标准解读

GB/T 28642-2012《饲料中沙门氏菌的快速检测方法 聚合酶链式反应(PCR)法》是一项国家标准，旨在通过聚合酶链式反应技术对饲料中的沙门氏菌进行快速检测。该标准适用于各种类型的饲料原料及成品中沙门氏菌的定性分析。

根据标准内容，整个检测过程主要包括样品准备、DNA提取、引物设计与选择、PCR扩增条件设定、产物分析等几个关键步骤。首先，在样品准备阶段，需要从待测饲料中取样，并按照规定的方法处理以获取适合后续操作的样本。接着是DNA提取环节，这里要求使用有效的手段从处理后的样品中分离出细菌DNA，作为下一步实验的基础材料。

对于引物的选择，标准推荐了几种针对沙门氏菌特定基因序列设计的引物组合，这些引物能够特异性地识别目标微生物，从而保证了检测结果的准确性。随后，在设定好的条件下进行PCR扩增反应，通过控制温度循环来复制目标DNA片段，使得微量存在的病原体DNA得以放大至可被检测到的程度。

最后一步是对扩增产物进行分析，通常采用凝胶电泳法或其他适当的技术手段，观察是否存在预期大小的DNA条带，以此判断原始样品中是否含有沙门氏菌。此外，为了确保实验的有效性和可靠性，还需要设立阳性对照和阴性对照实验。

整个流程强调了实验室操作规范的重要性以及对环境清洁度的要求，以避免交叉污染导致假阳性或假阴性的发生。同时，也指出了在实际应用过程中可能遇到的问题及其解决办法，为从事相关领域工作的人员提供了详细的指导。


如需获取更多详尽信息，请直接参考下方经官方授权发布的权威标准文档。

....

查看全部

  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2012-07-31 颁布
  • 2012-11-01 实施
©正版授权
GB/T 28642-2012饲料中沙门氏菌的快速检测方法聚合酶链式反应(PCR)法_第1页
GB/T 28642-2012饲料中沙门氏菌的快速检测方法聚合酶链式反应(PCR)法_第2页
GB/T 28642-2012饲料中沙门氏菌的快速检测方法聚合酶链式反应(PCR)法_第3页
免费预览已结束，剩余9页可下载查看

下载本文档

GB/T 28642-2012饲料中沙门氏菌的快速检测方法聚合酶链式反应(PCR)法-免费下载试读页

文档简介

ICS65120

B46.

中华人民共和国国家标准

GB/T28642—2012

饲料中沙门氏菌的快速检测方法

聚合酶链式反应PCR法

()

RapiddeterminationofSalmonellasppinanimalfeedingstuffs—

.

PCRmethod

2012-07-31发布2012-11-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T28642—2012

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口

(SAC/TC76)。

本标准起草单位农业部饲料质量及畜产品安全监督检验测试中心沈阳

:()。

本标准主要起草人张秀芹张建勋杜柏林李欣南杨希国马俊驰陈晓月

:、、、、、、。

Ⅰ

GB/T28642—2012

饲料中沙门氏菌的快速检测方法

聚合酶链式反应PCR法

()

1范围

本标准规定了饲料中沙门氏菌的快速检测的方法

PCR。

本标准适用于饲料中沙门氏菌的定性筛选

。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

饲料中沙门氏菌的检测方法

GB/T13091

饲料采样

GB/T14699.1

实验室生物安全通用要求

GB19489

基因检验实验室技术要求

SN/T1193

食品中致病菌检测方法实时法

SN/T1870PCR

3原理

利用沸水浴使菌体细胞破裂释放基因组离心使细胞壁等有形物沉淀以上清液为模板进行

,DNA,,

扩增琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物

,PCR。

4试剂和材料

除另有规定外试剂为分析纯或生化试剂试验用水符合的要求

,,GB/T6682。

41沙门氏菌检测用引物对序列为

.():

SalF:5′-TCGCACCGTCAAAGGAACCGTAAAGC-3′

SalR:5′-GCATTATCGATCAGTACCAGCCGTCT-3′

42Taq缓冲液内含Taq聚合酶2+

.Premix(2×):DNA1.25U/25μL,4mmolMg,dNTP

各

0.4mmol。

43琼脂糖电泳级

.:。

44

.Marker2000。

45缓冲蛋白胨水见

.(BPW):A.1。

46大豆蛋白胨肉汤见

.(RVS):A.2。

47亚硒酸盐胱氨酸增菌液见

.(SC):A.3。

48倍上样缓冲液的溴酚蓝丙三醇溶液的

.10(10×loadingbuffer):0.05%,50%,1%SDS。

49质控菌株沙门氏菌阳性标

人人文库> 全部分类> 行业资料 > 各类标准

温馨提示

  • 1. 本站所提供的标准文本仅供个人学习、研究之用，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或网络传播等，侵权必究。
  • 2. 本站所提供的标准均为PDF格式电子版文本（可阅读打印），因数字商品的特殊性，一经售出，不提供退换货服务。
  • 3. 标准文档要求电子版与印刷版保持一致，所以下载的文档中可能包含空白页，非文档质量问题。

最新文档

评论

0/150

提交评论