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文档简介

MolecularBiology嘎嘎嘎!!!peptidechainsynthesisinEukaryotes

真核生物肽链的合成Author:沈海聪

peptidechainsynthesisinEukaryotes

TheprocessofpeptidechainsynthesisinEukaryotesissimilartothatinPhykayotes. Thelargestdifferencesaretheformationoftranslationinitiationcomplexaswellasthevarietyandnumberofproteinfactorssupposedtobeused(一)真核生物蛋白质的合成起始1、primaryelementsneeded:mRNA:单顺反子、m7Gppp和poly(A)核糖体:40S小亚基+60S大亚基=80S“活化”的起始tRNA:Met-tRNAiMet翻译起始因子(Initiationfactor,IF):种类多其他:GTP、Mg2+

Attention:真核生物中与Met结合的两种tRNAMet-tRNAimet:具有起始功能,结合甲硫氨酸并就位于起始密码子AUG处,参与形成翻译的起始复合物Met-tRNAmet:参与肽链延长,它与甲硫氨酸结合,必要时进入核糖体,为延长中的肽链添加甲硫氨酸起始因子的种类和功能2、真核生物翻译起始复合物形成过程核糖体大、小亚基分离;起始Met-tRNAiMet(即甲硫氨酰tRNA)与小亚基结合;mRNA与核糖体小亚基结合;小亚基沿mRNA链向3´的方向扫描,定位起始密码子AUG;核糖体大亚基结合。40S核糖体小亚基与起始因子eIF-3相结合,使得核糖体大小亚基分离;eIF-1进入A位;在eIF-5-GTP和eIF-2-GTP的帮助下,起始Met-tRNAiMet与40S小亚基相结合,形成43S前起始复合物;eIF-4Fcomplex结合在mRNA的5´-UTR;其中eIF-4E与“帽子”结构结合,eIF-4G可与eIF-4E及PBP(polyAbindingprotein)结合,eIF-4A有解旋酶活性;mRNA闭环翻译模型PAB,polyAbindingproteineIF-4B与eIF-4F结合,激活eIF-4A解旋酶活性,去除5´-UT二级结构;43S前起始复合物与mRNA结合;eIF-4FcomplexeIF-4B43S前起始复合物沿mRNA向3´端扫描移动并识别起始密码子AUG;AUGeIF2水解ATP,使eIF3和它自己离开复合物;大小亚基结合;eIF5B水解ATP,释放其他起始因子,形成80S翻译起始复合体。3、真、原核生物翻译起始的区别真核生物:40S小亚基首先与Met-tRNAiMet相结合,再与模板mRNA结合,最后与60S大亚基结合生成80S起始复合物。原核生物:30S小亚基首先与mRNA模板相结合,再与fMet-tRNAfMet(N-甲酰甲硫氨酰-tRNA)结合,最后与50S大亚基结合,形成70S起始复合物。(二)肽链的延伸真核生物肽链合成的延长过程与原核基本相似,都包含进位、转位和移位等三个步骤。整个延伸过程除延伸因子种类不同外,真核细胞核糖体没有E位,转位时空载tRNA直接从P位脱落。真核生物延伸因子:EF-1和EF-2原核生物延伸因子:EF-T(EF-Tu,EF-Ts)、EF-GEF-1:含α,β和γ等3个亚基,α和β(EF-1A)的功能与EF-Tu相似,γ(EF-1B)的功能与EF-Ts相似。即与EF-T相似EF-2:功能与原核生物EF-G相似(三)肽链的终止真核生物肽链合成的终止过程除释放因子不同外,其他与原核基本一致。真核生物释放因子:eRF原核生物释放因子:RF1、RF2、RF3eRF:一方面可识别UAA、UGA和UAG等所有终止密码子,另一方面可催化延伸复合物解体。AP40S

5’mRNAFreetRNAPolypeptideReleasefactorRibosomalSubunitseRFGTPANIMATION多聚核糖体(polyribosomes)在多肽合成过程中,同一条mRNA分子能够同多个核糖体结合,同时合成若干条多肽链,结合在同一条mRNA上的核糖体就称为多聚核糖体。----使蛋白质合成高速、高效进行。电镜下的观察到的多肽合成过程在多肽合成过程中,当第一个核糖体离开起始密码子后

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