标准解读

《GB/T 31787-2015 香石竹环斑病毒分子生物学检测方法》是一项国家标准，旨在为香石竹（通常指康乃馨）中的环斑病毒提供一种基于分子生物学技术的检测手段。该标准详细规定了从样本采集到最终结果分析的整个流程，确保了检测过程的一致性和准确性。

标准首先明确了适用范围，适用于疑似感染香石竹环斑病毒植物材料的快速准确鉴定。接着介绍了所需的主要仪器设备与试剂，包括但不限于PCR仪、电泳系统以及特定引物等，这些是进行分子水平上病原体识别不可或缺的工具。

在样品处理部分，《GB/T 31787-2015》给出了具体的指导步骤，包括如何正确地收集、保存及准备待测样本以避免污染或降解，保证后续实验的有效性。此外，还特别强调了RNA提取的重要性，并提供了推荐的方法来获得高质量的核酸模板。

关于检测方法本身，标准采用了RT-PCR技术作为核心手段，通过逆转录将病毒RNA转化为cDNA，再利用特异性引物扩增目标片段。此过程中使用的引物序列经过精心设计，能够特异性强且灵敏度高地识别出香石竹环斑病毒的存在与否。同时，为了验证实验体系的有效性，设置了阳性对照和阴性对照实验。

最后，在结果判定环节，《GB/T 31787-2015》提出了明确的标准，即只有当样品扩增产物与预期大小相符，并且能够在电泳图谱中观察到清晰条带时，才可判定为阳性；反之则视为未检出或阴性。这一步骤对于确保检测结果可靠至关重要。


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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2015-07-03 颁布
  • 2015-11-27 实施
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GB/T 31787-2015香石竹环斑病毒分子生物学检测方法_第1页
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文档简介

ICS6502001

B16..

中华人民共和国国家标准

GB/T31787—2015

香石竹环斑病毒分子生物学检测方法

MoleculardetectionofCarnationringspotvirus

2015-07-03发布2015-11-27实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T31787—2015

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归口

(SAC/TC271)。

本标准起草单位中华人民共和国上海出入境检验检疫局中华人民共和国天津出入境检验检疫

:、

局上海市标准化研究院中华人民共和国珠海出入境检验检疫局

、、。

本标准主要起草人杨翠云于翠魏亚东杨瑞钰张卫东郭京泽胡培龙崔学慧

:、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T31787—2015

香石竹环斑病毒分子生物学检测方法

1范围

本标准规定了香石竹环斑病毒的和实时荧光等分子生物学检测

RT-PCR、IC-RT-PCRRT-PCR

方法

。

本标准适用于植物种苗中携带的香石竹环斑病毒的检测

。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

基因检验实验室技术要求

SN/T1193

进出境植物及植物产品检疫抽样

SN/T2122

3仪器设备用具和试剂

、

31仪器设备

.

仪实时荧光定量仪超净工作台电子天平电泳仪电泳槽凝胶成像系

PCR、PCR、、(1/10000g)、、、

统水浴锅高速冷冻离心机超低温冰箱高压灭菌锅制冰机微波炉漩涡振荡器

、、、-80℃、、、、。

32用具

.

可调式微量移液器及相应的无吸头无离

(2L、10L、100L、200L、1000L)RNase、RNase

心管管和研钵等μμμμμ

、PCR。

33试剂

.

试剂见附录试剂见附录

RT-PCR(B),IC-RT-PCR(C)。

4症状观察及抽样

41症状观察

.

现场检疫主要观察进境植物材料上病毒为害的症状为害症状描述参见附录

,CRSVA。

42抽样

.

发现有病毒为害症状的植物材料直接送检未发现症状的则按中规定进行抽样并送

;,SN/T2122,

实验室进行病毒检测鉴定

。

5病毒检测

51RT-PCR方法

.

将送检植物样品中有疑似病毒为害症状的植物组织液氮研细取用于提取植物总然后

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