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文档简介
细菌感染的检测方法与防治原则第13章1、掌握细菌学诊断标本的采集与运送2、熟悉细菌感染的防治原则3、熟悉人工自动免疫、人工被动免疫的区别4、熟悉死疫苗和活疫苗的区别5、了解抗菌药物的作用和耐药机制,细菌耐药性的防治原则6、了解细菌学诊断标本的基本检验过程,常用细菌学检查的方法学习要求细菌感染检查目的明确病因指导临床治疗为预防和监测感染性疾病提供依据细菌检查方法根据患者临床症状采集适宜标本→对标本中病原菌进行分离培养→对可疑菌落进行细菌学形态学、生化试验(代谢产物物质)、血清学检查一、细菌标本的采集和运送正确取材根据细菌感染部位及病程采集适宜的标本采集病变明显的部位无菌操作在用抗菌药物之前采集尽快送验2H内病原菌的检查程序药物敏感试验标本直接涂片镜检分离培养形态特征生化试验血清学试验动物试验明确诊断
初步鉴定分子生物学技术(核酸杂交、聚合酶链反应(PCR)其他检测技术形态学检验凡是形态和染色性具有明显特征的细菌,可以直接涂片镜检,作出初步鉴定不染色观察:直接观察适用于具有形态和染色性上具有特征的病原菌,如脑膜炎奈瑟菌G-肾形双球菌、抗酸染色阳性的结核杆菌直接涂片镜检结核杆菌染色观察革兰染色法:1884年丹麦科学家Gram创建抗酸染色法:1882年由埃利希首创用复红初染色,用乙醇脱色,再用美蓝复染色,分枝杆菌仍然为红色,而其他细菌及背景中的物质为兰色。分枝杆菌为红色革兰染色意义鉴别细菌:分成G+菌和G-菌选择药物:G+菌和G-菌对抗菌药物敏感性不一样。与致病性有关:G+菌产生外毒素,G-菌产生内毒素分离培养大多数细菌的形态与染色性并无显著特征,因此需要分离培养后获得纯种菌。如肠道杆菌均为G-杆菌,菌落形态亦相同细菌的分离培养分离培养是利用培养基进行培养,使细菌能分散生长出成单个菌落。各种培养基分离培养分离培养出菌落,还需要用以下方法作进一步的细菌鉴定,才能检测细菌种的特性、对药物的敏感性等。观察菌落特征:化脓性链球菌—小而透明、溶血环观察细菌染色特征做细菌生化试验做细菌血清学试验动物试验药物敏感试验(AST)血清学试验原理用已知抗原或抗体检测患者体液中未知的抗原或抗体。血清学鉴定用已知特异性抗体检测患者体液中未知的细菌抗原(O抗原、H抗体等)血清学诊断用已知的细菌抗原检测患者血清中的抗体及其效价的动态变化,可作为某些传染病的辅助诊断血清学试验种类凝集试验、中和试验、免疫荧光法、酶联免疫吸附试验等标本双份血清标本,恢复期血清抗体效价比急性期升高≥4倍者才有意义。单份血清效价超过一定标准才有诊断意义第2节细菌感染的防治原则特异性防治人工主动免疫人工被动免疫非特异性防治应用抗菌素治疗等人工主动免疫将疫苗或类毒素接种于人体,使机体获得免疫力的一种防治细菌感染的方法主要疫苗有死疫苗选用免疫原性强的细菌,经人工培养后,用理化方法杀死而成。如伤寒、霍乱、狂犬病疫苗活疫苗用减毒或无毒力的活菌制成。