标准解读

《GB/T 38133-2019 转基因苜蓿实时荧光PCR检测方法》是一项国家标准，专门针对转基因苜蓿的检测制定。该标准规定了使用实时荧光定量聚合酶链反应（Real-time PCR）技术来定性和定量分析转基因苜蓿的方法。它适用于转基因苜蓿及其制品中特定目标序列的存在与否及含量测定。

根据此标准，首先需要准备样品DNA提取，采用适合于植物材料的标准程序从待测样本中分离出高质量的DNA。随后，通过设计特异性引物和探针来进行目标序列的扩增与识别。这些引物和探针应能够准确地靶向所关注的转基因成分，并且具有高度的特异性和灵敏度以确保结果的准确性。

在实际操作过程中，将含有目标DNA片段的样品加入到含有适当浓度的dNTPs、Taq DNA聚合酶等反应体系中，在热循环仪上按照设定好的温度曲线进行多次循环扩增。每次循环后都会产生新的双链DNA分子，从而实现目标序列的数量级增长。同时，由于采用了荧光标记技术，可以在每次循环结束时通过监测荧光信号强度变化来间接反映产物累积情况，进而实现对起始模板量的精确定量。

整个过程还需要设立阳性对照、阴性对照以及内参基因等多个控制组别，以确保实验的有效性和可靠性。此外，对于不同批次之间的结果比较，还需注意标准化处理，比如采用相同的标准品作为参考物质，保证数据间的一致性和可比性。

该标准还详细列出了实验所需的具体条件参数设置、仪器设备要求以及质量控制措施等内容，为实验室开展相关检测工作提供了全面指导。


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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2019-10-18 颁布
  • 2019-10-18 实施
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GB/T 38133-2019转基因苜蓿实时荧光PCR检测方法_第1页
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文档简介

ICS07080

A40.

中华人民共和国国家标准

GB/T38133—2019

转基因苜蓿实时荧光PCR检测方法

Geneticallymodifiedalfalfadetectionmethodbyreal-timePCR

2019-10-18发布2019-10-18实施

国家市场监督管理总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T38133—2019

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由全国生化检测标准化技术委员会提出并归口

(SAC/TC387)。

本标准起草单位中国检验检疫科学研究院广州海关技术中心广西出入境检验检疫局检验检疫

:、、

技术中心辽宁出入境检验检疫局检验检疫技术中心

、。

本标准主要起草人付伟朱鹏宇刘津魏霜杜智欣王晨光朱水芳黄文胜郑秋月曹际娟

:、、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T38133—2019

转基因苜蓿实时荧光PCR检测方法

1范围

本标准规定了苜蓿转基因成分的实时荧光聚合酶链式反应定性检测方法

(PCR)。

本标准适用于种子饲料中的转基因苜蓿以及品系的实时荧光方法检测

、J101、J163KK179PCR。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

转基因产品检测通用要求和定义

GB/T19495.1

转基因产品检测实验室技术要求

GB/T19495.2

转基因产品检测核酸提取纯化方法

GB/T19495.3

转基因产品检测抽样和制样方法

GB/T19495.7

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件

。

31

.

ACC基因acetylCoAcarboxylase

编码乙酰辅酶羧化酶的基因

A。

注在本标准中作为苜蓿的内标准基因

:。

32

.

18S核糖体RNA18SrRNA

编码真核生物核糖体的基因

18SRNA。

注1在本标准中作为苜蓿的内标准基因

:。

注2实际检测中和选择一种使用即可

:,3.13.2。

33

.

FMV35S启动子35SpromoterfromamodifiedFigwortmosaicvirus

编码玄参花叶病毒的启动子的基因

35S。

注在本标准中作为转基因苜蓿和的启动子

:J101J163。

34

.

E9终止子3'terminationregionfrompearibulose15-bisphosphatecarboxylase

,

来源于源自豌豆核酮糖二磷酸羧化酶小亚基RbcSE9基因的非翻译区存在于转基因苜

-1,5-()3',

蓿与品系中

J101J163。

35

.

CP4-EPSPS基因5-enolpyruvylshikimate-3-phosphatesynthasegene

源自AgrobacteriumCP4菌株用于编码莽草酸途径中的关键酶的基因存在于转基因苜蓿

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