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第2课时基因工程的原理和技术1.判断正误(1)若目的基因的碱基序列未知,可用化学合成法合成目的基因。(×)(2)利用PCR扩增目的基因时,需要已有的目的基因做模板。(√)(3)构建重组DNA时需要用的工具酶有:限制性核酸内切酶、DNA连接酶、质粒。(×)(4)可用质粒上的标记基因筛选导入重组DNA的受体细胞。(√)2.要使目的基因与对应的载体重组,所需的两种酶是()①限制性核酸内切酶②DNA连接酶③解旋酶④还原酶A.①②B.③④C.①④D.②③解析目的基因与对应的载体重组时,首先需要用同一种限制性核酸内切酶,切割出相同的末端,再依靠DNA连接酶对目的基因和载体进行“缝合”形成重组DNA分子。答案A3.将目的基因导入微生物细胞之前,要给予一定处理和适宜件,下列叙述错误的是()A.CaCl2处理 B.酒精处理C.温度、pH影响导入 D.增加细胞壁通透性解析将目的基因导入微生物细胞之前,要用氯化钙(CaCl2)处理微生物,增加其细胞壁的通透性,当然也受温度和pH影响,而酒精对细胞则有毒害作用。答案B4.如图为用于基因工程的一个质粒示意图。用EcoRⅠ限制性核酸内切酶切割目的基因和该质粒,再用DNA连接酶连接形成重组质粒,然后导入大肠杆菌,最后将大肠杆菌放在四种培养基中培养:a—无抗生素的培养基,b—含四环素的培养基,c—含氨苄青霉素的培养基,d—含四环素和氨苄青霉素的培养基。含重组质粒的大肠杆菌能生长的是()A.aB.a和cC.a和bD.b和c解析据图,EcoRⅠ限制性核酸内切酶的切点位于四环素抗性基因的内部,用该酶切割质粒则会损坏四环素抗性基因的结构,从而导致含有重组质粒的大肠杆菌不具有四环素抗性。答案B5.在培育转基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答:(1)A过程需要的酶有________________________________________________________________。(2)B过程及其结果体现了质粒作为载体必须具备的两个条件是________________________________________________________。(3)C过程的培养基中除含有必要营养物质、琼脂和激素外,还必须加入______________________________________________________。(4)在D过程中,抗虫基因遗传信息的传递过程是_________________________________________________________________。解析(1)将目的基因和质粒结合形成重组质粒的过程需要用同一种限制性核酸内切酶,连接时还需要DNA连接酶。(2)作为基因工程的载体,必须具备三个条件:①在宿主细胞中能稳定保存并能大量复制;②有多个限制性核酸内切酶切点,而且每种酶的切点最好只有一个;③有一定的标记基因,便于筛选。题目中能体现的是①③。(3)由题可知,我们需要的植株是含有抗虫基因的植株,因此要进行筛选,含有抗虫基因的植株也一定含有卡那霉素抗性基因,所以要利用卡那霉素进行筛选。(4)抗虫基因最终要表现出抗虫的性状就必须表达,即通过转录和翻译来实现。
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