标准解读

《GB/T 34728-2017 无乳支原体PCR检测方法》是一项国家标准，旨在规范无乳支原体（Mycoplasma agalactiae）的聚合酶链反应(PCR)检测技术。该标准详细规定了从样本采集到结果分析的一系列步骤和技术要求，适用于动物源性材料中无乳支原体DNA的定性检测。

首先，在采样方面，标准指出了不同类型的样品应该如何正确地收集与保存，确保所取得的样本能够准确反映被检测对象的真实情况。对于液体样本如血液或奶液，推荐使用无菌容器直接采集；而对于固体组织，则需先进行适当的处理后再取样。所有样本均应在低温条件下尽快送至实验室，并按照特定条件储存以防止目标DNA降解。

接着是核酸提取环节，这是整个PCR检测流程中的关键步骤之一。标准提供了多种有效的DNA提取方法供选择，包括但不限于酚/氯仿抽提法、硅胶膜吸附法等。无论采用哪种方式，最终目的都是要获得高纯度且足够用于后续扩增实验的模板DNA。

然后进入PCR扩增阶段。根据《GB/T 34728-2017》，应选用特异性引物针对无乳支原体特有的基因序列进行扩增。此外，还对反应体系组成、循环参数设置等方面给出了具体指导，确保实验过程可控且结果可靠。

最后，在结果判定上，《GB/T 34728-2017》明确了阳性对照和阴性对照的重要性，通过比较待测样品与这些对照之间的电泳条带差异来确定是否存在目标病原体。同时，也强调了重复性和再现性的要求，保证每次检测都能得到一致的结果。


如需获取更多详尽信息，请直接参考下方经官方授权发布的权威标准文档。

....

查看全部

  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2017-11-01 颁布
  • 2018-05-01 实施
©正版授权
GB/T 34728-2017无乳支原体PCR检测方法_第1页
GB/T 34728-2017无乳支原体PCR检测方法_第2页
GB/T 34728-2017无乳支原体PCR检测方法_第3页
免费预览已结束，剩余9页可下载查看

下载本文档

GB/T 34728-2017无乳支原体PCR检测方法-免费下载试读页

文档简介

ICS11220

B41.

中华人民共和国国家标准

GB/T34728—2017

无乳支原体PCR检测方法

PCRforMycoplasmaagalactiae

2017-11-01发布2018-05-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T34728—2017

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由中华人民共和国农业部提出

。

本标准由全国动物卫生标准化技术委员会归口

(SAC/TC181)。

本标准起草单位中国农业科学院兰州兽医研究所

:。

本标准起草人储岳峰赵萍高鹏程陈胜利贺英逯忠新

:、、、、、。

Ⅰ

GB/T34728—2017

无乳支原体PCR检测方法

1范围

本标准规定了无乳支原体检测方法的技术要求

PCR。

本标准适用于检测羊山羊和绵羊临床样品和分离培养物中无乳支原体的核酸

()。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

3缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

接触传染性无乳症

CA:(ContagiousAgalactia)

Maa无乳支原体Mcolasmaaalactiae

g:(ypg)

聚合酶链式反应

PCR:(PolymeraseChainReaction)

核酸电泳缓冲液

TAE:(Tris-Aceticacid-EDTA)

颜色变化单位

CCU:(Colorchangeunit)

Taq酶Taq聚合酶Taq

:DNA(DNAPolymerase)

脱氧核糖核酸

DNA:(DeoxyribonucleicAcid)

脱氧核糖核苷三磷酸

dNTPs:(DeoxyribonucleosideTriphosphates)

碱基对

bp:(BasePair)

4仪器器材

41仪器

.

高速冷冻离心机扩增仪核酸电泳仪水平电泳槽恒温水浴锅普通冰箱低温冰箱

、PCR、、、、、(-70℃)、

凝胶成像系统高压灭菌锅组织匀浆设备

、、。

42器材

.

微量加样器无菌滤

(0.5μL~10μL、2μL~20μL、20μL~200μL、100μL~1000μL)、0.22μm

器无菌棉拭子灭菌采样容器

、、。

5试剂

51反应预混合液含Taq酶和上样缓冲液

.2×PCR(、dNTPs

人人文库> 全部分类> 行业资料 > 各类标准

温馨提示

  • 1. 本站所提供的标准文本仅供个人学习、研究之用，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或网络传播等，侵权必究。
  • 2. 本站所提供的标准均为PDF格式电子版文本（可阅读打印），因数字商品的特殊性，一经售出，不提供退换货服务。
  • 3. 标准文档要求电子版与印刷版保持一致，所以下载的文档中可能包含空白页，非文档质量问题。

最新文档

评论

0/150

提交评论