微生物知识培训

微生物及污染控制张启明2023/2/31微生物1）微生物的定义

微生物是个体微小、结构简单，无法用肉眼看到，只能借助显微镜观察的一群微小生物的总称。2微生物2）微生物的特点

1.种类多，分布广：一克沃土中含菌量高达几亿甚至几十亿2.代谢能力强，繁殖速度快：大肠杆菌（Escherichiacoli）在适宜的条件下，每20分钟即繁殖一代，24小时即可繁殖72代。

3.受环境影响大，容易发生变异：自发突变频率为10-6左右

4.个体小，结构简单:细胞大小以微米和纳米计量。3微生物3）微生物分类：

按照结构分为：细菌、放线菌、真菌、病毒细菌菌落霉菌菌落霉菌放线菌冠状病毒Sars病毒艾滋病病毒（HIV）放线菌菌落4（一）细菌：细菌是一类细胞细而短、结构简单、细胞壁坚韧，以二等分裂方式繁殖的原核微生物，分布广泛。细菌菌落常表现为湿润、粘稠、光滑、较透明、易挑取、质地均匀以及菌落正反面或边缘与中央部位颜色一致等。细菌的菌落特征因种而异。可作为鉴定细菌种的依据。5各类细菌菌落图粘质沙雷氏菌的菌落特征

沙门氏菌的菌落特征

铜绿假单孢菌的菌落特征

弗氏志贺氏菌的菌落特征

粘质沙雷氏菌的菌落特征

6细菌的形态细菌的形态球菌杆菌弧菌、螺旋菌7（二）霉菌（真菌）真菌在微生物世界中可以称得上是个"巨人家族"，真菌的个头较大，其中的许多成员对我们来说都是很熟悉的。例如，在潮湿的天气里，常常发现粮食、衣服、皮鞋上长了霉，我们做酱、酱油、豆腐乳用的曲霉和毛霉等霉菌；发面、酿酒用的酵母菌等都是真菌，就连人们爱吃的蘑菇、木耳等蕈子，也都是真菌大家族的成员。真菌是微生物中的一大类群，属于真核微生物，与人类关系非常密切。真菌是抗生素（如青霉素、头孢霉素）、有机酸等多种发酵工业的基础，在自然界中则扮演着各种复杂有机物分解者的角色。然而有些真菌是病原菌，引起人类和动植物病害，有些真菌产生毒素，使人、畜中毒，严重者引起癌症。如黄曲霉产生的黄曲霉毒素毒害肝脏，易引发肝癌。8各种曲霉的菌落各种病原真菌的菌落青霉的菌落

青霉的菌落9（三）酵母菌我们每天吃的面包和馒头、喝的啤酒就是有酵母菌的参与制成的；酵母菌的细胞里含有丰富的蛋白质和维生素，所以也可以做成高级营养品添加到食品中，或用作饲养动物的高级饲料。喜欢在偏酸性且含糖较多的环境中生长，例如，在水果、蔬菜、花蜜的表面和在果园土壤中最为常见。酵母菌是单细胞真核微生物。酵母菌细胞的形态通常有球形、卵圆形、腊肠形、椭圆形、柠檬形或藕节形等。比细菌的单细胞个体要大得多，一般为1-5微米×5-30微米。酵母菌无鞭毛，不能游动。酵母菌具有典型的真核细胞结构,有细胞壁、细胞膜、细胞核、细胞质、液泡、线粒体等，有的还具有微体。10啤酒酵母的菌落红酵母的菌落各种酵母菌的菌落

酵母菌的细胞形态

酵母菌的细胞形态

酵母菌细胞结构的显微照片

11你相信吗？污染源就在我们身边！直接接触药品（半成品、成品）的生产人员的手、工作衣、帽如不经常清洗消毒，就会有大量的微生物附着而污染食品，鼠、蝇及蟑螂等一旦接触药品，其体表面与消化道内大量微生物会给药品造成污染。生产车间内外环境不良时，空气中的微生物及其粘附在灰尘上的飞物均可沉降于药品，生产操作人员谈话、咳嗽、打喷嚏等，均会直接或间接地污染药品。用一只蟑螂作细菌试验培养出不计其数的细菌。打一个喷嚏，培养出不计其数的细菌。12微生物污染控制13GMP的宗旨GMP第一章第三条本规范作为质量管理体系的一部分，是药品生产管理和质量控制的基本要求，旨在最大限度地降低药品生产过程中污染、交叉污染以及混淆、差错等风险，确保持续稳定的生产出符合预定用途和注册要求的药品。14两种最常见的污染形式：尘粒污染和微生物污染★尘粒污染及其三个特点：▲尘粒的普遍存在：几乎任何物料都能转变成尘粒形式并通过空气流传播到整个药厂。典型尘粒有：泥土、尘埃、沙、棉绒、头发、皮肤、烟雾、金属、喷嚏和咳嗽排出物▲制药企业中大量存在尘粒：每立方英尺（1英尺=0.3048米）的空气中可能含有20万至1千万尘粒。（99%）▲尘粒大小区别很大：大部分尘粒肉眼不能看到，必须用灵敏的测量仪器才能检出，所以容易被忽视。★微生物（主要是细菌）污染：细菌得到了必要的养料、水分及合适的温度，一个细菌24小时后可生产出281兆个细菌。污染的形式及特点15传播污染的四大媒介及应对措施★空气：是侵袭产品的污染物的主要媒介。

