对氨基苯甲酸酯类药物的分析

对氨基苯甲酸酯类药物的分析第一页，共七十一页，2022年，8月28日苯佐卡因第二页，共七十一页，2022年，8月28日盐酸丁卡因第三页，共七十一页，2022年，8月28日盐酸普鲁卡因胺第四页，共七十一页，2022年，8月28日酰苯胺类药物(苯胺的酰基衍生物)的基本结构第五页，共七十一页，2022年，8月28日非那西丁（对乙酰氨基苯乙醚,解热镇痛药）对乙酰氨基酚（扑热息痛）第六页，共七十一页，2022年，8月28日盐酸利多卡因第七页，共七十一页，2022年，8月28日盐酸布比卡因第八页，共七十一页，2022年，8月28日

盐酸罗派卡因(S)-N-(2,6-二甲基苯基)-1-正丙基哌啶-2-甲酰胺盐酸盐一水合物。

第九页，共七十一页，2022年，8月28日一、结构与性质

（一）具有芳伯氨基或潜在的芳伯氨基，可用重氮化—偶合反应鉴别或亚硝酸钠滴定法测定含量，可与芳醛发生缩合反应，易氧化变色。如酰氨基邻位存在甲基，空间位阻难于水解，较稳定。

第十页，共七十一页，2022年，8月28日

（三）具脂烃胺侧链，弱碱性，可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴别或非水碱量法测定含量。水溶液无法直接滴定，需用非水滴定。（四）游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。（二）酯键或酰胺键易水解第十一页，共七十一页，2022年，8月28日（五）盐酸利多卡因（布比卡因，罗哌卡因）分子结构酰胺基氮可在水溶液中与铜离子或钴离子络合，生成有色配位化合物沉淀，沉淀可溶于氯仿显色。第十二页，共七十一页，2022年，8月28日（六）UV（七）IR第十三页，共七十一页，2022年，8月28日二、鉴别试验

（一）重氮化—偶合反应

芳香第一胺类鉴别反应

第十四页，共七十一页，2022年，8月28日盐酸普鲁卡因第十五页，共七十一页，2022年，8月28日

直接：盐酸普鲁卡因、盐酸氯普鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺

间接：对乙酰氨基酚第十六页，共七十一页，2022年，8月28日盐酸普鲁卡因ChP（2010）[鉴别]（1）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录Ⅲ）取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。

第十七页，共七十一页，2022年，8月28日对乙酰氨基酚ChP（2005）[鉴别]（2）取本品约0.1g，加稀盐酸5m1，置水浴中加热40分钟，放冷；取0.5m1，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水3ml稀释后，加碱性β-萘酚试液2m1，振摇，即显红色。第十八页，共七十一页，2022年，8月28日盐酸丁卡因不具有芳伯氨基，分子结构中的芳香仲胺在酸性溶液中与亚硝酸钠反应，生成白色沉淀，与具有芳伯氨基的同类药物区别。第十九页，共七十一页，2022年，8月28日（二）与金属离子反应

1.与铜和钴离子反应

苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸氯普鲁卡因和盐酸丁卡因等不发生此反应。第二十页，共七十一页，2022年，8月28日第二十一页，共七十一页，2022年，8月28日

与汞离子的反应

2．羟肟酸铁盐反应

第二十二页，共七十一页，2022年，8月28日第二十三页，共七十一页，2022年，8月28日（三）水解产物的反应

1.盐酸普鲁卡因ChP（2010）[鉴别]（2）取本品约0.1g，加水2ml溶解后，加10％氢氧化钠溶液1ml，即生成白色沉淀；加热，变为油状物；继续加热，产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。

第二十四页，共七十一页，2022年，8月28日第二十五页，共七十一页，2022年，8月28日第二十六页，共七十一页，2022年，8月28日2.苯佐卡因ChP（2010）[鉴别]（2）取本品约0.1g，加氢氧化钠试液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。第二十七页，共七十一页，2022年，8月28日第二十八页，共七十一页，2022年，8月28日

