有一个菌种,即类志贺邻单胞菌,该菌属以前归属于弧菌科,后根据基因特征认为与肠杆菌科细菌有更密切的关系,而归属于肠杆菌科。第一百六十八页,共一百九十四页,2022年,8月28日临床意义
该菌可导致肠胃炎,好发于夏季通常为散发流行,临床症状是短时间的水样泻或痢疾样腹泻。病人有进食生水或海产品史,肠道外感染在机体抵抗力下降的人群发生,可引起菌血症、脑膜炎。第一百六十九页,共一百九十四页,2022年,8月28日形态和培养特性
形态染色革兰阴性直杆菌,可成双或短链状排列,有2~5根端极丛鞭毛,有动力,无荚膜,无芽胞。培养特性在血琼脂平板中生长良好,可形成灰色平滑,不透明菌落,无溶血现象。在肠道鉴别培养基上可形成无色的不发酵乳糖的菌落第一百七十页,共一百九十四页,2022年,8月28日类志贺邻单胞菌在麦康凯平板上的菌落第一百七十一页,共一百九十四页,2022年,8月28日与肠杆菌科其他菌属的区别:氧化酶试验(+)。与气单胞菌属的鉴别为:O/129敏感,鸟氨酸脱羧酶(+),纤维二糖(+)。与弧菌属的鉴别为:不能在TCBS平板生长,可以在不含盐胨水中生长。种属鉴定第一百七十二页,共一百九十四页,2022年,8月28日类志贺邻单胞菌
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