微生物日常检验过程中的注意事项

微生物日常检验过程中的注意事项微生物日常检验过程中的注意事项培养基的灭菌及使用每次配制时，要注意其生产日期是否在保质期内，查看其开瓶日期及瓶口密封性，保证其未变质，并且未吸潮。培养基配制时，称量要准确，包括盐水的分装要准确。一定要保证现配制现灭菌，未灭菌的配好培养基不能长时间放置，更不可隔夜。灭菌时要保证恒温、恒压，同时要保证有效的灭菌时间。灭菌过的培养基要冰箱保存，可保存一周，一般不超过3天。而且要遵循“先入先出”原则，先配制的要先使用。在使用时，要根据当班次的使用量，用水浴锅先将培养基溶化为液态，然后及时调低水浴温度（先化好的可从水浴取出，放在水浴锅锅盖上）待用，千万不可长时间使培养基处于高温状态。做产品微生物检测时，倾倒培养基温度在45°C左右，不可过烫，避免将菌烫死;也不可过凉，化好的培养基又结块凝固，不便于观察结果。每瓶培养基均要做空白。尽量集中做样，避免频繁打开同一瓶培养基瓶塞，增大培养基的.污染几率，出现误差结果。培养基剩余过少时，可先将其倾倒成空白用板。检测环境的维持一、大环境（检测室）检测时，窗户和空调要关闭，或用酒精对房间进行喷雾消毒，避免房间内空气流通影响超净台内部环境（最好在有通排风系统的恒温恒湿无菌间进行操作）。如果在原来的原料微生物检测室进行检测，要定期开启紫外灯对房间进行杀菌。二、小环境（超净工作台）定期清洁初效过滤器，要及时更换。检测前，将超净台内部进行清洁，用75%酒精进行擦拭消毒，并提前半小时将超净台紫外灯打开，对超净台内部环境进行杀菌。关紫外灯，开风机，调整合适进风量，风量不可过低。每次检测后，要对超净台内部进行清理、清洁，并用75%酒精进行擦拭消毒。紫外灯根据其使用寿命要及时更换。检测同时，要做上相应菌落检测的环境空白。检测区域的选择：a、 一般在距离超净台外沿的1/3-2/3区域进行无菌操作；b、 要在酒精灯火焰的外焰保护区域进行操作。工器具的洁净度玻璃器皿：采用干热灭菌方式进行灭菌。检测用剪刀、勺子等物品要做到检测专用，不可与其它操作器具混用，使用时，先用75%酒精消毒，再采用灼烧方式进行灭菌。接种针（环）采用灼烧方式进行灭菌，但要注意检测时要先将接种针（环）进行冷却。样品的采集及检测一、保证采样器具的无菌性玻璃器皿：采用干热灭菌方式进行灭菌，保证恒温、时间足够（但不可时间过长，容易导致玻璃器皿易裂纹而报废）。取样筐：使用前要用75%酒精进行喷洒消毒。取样勺：要保证其清洁消毒，清洁后用75%酒精进行擦拭消毒取样袋：可先用酒精进行擦拭消毒，再在超净台用紫外灯照射消毒，（包装车间要在传递窗用紫外灯照射消毒）。电子称表面用75%酒精消毒。二、人员操作保证手部的清洗、消毒：取样前及检测前都要先洗手再消毒。取样要具有代表性（随机样、目的样、综合样）且要标示清楚。取样完毕，不可在车间逗留，要及时将样品放入超净台，对其外表面进行紫外灯照射消毒。在要求的检测区域进行操作。检测前，要用75%酒精棉球对样品袋口部进行擦拭消毒，再开口。往盐水瓶加样品时，要注意勺子或袋子尽量不接触瓶口。样品计量要准确，稀释倍数也要准确（ImL吸管不允许将管口敲掉），进行100倍稀释时，ImL吸管要伸入盐水中，不可以将样品从管壁流下去，同时要避免将管底部捅破。盐水温度以40°C左右为宜，不能过热，会将部分微生物烫死；也不能温度太低，不能将样品溶解完全。进行稀释时，要摇匀，保证溶液的均一性。倾倒平皿时，要注意培养基瓶口不要接触到平皿;倾倒的培养基要适量，不可以太少，在培养过程中易干掉，微生物亦死亡，以15mL左右为宜。做大肠菌群样时，要提前将乳糖胆盐培养基培养管按需要量备好，放入超净台对外表面进行紫外线灭菌。接二步时，要注意先将接种针（环）进行冷却，避免出现接不上菌落的情况，导致无法判断、确认。检测完毕，及时放入相应培养箱进行培养，并清理清洁超