小鼠肺泡灌洗参考范本

PAGEPAGE2/3下载文档可编辑把小鼠喉咙处皮肤剪开， 用镊子把气管周围的组织分离开，气管暴露出来。注射器 7号针头，针尖剪掉，再磨平，把动物仰位固定，针头从嘴巴里进去，伸到气管里。和平时灌胃一样，只是现在伸到气管。在甲状腺（气管显得稍宽处）下面针头就伸到这里， 大约甲状腺过 3毫米处。然后拿一根线，从气管下穿过，把针头和气管一起结扎了，其实就是把针头固定在里面，不让它跑出来。打结时用点力， 手拨动针头时明显感觉针头动不了就可以了。然后注射器吸取液体推进气管，第一次一般吸不完全，没关系，第二次的液体推进去后就能吸出来很多了。 我基本能全部出来的。 希望能帮上忙。标题：小鼠肺泡灌洗标准操作规程关键词： 肺泡灌洗；细胞分类计数；细胞因子目的：检查小鼠各种病理生理状态 (特别是肺部疾病 )下，肺部 出现的各种病理改变。例：哮喘模型中检测嗜酸细胞的分类数有否提高，灌洗 液中各种细胞因子，如IL-4,IL-5,IL-10,IFN-r 等水平。 主体内容（操作步骤实验的准备实验的器材、仪器、药品： 遇冷的单纯 和4℃遇冷的含 1%BSA的PB； 手术器械：眼科剪，眼科镊，穿刺针或 4号半头 皮针；细胞计数板；低温离心机实验操作规程：灌洗分单侧和双侧。单侧一般为颈部和胸部解剖，气管和一侧肺叶结扎。再用穿刺针插入气管上端，0.3mlPBS反复冲洗,一般为3遍，每遍冲洗次数根据需要决定，一般3-5次即可。双侧灌洗则只需要进行颈部解剖，暴露气管进行插管。灌洗量增高到0.8ml.灌洗次数同上。结果判定：1回收的灌洗液离心10分钟，回收上清置于-20℃等待进行细胞因子检测；.用l含有的PB重悬细胞沉淀，取 l 重悬液进行细胞计数。余液再次 4℃离心，参数同上； 3. 离心后去上清，不需太彻底可根据第二步细胞计数所得结果和需要涂片张数决定需要残留多少上清重悬细胞沉淀。一般如果细胞总数有 10*6 次方/ml 的话，80-100ul 重悬可以涂三张片，这样玻片上细胞密度比较适中。4.涂片后待玻片自然晾干，然后置于 中性甲醛溶液中固定 10钟以上，随后就可以进行常规 HE染色。5。染色后就可以进行细胞分类计数，计算 300个以上细胞，结果就比较可靠了。使用静脉留置针，颈部解剖显露气管，插入留置针，用细线打结固定，PAGEPAGE4/3下载文档可编辑拔出针芯。链接注射器，即可开始灌洗！本实验室是这么做的，很方便，效果很好1 总则1.1 为了加强公司的环境卫生管理，创造一个整洁、文明、温馨的购物、办公环境，根据《公共场所卫生管理条例》的要求，特制定本制度。1.2 集团公司的卫生管理部门设在企管部，并负责将集团公司的卫生区域详细划分到各部室，各分公司所辖区域卫生由分公司客服部负责划分，确保无遗漏。2 卫生标准2.1 室内卫生标准2.1.1 地面、墙面：无灰尘、无纸屑、无痰迹、无泡泡糖等粘合物、无积水，墙角无灰吊、无蜘蛛网。2.1.2 门、窗、玻璃、镜子、柱子、电梯、楼梯、灯具等，做到明亮、无灰尘、无污迹、无粘合物，特别是玻璃，要求两面明亮。2.1.3 柜台、货架：清洁干净，货架、柜台底层及周围无乱堆乱放现象、无灰尘、无粘合物，货架顶部、背部和底部干净，不存放杂物和私人物品。2.1.4 购物车（筐）、直接接触食品的售货工具（包括刀、叉等）：做到内外洁净，无污垢和粘合物等。购物车（筐）要求每天营业前简单清理，周五全面清理消毒；售货工具要求每天消毒，并做好记录。2.1.5 商品及包装：商品及外包装清洁无灰尘（外包装破损的或破旧的不得陈列）。