标准解读

《GB/T 27634-2011 传染性囊病病毒核酸检测方法》是一项国家标准，主要针对传染性囊病病毒（IBDV）的核酸检测提供了一套标准化的方法。该标准详细描述了如何从疑似感染传染性囊病病毒的样本中提取核酸，并通过RT-PCR技术对其进行检测的过程。

首先，在样品采集方面，标准规定了适合用于IBDV检测的各种生物样本类型，包括但不限于鸡只的脾脏、法氏囊等组织样本或粪便样本。选择合适的样本对于后续实验的成功至关重要。

接着是核酸提取部分，标准推荐使用商业化的核酸提取试剂盒或者传统的酚/氯仿抽提法来获得高质量的RNA。这一步骤的质量直接影响到后续扩增反应的效果。

在RT-PCR反应体系建立上，《GB/T 27634-2011》给出了详细的指导，包括引物设计原则、退火温度设置以及循环参数等关键信息。此外，还特别强调了阳性对照和阴性对照的重要性，以确保实验结果的准确性和可靠性。

最后，关于结果分析与报告撰写，本标准也提供了具体指南。它建议采用凝胶电泳作为初步判断依据，并结合定量PCR仪提供的Ct值来进行定性分析。同时，对如何记录实验数据及编写正式报告也有明确要求。


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....

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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2011-12-30 颁布
  • 2012-04-01 实施
©正版授权
GB/T 27634-2011传染性囊病病毒核酸检测方法_第1页
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文档简介

ICS11220

B41.

中华人民共和国国家标准

GB/T27634—2011

传染性囊病病毒核酸检测方法

Protocolofnucleicaciddetectionforinfectiousbursaldisease

umborodiseasevirus

(g)

2011-12-30发布2012-04-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T27634—2011

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由全国动物防疫标准化技术委员会归口

(SAC/TC181)。

本标准起草单位中华人民共和国深圳出入境检验检疫局深圳市检验检疫科学研究院华南农业

:、、

大学中华人民共和国珠海出入境检验检疫局北京盈九思科技有限公司

、、。

本标准主要起草人秦智锋孙洁卢体康花群义陈书琨吕建强杨素方兴旺曾少灵詹爱军

:、、、、、、、、、、

毕英佐陈兵阮周曦朱玉兰

、、、。

Ⅰ

GB/T27634—2011

传染性囊病病毒核酸检测方法

1范围

本标准规定了传染性囊病病毒检测方法和实时荧光检测方法的技术要求和操

RT-PCRRT-PCR

作规范

。

本标准适用于传染性囊病病毒感染的快速诊断

。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

出入境动物检疫采样

GB/T18088

实验室生物安全通用要求

GB19489

3缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

值荧光信号量达到设定的阈值时所经历的循环数

Ct:。

传染性囊病

IBD:infectiousbursaldisease,。

传染性囊病病毒

IBDV:infectiousbursaldiseasevirus,。

无特定病原体

SPF:specificpathogenfree,。

4材料与试剂

41仪器与耗材

.

411核酸电泳仪

..。

412凝胶成像仪

..。

413冷冻离心机最高离心力达g以上

..(15000)。

414混匀器

..。

415冰箱

..(2℃~8℃,-20℃,-80℃)。

416微量可调移液器

..(10μL,100μL,1000μL)。

417微量带滤芯吸嘴

..(10μL,100μL,1000μL)。

418灭菌研钵

..。

419离心管

..。

4110光学反应管

..PCR。

4111

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