（四）制备衍生物测熔点1．三硝基苯酚衍生物

盐酸利多卡因ChP（2010）[鉴别]取本品0.2g，加水20ml溶解。（1）取溶液10ml，加三硝基苯酚试液10ml，即生成沉淀；滤过，沉淀用水洗涤后，干燥，依法测定（附录ⅥC），熔点为228～232℃，熔融时同时分解。第二十九页，共七十一页，2022年，8月28日2.硫氰酸盐衍生物

盐酸丁卡因ChP（2010）[鉴别]（1）取本品约0.1g，加5%醋酸钠溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸铵溶液1ml，即析出白色结晶；滤过，结晶用水洗涤，在80℃干燥，依法测定（附录ⅥC），熔点约为131℃。第三十页，共七十一页，2022年，8月28日

盐酸布比卡因、盐酸普鲁卡因胺ChP（2010）[鉴别]（2）取本品，精密称定，按干燥品计算，加0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，照分光光度法（附录ⅣA）测定，在263nm与271nm的波长处有最大吸收；其吸收度分别为0.53～0.58与0.43～0.48。（五）UV

第三十一页，共七十一页，2022年，8月28日（六）IR

盐酸布比卡因ChP（2005）[鉴别]（3）本品的红外光吸收图谱与对照的图谱（光谱集324图）一致。第三十二页，共七十一页，2022年，8月28日一.盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查

检查方法

HPLC杂质对照品法

杂质来源水解产生

第三节、特殊杂质与检查第三十三页，共七十一页，2022年，8月28日第三十四页，共七十一页，2022年，8月28日供试液:盐酸普鲁卡因0.2mg/ml对照品:对氨基苯甲酸1g/ml溶液。固定相：C18流动相：0.1%庚烷磺酸钠的0.05MKH2PO4（pH3.0）-甲醇（68:32）检测波长：279nm第三十五页，共七十一页，2022年，8月28日二.盐酸氯普鲁卡因注射液中有关物质和光解产物的检查杂质：4-氨基-2-氯苯甲酸来源：生产、贮藏

第三十六页，共七十一页，2022年，8月28日【杂质检查】USP30-NF25:HPLC-MS分析色谱条件：ZobaxSB-C18，流动相：0.5%乙酸水溶液-0.5%乙酸乙腈溶液(87:13),流速1ml/min，检测波长：254nm质谱条件:ESI(+),质量扫描范围:80~600,喷雾电压4000V,等第三十七页，共七十一页，2022年，8月28日m/z:253,盐酸羟普鲁卡因[M+1]+

，盐酸氯普鲁卡因光水解产物m/z:172,[M+1]+4-氨基-2-氯苯甲酸准分子离子峰第三十八页，共七十一页，2022年，8月28日（一）亚硝酸钠滴定法1.原理具芳伯氨基的药物四、含量测定

第三十九页，共七十一页，2022年，8月28日ChP(2010年):苯佐卡因,盐酸普鲁卡因及其注射液,盐酸普鲁卡因胺片剂及其注射液第四十页，共七十一页，2022年，8月28日

具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚、醋氨苯酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。

第四十一页，共七十一页，2022年，8月28日第四十二页，共七十一页，2022年，8月28日2.主要测定条件（1）加入适量KBr加速反应

NaNO2+HCl→HNO2+NaClHNO2+HCl→NOCl+H2O

重氮化反应的机理为：第四十三页，共七十一页，2022年，8月28日第四十四页，共七十一页，2022年，8月28日（1）K1（2）K2

∵K1≈300K2

加入KBr，可增大溶液中NO+亚硝酰离子的浓度，加快重氮化反应速度第四十五页，共七十一页，2022年，8月28日（2）酸的种类及其浓度在不同酸中重氮化反应的速度为：HBr＞HCl＞H2SO4＞HNO3第四十六页，共七十一页，2022年，8月28日盐酸1:2.5～6；加入盐酸：①重氮化反应速度加快；②重氮盐在酸性溶液中稳定；③防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果第四十七页，共七十一页，2022年，8月28日第四十八页，共七十一页，2022年，8月28日（3）室温条件下滴定10～30℃（4）滴定速度：先快后慢滴定管尖端插入液面下2/3处，滴定液一次大部分放下，近终点时方改为慢速滴定第四十九页，共七十一页，2022年，8月28日3.指示终点的方法（1）永停滴定法

