正常下颌乳中切牙釉质表层50μm内钙含量及分布,口腔科学论文

正常下颌乳中切牙釉质表层50μm内钙含量及分布,口腔科学论文龋病的产生是一个脱矿与再矿化不平衡交替的连续动力学经过[1-2].钙是组成牙体硬组织的主要化学元素[1].在龋病的发生经过中,牙齿钙含量的变化可作为反映脱矿与再矿化的重要指标.在龋病发展的早期阶段,临床表现为白斑或棕色斑,其典型的病理损害是釉质表层相对完好,但表层下严重脱矿.表层的构成与釉质表层固有特征和龋损外表发生的再矿化有关.本实验拟运用电子探针显微分析仪研究正常下颌乳中切牙釉质表层50m内钙含量及分布,试图发现其特点,并讨论其与年龄、龋患状况之间的关系,为牙体硬组织的基础研究及乳牙龋病研究提供资料.1资料与方式方法1.1一般资料选取2018年1月-3月间在口腔门诊就诊的40名5~7岁患儿为研究对象,收集其因滞留或替牙期松动而铲除的下颌乳中切牙40颗,肉眼观察牙冠完好,无裂纹、龋坏、白垩斑及釉质发育不全等病损.拔牙前全口牙齿进行具体检查及记录.分别计算每颗患牙的龋补牙数(decayed-filledtooth,dft)、龋补牙面(decayed-filledsurface,dfs)和龋蚀指数(cariesseverityindex,CSI).dft、dfs参照世界卫生组织的检查计算标准,CSI参考下野勉之方式方法[3]以龋患状况记分计算所得.计分标准为:无龋0分,因龋充填0.5分,继发龋、牙釉质龋、牙本质浅龋1分,牙本质深龋或露髓、残冠、残根2分.若一个牙有多个牙面同时患龋则以其牙面中之最高分为准.计算公式:CSI=龋蚀牙计分总和(牙数2)100.1.2方式方法1.2.1分组有两种分组方式方法,其一为以标本所在个体的年龄为指标分组.5岁组儿童为7人,平均年龄为5岁10个月;6岁组儿童21人,平均年龄为6岁6个月;7岁组儿童为12个人,平均年龄为7岁2个月.其二为以标本所在个体的dft和CSI为指标分组.无龋组:dft=0且CSI=0,共14例;患龋低危组:5dft0且10CSI0,共12例;患龋高危组:dft5且CSI10,共14例.1.2.2标本的制备将标本从0.9%的生理盐水中取出,在牙科低速涡轮机上,用金刚超薄砂片以唇舌方向纵向片切牙体为左右对称的两半,随机取华而不实一半为实验对象.环氧树脂包埋,暴露牙剖面.经研磨抛光、超声清洗后自然枯燥,真空喷碳,碳膜厚度约200A[4].1.2.3定点及测试①将制备好的样本涂导电胶后固定于样品座,置入电子探针显微分析仪(JXA-8100型,JEOL公司,日本)样品室内测试平台上;②真空状态下,观察样本的低倍图象,区分样本的唇侧和舌侧,并确定釉质唇侧外表中点A、牙齿切端顶点B以及髓腔顶点C,由A向BC作垂线(图1);③在该垂线上,釉质内取釉质外表下10、20、30、40、50m处5点;④测试时将样本放大至高倍下,进行微区分析.电子探针显微分析仪工作条件为:工作电压20kV,发射电流110-9A,工作距离11mm,计数有效时间100s,电子束直径小于1m,光斑直径1~2m.1.3统计学方式方法全部数据用SAS8.02版统计软件包处理.处理数据时,对于钙含量及个体龋患状况指标的数据分布分析采用正态性检验;对于不同年龄、不同龋患状况组及不同深度的钙含量比拟分析采用Kruskal-Wallis检验;对于钙含量与个体龋患状况指标的相关性分析采用Spearman等级相关分析法.2结果40例下颌乳中切牙标本的牙釉质表层50m内钙含量质量百分比均值为(38.390.92)%.2.1不同年龄儿童乳牙釉质表层50m内钙含量比拟如表1所示,5、6、7岁3个年龄组儿童的下颌乳中切牙釉质表层50m内平均钙含量固然各不一样,尤其是5岁组和7岁组之间平均值相差0.31,但差异无统计学意义(P0.05).2.2乳牙釉质表层50m内不同深度钙含量比拟由表2可见,下颌乳中切牙釉质表层50m内不同深度的钙含量是相近的,差异无统计学意义(P0.05).2.3不同龋患状况组间乳牙釉质表层50m内钙含量比拟比拟无龋组、龋病低危组、高危组之间下颌乳中切牙釉质表层50m内平均钙含量,结果显示各组间无统计学差异(P0.05),表3.