如天花、脊髓灰质炎减毒活疫苗区别点死疫苗活疫苗制剂特点死,强毒株活,减毒株接种剂量与特点量较大,2~3次量较小,1次保存及有效期易保存,约1年不易保存,4℃数周免疫效果较低,维持数月~2年较高,维持3~5年甚至更长人工主动免疫类毒素利用某些细菌的外毒素用甲醛等处理后,使其失去毒性但仍保留抗原性的生物制品,如白、百、破三联疫苗,可同时预防三种疾病人工被动免疫采用人工方式向机体注射含有他人或动物产生的免疫血清或免疫球蛋白抗体等免疫制剂,使机体立刻获得免疫力主要生物制品抗毒素主要用于治疗或紧急预防细菌外毒素引起的疾病,如破伤风抗毒素等抗菌血清现已少用胎盘球蛋白和丙种球蛋白内含多价抗体,可抗多种病原体及其毒素,可作为麻疹、甲肝等病的治疗或紧急预防区别要点人工主动免疫人工被动免疫免疫物质抗原抗体或细胞因子等免疫出现时间慢,2~4周快,立即免疫维持时间长,数年~数月短,2~3周主要用途预防治疗或紧急预防人工主动免疫与人工被动免疫比较细菌感染的抗菌药物治疗抗菌药物一般是指具有杀菌或抑菌活性的药物可由细菌、放线菌、真菌等微生物经培养而得到,或用化学半合成法制造的相同或类似的物质,也可化学全合成细菌感染的抗菌药物治疗(一)抗菌药物的种类ß-内酰胺类:青霉素、头胞菌素大环内酯类:红霉素、阿奇霉素、罗红霉素氨基糖苷类:链、庆大、卡那霉素四环类:四环素氯霉素人工合成:喹诺酮类、磺胺类其他抗生素:糖肽类包括万古霉素和替考拉宁(二)抗菌药物的作用机制影响细菌细胞壁的合成:青霉素损伤细胞膜的结构:多黏菌素、两性霉素B影响蛋白质的合成链、新、卡那、庆大(作用于30S亚基)氯、林可、红(作用于50S亚基)抑制核酸的合成:喹诺酮类、磺胺类(三)选择抗菌药物治疗的基本原则1、确定用药指征(细菌培养)2、根据药代动力学选择药物(抑菌浓度、避免毒副作用)3、根据个体因素选择药物(免疫状态、感染情况、过敏史、遗传、年龄等)(四)细菌的耐药性指细菌对药物所具有的相对抵抗性。耐药性的程度:该药对细菌的最小抑菌浓度(MIC)表示。如果此种药物的治疗浓度大于MIC为敏感,反之为耐药。耐药性的逐渐增加是影响疗效的严重问题!超级病菌加拿大医学会杂志上公布了一份研究报告。一种普通的肠道细菌——难辨梭状芽孢杆菌历经两年变异,已成为致命的“超级病菌”,可引起65岁以上老年人和服用抗生素的病人产生严重痢疾,并最终致死。从2003年年初至今,已使这家医院的100名病人死亡。超级病菌截至上世纪末,全世界每年死于细菌性感染的人数已达到2000万,这是40年前的3倍。造成病死率升高的主要原因是耐药菌,由于抗菌药无法控制耐药菌引起的感染,最终导致病人死亡。(四)细菌的耐药机制1、天然固有的耐药性2、染色体突变获得耐药性3、质粒介导的耐药性(五)防止细菌产生耐药性的基本措施1、选用抗菌作用强,窄谱抗菌药物2、足剂量、足疗程,减少耐药变异菌株的
产生3、联合用药4、慎重进行预防性用药5、对已知耐药菌感染患者采取隔离措施6、加强抗菌药物规范化管理(六)抗菌药物敏感试验(AST)在体外测定抗菌药物抑制或杀死细菌能力的试验。用途1、指导临床合理用药:旨在了解病原微生物对各种抗生素的敏感(或耐受)程度,以指导临床合理选用抗生素药物2、监测细菌耐药性变异情况,控制耐药性的发生和发展(六)抗菌药物敏感试验(AST)方法其大致方法是:从病人的感染部位采取含致病菌的标本,接种在适当的培养基上,于一定条件下培养;同时将分别沾有一定量各种抗生素的纸片贴在培养基表面,培养一定时间后观察结果。由于致病菌对各种抗生素的敏感程度不同,在药物纸片周围便出现不同
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