2.1.6 收款台、服务台、办公橱、存包柜：保持清洁、无灰尘，台面和侧面无灰尘、无灰吊和蜘蛛网。桌面上不得乱贴、乱画、乱堆放物品，用具摆放有序且干净，除当班的购物小票收款联外，其它单据不得存放在桌面上。2.1.7 垃圾桶：桶内外干净，要求营业时间随时清理，不得溢出，每天下班前彻底清理，不得留有垃圾过夜。2.1.8 窗帘：定期进行清理，要求干净、无污渍。2.1.9 吊饰：屋顶的吊饰要求无灰尘、无蜘蛛网，短期内不适用的吊饰及时清理彻底。2.1.10 内、外仓库：半年彻底清理一次，无垃圾、无积尘、无蜘蛛网等。2.1.11 室内其他附属物及工作用具均以整洁为准，要求无灰尘、无粘合物等污垢。2.2 室外卫生标准2.2.1 门前卫生：地面每天班前清理，平时每一小时清理一次，每周四营业结束后有条件的用水冲洗地面（冬季可根据情况适当清理），墙面干净且无乱贴乱画。2.2.2 院落卫生：院内地面卫生全天保洁，果皮箱、消防器械、护栏及配电箱等设施每周清理干净。垃圾池周边卫生清理彻底，不得有垃圾溢出。2.2.3 绿化区卫生：做到无杂物、无纸屑、无塑料袋等垃圾。3 清理程序3.1 室内和门前院落等区域卫生：每天营业前提前10分钟把所管辖区域内卫生清理完毕，营业期间随时保洁。下班后5-10分钟清理桌面及卫生区域。3.2 绿化区卫生：每周彻底清理一遍，随时保持清洁无垃圾。4 管理考核4.1 实行百分制考核，每月一次（四个分公司由客服部分别考核、集团职4.2 集团坚持定期检查和不定期抽查的方式监督各分公司、部门的卫生工作。每周五为卫生检查日，集团检查结果考核至各分公司，各分公司客服部的检查结果考核至各部门。把小鼠喉咙处皮肤剪开， 用镊子把气管周围的组织分离开，气管暴露出来。注射器 7号针头，针尖剪掉，再磨平，把动物仰位固定，针头从嘴巴里进去，伸到气管里。和平时灌胃一样，只是现在伸到气管。在甲状腺（气管显得稍宽处）下面针头就伸到这里， 大约甲状腺过 3毫米处。然后拿一根线，从气管下穿过，把针头和气管一起结扎了，其实就是把针头固定在里面，不让它跑出来。打结时用点力， 手拨动针头时明显感觉针头动不了就可以了。然后注射器吸取液体推进气管，第一次一般吸不完全，没关系，第二次的液体推进去后就能吸出来很多了。 我基本能全部出来的。 希望能帮上忙。标题：小鼠肺泡灌洗标准操作规程关键词： 肺泡灌洗；细胞分类计数；细胞因子目的：检查小鼠各种病理生理状态 (特别是肺部疾病 )下，肺部 出现的各种病理改变。例：哮喘模型中检测嗜酸细胞的分类数有否提高，灌洗 液中各种细胞因子，如IL-4,IL-5,IL-10,IFN-r 等水平。 主体内容（操作步骤实验的准备实验的器材、仪器、药品： 遇冷的单纯 和4℃遇冷的含 1%BSA的PB； 手术器械：眼科剪，眼科镊，穿刺针或 4号半头 皮针；细胞计数板；低温离心机实验操作规程：灌洗分单侧和双侧。单侧一般为颈部和胸部解剖，气管和一侧肺叶结扎。再用穿刺针插入气管上端，0.3mlPBS反复冲洗,一般为3遍，每遍冲洗次数根据需要决定，一般3-5次即可。双侧灌洗则只需要进行颈部解剖，暴露气管进行插管。灌洗量增高到0.8ml.灌洗次数同上。结果判定：1回收的灌洗液离心10分钟，回收上清置于-20℃等待进行细胞因子检测；.用l含有的PB重悬细胞沉淀，取 l 重悬液进行细胞计数。余液再次 4℃离心，参数同上； 3. 离心后去上清，不需太彻底可根据第二步细胞计数所得结果和需要涂片张数决定需要残留多少上清重悬细胞沉淀。一般如果细胞总数有 10*6 次方/ml 的话，80-100ul 重悬可以涂三张片，这样玻片上细胞密度比