进一步比拟不同龋患状况组间不同深度钙含量的差异,如表4所示,差异均无统计学意义(P0.05).2.4乳牙釉质表层50m内钙含量与个体龋患状况的关系采用Spearman等级相关法分析下颌乳中切牙釉质表层50m内钙含量分别与个体龋患状况指标dft(r=-0.2728,P=0.0886)、dfs(r=-0.1945,P=0.2292)、CSI(r=-0.2176,P=0.1774)的相关性,相关系数r均无统计学意义(P0.05).进一步分析釉质表层10~50m不同深度钙含量分别与dft、dfs、CSI的相关性,结果如表5所示,釉质外表下40m钙含量与dft之间呈低度负相关关系(r=-0.3573,P=0.0236,P0.05),除此之外,其余各组等级相关分析的P值均大于0.05,相关系数r无统计学意义.以牙釉质外表下40m钙含量为横坐标,以dft为纵坐标绘制Spearman等级相关图,如此图2所示.3讨论本研究结果显示5、6、7岁3个年龄组儿童的下颌乳中切牙釉质表层50m内钙含量的差异无统计学意义.5岁组和7岁组儿童的平均年龄较为接近6岁,分别为5岁10个月和7岁2个月,结果可能与此有关.牙釉质有萌出后成熟现象,表现为钙、磷、氟等元素的含量增加,钠、镁、碳酸盐等减少,釉质的浸透性减低,硬度和抗酸性加强,羟磷灰石结晶增大[5-8].本研究中所取标本为处于替牙期的下颌乳中切牙.该牙约在幼儿6~8个月时萌出,约1岁半时牙根发育完成.采集标本时该牙在幼儿口腔内存留已接近或超过5年时间,早已过了乳牙釉质的萌出后成熟阶段.另一方面,也有研究显示萌出后成熟现象可能表现为釉质表层的钙磷比值显着增大,而钙磷含量无统计学差异[7].本实验结果表示清楚,固然处于替牙期的下颌乳中切牙在儿童口腔内存留时间不同,但釉质表层的钙含量是一样的.本研究结果中下颌乳中切牙釉质表层50m内不同深度的钙含量无统计学差异不同.用扫描电子显微镜观察乳牙釉质的断面,表层内约30m左右未见釉柱构造,结晶排列与牙外表成直角[5].本研究结果提示,此乳牙釉质外表无釉柱表层中的钙含量与外表下40m、50m处钙含量一样.之前的研究报道说明下颌乳中切牙釉质表层下50m和100m处钙含量差异无统计学意义,它们均显着高于釉质表层下250m处钙含量[9].由此推断下颌乳中切牙釉质表层100m范围内钙含量是一致的,而且是一个高度钙化的区域.许强等[10]关于乳前牙及乳磨牙釉质钙元素的分析得出同样结论.多项研究表示清楚,釉质表层与外环境不断进行着离子交换,其表层内元素含量是动态变化的[11-13].乳牙釉质表层高钙化区域可能与口腔环境,尤其是唾液的影响有关[11].Driessens等[8]用电子探针显微分析仪测定第三磨牙和前磨牙釉质表层100m内钙含量,间隔2m测定一点,结果显示在整个100m范围内钙含量是一致的,其研究对象是恒牙,但与本研究结果有类似之处.龋病发生早期脱矿与再矿化交替进行,可看作是钙和磷酸盐移出、移进釉质的动力学经过,这华而不实钙离子的运动起了重要作用.LeGeros等[14]研究以为牙齿晶体构造中的钙、磷等含量与龋易感性有关.而本研究结果显示乳牙釉质表层50m内平均钙含量及不同深度钙含量在不同龋患状况组之间无统计学差异.在乳牙釉质表层钙含量与个体龋患状况的多项等级相关分析中,仅釉质外表下40m钙含量与dft之间呈低度负相关关系(r=-0.3573,P0.05).此现象能否与乳牙釉质外表约30m厚的无釉柱表层的存在有关还需进一步研究.Derise等[15]研究表示清楚,正常恒牙釉质和牙本质的矿物质含量与龋失补牙数(DMFT)之间有一定相关性,r值在-0.17~-0.35之间,本研究结果的r值与其相近.