标准解读

《GB/T 35904-2018 旋毛虫实时荧光PCR检测方法》是一项国家标准，旨在为旋毛虫的检测提供一种基于实时荧光PCR技术的方法。该标准详细规定了从样品采集到结果分析的具体步骤和技术要求，适用于肉类及肉制品中旋毛虫（Trichinella spiralis）核酸的定性检测。

首先，在样品处理部分，标准明确了不同类型样本（如肌肉组织）的采集方式、保存条件以及如何进行前处理以提取DNA。这一步骤对于保证后续实验的有效性和准确性至关重要。

接着，关于引物和探针的设计，文件给出了针对旋毛虫特定基因序列的选择指南，并强调了其特异性与灵敏度的重要性。正确设计并选择高效的引物对是实现准确扩增的前提。

然后，在反应体系构建方面，《GB/T 35904-2018》提供了详细的配方指导，包括各种试剂的比例及其加入顺序等信息。同时，还指出了使用合适仪器设备的重要性，并列举了几种推荐型号。

此外，标准还介绍了如何设置循环参数来优化PCR扩增过程，以及通过观察荧光信号变化来进行数据分析的方法。通过对Ct值的测定可以判断样品中是否存在目标DNA片段。

最后，文件强调了质量控制措施的应用，比如设立阳性对照、阴性对照及内参对照等，以确保整个检测流程的可靠性和重复性。同时，也提到了实验室间比对实验的重要性，用以验证不同实验室之间结果的一致性。

该标准为旋毛虫的快速、准确检测提供了科学依据和技术支持，有助于提高食品安全水平，保护消费者健康。


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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2018-02-06 颁布
  • 2018-09-01 实施
©正版授权
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文档简介

ICS11220

B41.

中华人民共和国国家标准

GB/T35904—2018

旋毛虫实时荧光PCR检测方法

Real-timePCRmethodfordetectionofTrichinellaspiralis

2018-02-06发布2018-09-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T35904—2018

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由中华人民共和国农业部提出

。

本标准由全国动物卫生标准化技术委员会归口

(SAC/TC181)。

本标准起草单位东北农业大学中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫局

:、。

本标准主要起草人宋铭忻张子群李雅丽韩彩霞王海燕李巍李晓云路义鑫

:、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T35904—2018

旋毛虫实时荧光PCR检测方法

1范围

本标准规定了旋毛虫实时荧光检测的操作方法

PCR。

本标准适用于家猪野猪和犬等动物的旋毛虫核酸检测

、。

2规范应引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

3仪器

31荧光仪

.PCR。

32高速冷冻离心机

.。

33生物安全柜

.。

34高压灭菌锅

.。

35天平精密度达以上

.:0.01g。

36组织匀浆机

.。

37冰箱

.。

38涡旋混合器

.。

39研钵

.。

310无菌离心管

.。

311微量移液器

.。

4试剂

41缓冲液无2+酶2+等所有试剂均为生物试剂公司生产

.10×PCRBuffer(Mg)、rTaq、dNTP、Mg,。

42本方法试验用水符合规定的一级水

.GB/T6682。

5对照样品

51阳性对照样品

.

含有条以上的国际标准种Trichinellaspiralis或Trichinellanativa旋毛虫的大鼠

5/g(T1)(T2)

肉样

。

52阴性对照样品

.

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