标准解读

《GB/T 34796-2017 水溶液中核酸的浓度和纯度检测 紫外分光光度法》是一项国家标准，该标准规定了使用紫外分光光度计测定水溶液中脱氧核糖核酸（DNA）或核糖核酸（RNA）浓度与纯度的方法。此方法基于核酸在特定波长下的吸收特性来评估其浓度及纯度。

标准首先介绍了适用范围，适用于各种类型的核酸样品，包括但不限于基因组DNA、质粒DNA、总RNA等，在生物医学研究、分子生物学实验等领域具有广泛应用价值。接着详细描述了所需仪器设备及其技术参数要求，如紫外可见分光光度计应具备良好的线性响应范围、低噪声水平等特性；同时明确了试剂的选择与配制方法，比如TE缓冲液作为溶解介质时的具体成分比例。

对于实际操作流程，《GB/T 34796-2017》给出了详细的步骤指导，包括样品准备、空白对照设置、测量条件设定等方面内容，并强调了每一步骤中的关键点。例如，在进行核酸溶液吸光值读取之前，需确保比色皿内外清洁无污染，且每次更换样品后都应用去离子水彻底冲洗比色皿再用待测样本润洗三次以上以减少交叉污染的可能性。


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....

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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2017-11-01 颁布
  • 2018-05-01 实施
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GB/T 34796-2017水溶液中核酸的浓度和纯度检测紫外分光光度法_第1页
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文档简介

ICS07080

A40.

中华人民共和国国家标准

GB/T34796—2017

水溶液中核酸的浓度和纯度

检测紫外分光光度法

Quantificationandpurityanalysisofnucleicacidconcentrationin

solution—Ultravioletspectrophotometry

2017-11-01发布2018-05-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T34796—2017

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由全国生化检测标准化技术委员会提出并归口

(SAC/TC387)。

本标准起草单位中国测试技术研究院生物研究所上海市计量测试技术研究院中国测试技术研

:、、

究院四川中测生物科技有限公司

、。

本标准主要起草人谭和平周李华许丽刘刚马丽侠李妍叶德萍梁文王智丁敏孙登峰

:、、、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T34796—2017

水溶液中核酸的浓度和纯度

检测紫外分光光度法

1范围

本标准规定了使用紫外分光光度法检测水溶液中核酸的浓度和纯度的原理样品制备及检测方法

、。

本标准适用于水溶液中核酸的浓度和纯度检测可对浓度在及以上的水溶液核酸样品定

,5ng/μL

量检测和纯度分析

。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

实验室计

GB/T11165pH

双光束紫外可见分光光度计

GB/T26813

移液器检定规程

JJG646

3缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

脱氧核糖核酸

DNA:(deoxyribonucleicacid)

核糖核酸

RNA:(ribonucleicacid)

4原理

核酸中嘌呤和嘧啶碱基有共轭双键具有吸收紫外光的性质其最大吸收值在波长为

,,250nm~

之间碱基与戊糖磷酸形成核苷酸后其最大吸收峰不会改变最大吸收波长约吸收

270nm。、,260nm,

低峰在在波长处单位值的光密度相当于双链浓度为单链

230nm。260nm,1ODDNA50μg/mL、

及为单链寡核苷酸为利用此量和浓度关系可用于计算核酸样品

DNARNA40μg/mL、33μg/mL,,

的浓度

。

5试剂和材料

除非另有规定本方法所用试剂均为分析纯水为规定的一级水

,,GB/T6682。

51DNA标准溶液

.

小牛胸腺标准溶液

DNA。

52三羟甲基氨基甲烷缓冲液1mol/LTris-HClpH74

.(,.)

称取置于烧杯中加入去离子水充分搅拌溶解用

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