标准解读

《GB/T 28715-2012 饲料添加剂酸性、中性蛋白酶活力的测定 分光光度法》是一项国家标准，旨在规定饲料添加剂中酸性和中性蛋白酶活力的测定方法。该标准采用分光光度法作为检测手段，通过测量特定波长下样品溶液吸光度的变化来间接反映酶活性水平。适用于以酪蛋白为底物，在特定条件下由酸性或中性蛋白酶催化水解产生的肽类物质量来评估酶活力。

根据标准内容，首先需要准备相应的试剂和仪器设备，包括但不限于精确称量的酪蛋白溶液、缓冲液以及用于终止反应的三氯乙酸溶液等；同时要求使用具有适当波长范围的分光光度计进行实验操作。接着按照规定的步骤制备样品溶液，并在控制好温度与pH值的条件下加入待测酶液开始反应。经过一定时间后，利用三氯乙酸溶液停止反应，并通过离心去除未被分解的大分子蛋白质残留物。最后，将上清液稀释至合适浓度，在设定好的波长处测量其吸光度值。


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....

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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2012-09-03 颁布
  • 2013-02-01 实施
©正版授权
GB/T 28715-2012饲料添加剂酸性、中性蛋白酶活力的测定分光光度法_第1页
GB/T 28715-2012饲料添加剂酸性、中性蛋白酶活力的测定分光光度法_第2页
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文档简介

ICS65120

B46.

中华人民共和国国家标准

GB/T28715—2012

饲料添加剂酸性中性蛋白酶活力的测定

、

分光光度法

Determinationofacidicandneutralproteaseactivityinfeedadditives—

Spetrophotometricmethod

2012-09-03发布2013-02-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T28715—2012

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口

(SAC/TC76)。

本标准起草单位农业部农产品及转基因产品质量安全监督检验测试中心杭州浙江大学饲料科

:()、

学研究所武汉新华扬生物有限公司

、。

本标准主要起草人王小骊柳爱春邹晓庭吴琪赵芸朱加虹陈小丽周樱谢红云

:、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T28715—2012

饲料添加剂酸性中性蛋白酶活力的测定

、

分光光度法

1范围

本标准规定了饲料添加剂酸性和中性蛋白酶活力的测定方法

。

本标准适用于饲料添加剂酸性中性蛋白酶产品中酶活力的测定以及复合酶产品中中性蛋白酶活

、,

力的测定

。

本标准定量限为

500U/g(U/mL)。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件

。

31

.

酸性中性蛋白酶活力单位acidicandneutralproteaseactiveunit

、

在一定温度和相应的条件下酸性蛋白酶中性蛋白酶在

(40℃±0.2℃)pH(pH3.0,pH7.2),

内水解酪蛋白产生相当于酚基氨基酸由酪氨酸等同物表示的酶量为个酶活单位

1min1μg(),1,

以表示

U。

4原理

蛋白酶在一定的温度和条件下水解酪蛋白底物产生含有酚基的氨基酸如酪氨酸色氨酸

pH,(:、),

在碱性条件下可将福林试剂还原生成钼蓝与钨蓝其颜色的深浅与酚基氨基酸含量成正比

,(Folin),,。

通过在测定其吸光度得到酶解产生的酚基氨基酸的量进而计算蛋白酶活力

680nm,,。

5试剂和材料

除非另有说明在分析中使用的试剂均为分析纯水均为符合规定的二级水

,,GB/T6682。

51碳酸钠溶液cNa2CO3=04mol/L

.[().]

称取无水碳酸钠用水溶解并定容至

(Na2CO3)42.4g,1000mL。

52三氯乙酸溶液cCCl3—COOH=04mol/L

.[(

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