标准解读

《GB/T 34756-2017 猪轮状病毒病 病毒RT-PCR检测方法》是一项国家标准，旨在提供一种通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术来检测猪轮状病毒的方法。该标准适用于猪只及其相关样品中猪轮状病毒核酸的定性检测。

根据文件内容，首先定义了术语和缩略语，明确了“猪轮状病毒”、“逆转录聚合酶链反应”等专业词汇的具体含义。接着，详细描述了进行RT-PCR检测所需的主要试剂与材料，包括但不限于引物、探针、逆转录酶、DNA聚合酶以及其他必要的化学试剂，并对这些物质的质量要求进行了规定。

标准还列举了实验操作步骤，从样本采集到RNA提取，再到cDNA合成及后续PCR扩增过程都有明确指导。其中特别强调了实验室安全防护措施的重要性以及避免交叉污染的技术手段。此外，对于如何设置阳性对照、阴性对照以确保实验结果准确性也有具体说明。


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....

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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2017-11-01 颁布
  • 2018-05-01 实施
©正版授权
GB/T 34756-2017猪轮状病毒病病毒RT-PCR检测方法_第1页
GB/T 34756-2017猪轮状病毒病病毒RT-PCR检测方法_第2页
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文档简介

ICS11220

B41.

中华人民共和国国家标准

GB/T34756—2017

猪轮状病毒病病毒RT-PCR检测方法

Porcinerotavirusdisease—RT-PCRfordetectingvirusacid

2017-11-01发布2018-05-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

中华人民共和国

国家标准

猪轮状病毒病病毒RT-PCR检测方法

GB/T34756—2017

*

中国标准出版社出版发行

北京市朝阳区和平里西街甲号

2(100029)

北京市西城区三里河北街号

16(100045)

网址

:

服务热线

:400-168-0010

年月第一版

201711

*

书号

:155066·1-57537

版权专有侵权必究

GB/T34756—2017

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由中华人民共和国农业部提出

。

本标准由全国动物卫生标准化技术委员会归口

(SAT/TC181)。

本标准起草单位东北农业大学中国动物卫生与流行病学中心河南牧业经济学院

:、、。

本标准起草人乔薪瑗邵卫星魏荣崔文唐丽杰李一经姜艳平孙映雪李卫华徐耀辉

:、、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T34756—2017

猪轮状病毒病病毒RT-PCR检测方法

1范围

本标准规定了猪轮状病毒检测方法的试剂仪器设备操作程序

RT-PCR、、。

本标准适用于猪临床样品新鲜粪便和小肠及细胞培养物中猪轮状病毒核酸的检测

()。

2缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

鸟类病毒反转录酶

AMV:RNA(avianmyeloblastosisvirus)

碱基对

bp:(basepair)

焦碳酸二乙酯

DEPC:(diethypyrocarbonate)

脱氧核糖核酸

DNA:(deoxyribonucleicacid)

脱氧核糖核苷三磷酸

dNTPs:(deoxyribonucleosidetriphosphates)

磷酸盐缓冲液

PBS:(phosphate-bufferedsalinebuffer)

聚合酶链式反应

PCR:(polymerasechainreaction)

核糖核酸

RNA:(ribonucleicacid)

酶抑制剂

RRI:RNA(RNaseribonucleaseinhibitor)

反转录

RT:(reversetranscriptase)

反转录聚合酶链式反应

RT-PCR:-(reversetranscriptase-polymerasechainreaction)

Taq酶Taq聚合酶Taq

:DNA(DNApolymerase)

3试剂

除另有规定外所用试剂应为分析纯提取病毒所用试剂应使用无酶的容器进行

,。RNARNA

分装

。

31氯仿常温保存

.:。

32异丙醇

.。

33乙醇

.75%。

34二乙基焦磷酰胺

.(DEPC)。

35Taq酶

.。

36

.AMV。

37分子量标准

.DNA(DL2000bp)。

38电泳缓冲液配制见

.(TAE)(A.1)。

39琼脂糖配制见

.1.5%(A.3)。

310猪轮状病毒阳性样品及阴性样品

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