通过本研究能够推断,正常乳牙釉质表层的钙含量差异不是影响龋病发生的主要因素,不能作为反映个体龋患状况的单一指标.龋病的发生遭到全身和局部各种因素的影响.在龋病的牙齿易感性方面,除了钙、磷含量外,还包括气孔率和浸透性、微量元素组成、不同化学相晶体的构成和转化等.除此之外,牙齿的解剖形态及在牙列中的位置也与龋易感性有关.因而,在研究牙齿对龋病的易感性时,单纯的钙含量值仅为参考指标之一.[参考文献][1]SilverstoneLM.Laboratorystudiesonthedemineralizationandremineralizationofhumanenamelinrelationtocariesmechanisms[J].AustDentJ,1980,25(3):163-168.[2]KoulouridesT,CameronB.Enamelremineralizationasafactorinthepathogenesisofdentalcaries[J].JOralPathol,1980,9(5):255-269.[3]ShimonoT,MjzunoJ,NonomuraE,etal.Studiesonanewcariesactivitytest(cariostat):ComparisonwiththeSnyderTest[J].Ja-panJPedod,1976,14:6.[4]陈涛.电子探针试样外表喷碳经过的自动控制[J].电子显微学报,1988,7(3):291.[5]石四箴.儿童口腔医学[M].2版.人民卫生出版社,2003:39-46.[6]HeB,HuangS,ZhangC,etal.Mineraldensitiesandelementalcontentindifferentlayersofhealthyhumanenamelwithvaryingteethage[J].ArchOralBiol,2018,56(10):997-1004.[7]吕若静,李玉晶,姚培.初萌年轻恒牙釉质组织构造的特点[J].北京口腔医学,2005,11(3):125-127.[8]DriessensFC,HeijligersHJ,BorggrevenJM,etal.Posteruptivematurationoftoothenamelstudiedwiththeelectronmicroprobe[J].CariesRes,1985,19(5):390-395.[9]刘芸,石四箴.电子探针分析乳牙釉质和牙本质钙含量的研究[J].当代口腔医学杂志,2018,25(6):420-423.[10]许强,石四箴,汪饶饶,等.乳牙釉质13种化学元素的微量分析[J].上海医学,2007,30(10):757-760.[11]Meyer-LueckelH,TschoppeP,KielbassaAM.EffectofvariousCa2+/PO3-4concentrationsoflinseed-basedsalivasubstitutesonenamelinvitro[J].JOralRehabil,2006,33(10):760-766.[12]WeatherellJA.Compositionofdentalenamel[J].BrMedBull,1975,31(2):115-119.[13]NishiokaY,NakagakiH,KatoS,etal.Fluorideprofilesindifferentsitesofapproximalsurfacesofsecondprimarymolarsaftertopicalapplicationofacidulatedphosphatefluoridegelinvivo[J].ArchOralBiol,1995,40(12):1157-1161.[14]LeGerosRZ.Chemicalandcrystallographiceventsinthe