ChP（2005）、BP第五十页，共七十一页，2022年，8月28日第五十一页，共七十一页，2022年，8月28日永停滴定法（附录ⅦA）调节R1使加于电极上的电压约为50mV。取供试品适量，精密称定，加水40ml与盐酸溶液（1→2）15ml，搅拌使溶解，再加溴化钾2g，插入铂—铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L或0.05mol/L）迅速滴定，至近终点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，继续缓缓滴定，至电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。第五十二页，共七十一页，2022年，8月28日亚硝酸钠永停滴定法原理终点前：无可逆电对，无电流产生，电流计指针停止在“0”位终点后：过量NaNO2阳极：NO+H2OHNO2+H++eHNO2+H++e阴极：NO+H2O电路有电流通过，电流计指针突然偏转并不再回“0”第五十三页，共七十一页，2022年，8月28日（2）电位法（3）外指示剂法

KI—淀粉糊剂或试纸2NaNO2+2KI+4HCl→2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O

（4）内指示剂法中性红不可逆指示剂第五十四页，共七十一页，2022年，8月28日4.测定方法

盐酸普鲁卡因ChP（2005）取本品约0.6g，精密称定，照永停滴定法（附录ⅦA），在15～25℃，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于27.28mg的C13H20N2O2·HCl第五十五页，共七十一页，2022年，8月28日（二）非水溶液滴定法脂烃胺侧链，具弱碱性.盐酸丁卡因,盐酸利多卡因，盐酸布比卡因侧链上的叔胺氮具有弱碱性，均可采用非水溶液滴定法测定含量。

原理:第五十六页，共七十一页，2022年，8月28日溶剂:醋酸或冰醋酸或酸酐标准溶液:HClO4指示剂:结晶紫（或萘酚苯）结晶紫：紫色（碱式色）终点:蓝色或绿色（黄绿色）加入醋酸汞作用:除去氢卤酸的干扰蓝色、绿色、黄绿色、黄色（酸式色）pH第五十七页，共七十一页，2022年，8月28日滴定盐酸丁卡因时，加入适量醋酐。因醋酐解离生成的醋酐合乙酰氧离子比醋酸合质子的酸性还强，有利于丁卡因碱性的增强，使滴定突跃敏锐。

2(CH3CO)2O—(CH3CO)3O+十CH3COO—第五十八页，共七十一页，2022年，8月28日【盐酸利多卡因的测定】取本品0.2g，精密称定，加冰醋酸溶解后，加醋酸汞5ml与结晶紫指示剂1滴，用HClO4滴定液（0.1mol/L)滴至溶液显绿色，将滴定的结果用空白试验校正。每1mlHClO4滴定液（0.1mol/L)相当于27.08mg的C14H22N2O.HCl第五十九页，共七十一页，2022年，8月28日盐酸利多卡因非水溶液滴定法反应过程如下：

第六十页，共七十一页，2022年，8月28日（三）紫外分光光度法

对乙酰氨基酚在0.4％氢氧化钠溶液中，于257nm波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱特征，可用于其原料及其制剂的含量测定。

第六十一页，共七十一页，2022年，8月28日对乙酰氨基酚ChP（2005）

取本品约40mg，精密称定，置25ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液5.0ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5m1，置100ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液10m1，加水至刻度，摇匀，在257nm的波长处测定吸收度，按C8H9NO2的吸收系数为715计算，即得。第六十二页，共七十一页，2022年，8月28日原料药

吸收系数法

USP（25）对照法

第六十三页，共七十一页，2022年，8月28日（四）高效液相色谱法对乙酰氨基酚泡腾片:色谱条件:柱C18,流动相:甲醇-水(pH4.5磷酸缓冲液);检测波长:254第六十四页，共七十一页，2022年，8月28日取10片片剂,称取其质量流动相溶解定容至50ml过滤取续滤液10ml定容至50ml,得供试液,精密量取10l