标准解读

《GB/T 27536-2011 猪流感病毒分离与鉴定方法》是一项国家标准，旨在提供一套科学、系统的方法来从疑似感染猪流感的样本中分离并鉴定猪流感病毒。该标准适用于兽医实验室及研究机构对猪流感病毒的研究工作。

根据此标准，首先明确了样品采集的要求，包括但不限于鼻拭子、气管和肺组织等样本类型的选择，以及如何正确保存这些样本以确保其在运输过程中的稳定性。接着，详细描述了病毒分离的具体步骤，如使用特定细胞系（例如MDCK细胞）进行培养，并通过观察细胞病变效应(CPE)初步判断是否存在病毒感染。

对于已成功分离出的病毒株，该标准还规定了一系列分子生物学技术用于进一步确认其身份，比如RT-PCR扩增特定基因片段、测序分析以及血凝抑制试验(HI test)等。此外，也提到了利用单克隆抗体进行免疫荧光检测(IFAT)或ELISA实验作为辅助手段之一。


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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2011-11-21 颁布
  • 2012-03-01 实施
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文档简介

ICS11220

B41.

中华人民共和国国家标准

GB/T27536—2011

猪流感病毒分离与鉴定方法

Isolationandidentificationofswineinfluenzavirus

2011-11-21发布2012-03-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T27536—2011

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由中华人民共和国农业部提出

。

本标准由全国动物防疫标准化技术委员会归口

(SAC/TC181)。

本标准起草单位中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

:。

本标准主要起草人乔传玲杨焕良陈艳辛晓光陈化兰

:、、、、。

Ⅰ

GB/T27536—2011

猪流感病毒分离与鉴定方法

1范围

本标准规定了猪流感病毒分离与鉴定方法

。

本标准适用于各种亚型猪流感的病原分离和鉴定

。

2试验材料试剂

、

21剪刀镊子

.、。

22注射器

.1mL。

23单道及多道微量移液器吸头

.、。

24日龄鸡胚

.9~11SPF。

25犬肾细胞

.(MDCK)。

26孔培养板

.6。

27培养基

.DMEM。

28缓冲液储存液

.HEPES(1mol/L)。

29胎牛血清

.。

210胰蛋白酶胰蛋白酶经处理

.TPCK-(TPCK)。

211磷酸盐缓冲液参见附录中

.0.01mol/LpH7.0~7.4(PBS)(AA.1)。

212磷酸盐缓冲液参见附录中

.(pH5.9)(AA.5)。

213生理盐水参见附录中

.0.85%(AA.2)。

214阿氏液参见附录中

.(Alsevers)(AA.3)。

215红细胞悬液参见附录中

.0.5%(AA.4)。

216胎球蛋白参见附录中

.(AA.6)。

217过碘酸盐参见附录中

.(AA.7)。

218亚砷酸盐参见附录中

.(AA.8)。

219硫代巴比妥酸参见附录中

.(AA.9)。

220无菌蒸馏水或去离子水

.。

3仪器

31生物安全柜柜内负压有过滤器可避免细胞培养物污染及保护操作人员安全

.(,HEPA)。

32孵化器

.。

33培养箱

.CO2。

34台式高速冷冻离心机

.。

35水浴加热器

.37℃。

36煮沸锅

.。

37

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