建立密闭的洁净厂房：这是最有效的战略措施；

过滤：是控制空气质量的最有效方法。最常见的空气过滤系统之一是层流装置。能达到

10，000级和100级洁净度。在层流系统中，HEPA可达到高于99.97%的除尘效果。一个主持生产工作的中层干部，对过滤原理、滤器等级各能力以及比较各类滤器性能的方法等，应具备基本的理解。16传播污染的四大媒介及应对措施★水：水是生命物质的组成部分，水中含有微生物赖以生存和繁殖所必需的养料。

水可以分为生水、标准饮用水、纯化水（通过蒸馏、离子交换、反渗透制得）、注射用水。

在生产过程中，水是应用最广泛的原料，并且要用来清洗我们的设备、容器、工具。

最好的措施是对水进行净化：现在最常用的是用二级反渗透法制备纯化水，再通过蒸馏制备注射用水。17传播污染的四大媒介及应对措施★表面：（包括包装材料、建筑、设备、原料、容器工具）由于空气中的湿度、所有表面都被包上了一层含水的薄膜、这层薄膜由于静电吸引而饱含尘埃，许多时候，表面还覆盖一层油状物，此油膜易受到尘粒污染。

清洗：从表面除去泥土和其它微粒，从而阻止污染物聚积和生长的过程。

消毒灭菌：消灭清洗后常常留在表面的致病菌的过程。

对于地板、墙壁、设备和容器的有效清洗和消毒灭菌来说是至关重要的。18传播污染的四大媒介及应对措施★人：人是药厂中最不清洁的成份，是最常见的、永不休止的污染源。

每分钟从人类皮肤中要散发约10，000个微生物。一小粒糖大的头发中能装载4亿个微生物。

一次咳嗽或喷嚏将把千百万个微生物引入工作环境。

衣物、发胶、香水、脂粉、耳环、戒指是极好的污染源。

所有的生产操作及清洁操作都要由人来完成。实施各项关于人员的卫生措施，包括体检及个人卫生★人是最大污染源19杀死物体上病原微生物的方法,并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物杀灭物体上所有微生物的方法。不存在活菌的意思。

防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。消毒：AsepsisSterilizationAntisepsis消毒与灭菌Disinfection灭菌：无菌：防腐：20热力灭菌法一、物理消毒灭菌法高温杀灭細菌焚烧----最彻底的灭菌方法烧灼----直接用火焰灭菌方法干烤----加热干热灭菌法常用烘箱：用于耐高温的物料、金属、玻璃制品，灭芽孢效果好。

135~145℃3~5小时160~170℃2~4小时180~200℃0.5~1小时250℃0.5小时或200以上45mim(热原)遭破坏21湿热灭菌法加压蒸汽灭菌法最有效的灭菌方法121℃20~30分钟煮沸消毒法水煮100℃5分钟(繁殖体)~2小时(芽胞)流通蒸汽消毒法巴氏消毒法间歇蒸汽灭菌法反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌较低的温度（61℃30分钟）杀灭致病菌115℃，67kPa30mim121℃，97kPa20mim126℃，139kPa15mim22湿热灭菌与干热灭菌的比较同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好原因1、湿热中细菌菌体蛋白较易凝固2、湿热的穿透力比干热大3、湿热的蒸汽有潜热23辐射杀菌法紫外线杀菌机理：干扰DNA的复制与转录紫外线穿透力较弱不耐热物品的表面消毒特点：应用范围：空气消毒手术室、传染病房、细菌实验室用波长200～300nm（253.7nm处杀菌力最强）的紫外线进行灭菌，紫外灭菌灯平均寿命为2000小时，设计为0.4w/m2以上，被灭菌物品离光源不超过1.5米，一般灭菌30min~1h。24应用范围：电离辐射包括高速电子、X射线和γ射线如Co60、环氧乙烷、臭氧一次性医用塑料制品的消毒不破坏其营养成分的灭菌空气的消毒环氧乙烷灭菌，利用其强氧化性，对微生物繁殖体、芽孢有强的灭菌作用。臭氧灭菌：臭氧在常温下不稳定，很快自行分解成氧气（O2）及氧原子（O），氧原子对微生物具有的氧化作用。25滤过除菌法用物理阻留的方法将液体或空气中的细菌除去,以达到除