实验细菌的人工培养

实验细菌的人工培养第一页，共二十四页，2022年，8月28日实验目的了解人工培养基的制作。了解细菌的接种方法分离培养方法——平板划线法（混合菌液）了解细菌的生长现象与代谢产物液体、固体、半固体培养基乳糖发酵实验硫化氢实验第二页，共二十四页，2022年，8月28日实验内容琼脂平板的制作

紫外线杀菌实验咽拭实验分组实验皮肤消毒实验空气中细菌计数实验药敏实验

常用消毒器械的介绍

第三页，共二十四页，2022年，8月28日

一、人工培养基的制备和种类1.制备原则2.制备程序3.常用培养基的分类

第四页，共二十四页，2022年，8月28日1.制备原则（1）适当的营养成分；（2）合适的酸碱度；（3）配制后经灭菌使之无菌，方可应用。第五页，共二十四页，2022年，8月28日2.制备程序配料→熔化→测定及矫正PH→滤过→分装→灭菌→备用第六页，共二十四页，2022年，8月28日3.常用培养基的分类（一）按物理性状分：液体培养基固体培养基:1.5～2.5%琼脂

半固体培养基:0.3～0.5%琼脂（二）按用途不同可分：基础培养基；营养培养基；选择培养基；鉴别培养基；厌氧培养基。第七页，共二十四页，2022年，8月28日二.细菌接种法1.平板培养基接种法（操作）

2.斜面培养基接种法（示教）

3.液体培养基接种法（示教）

4.半固体培养基接种法（示教）

第八页，共二十四页，2022年，8月28日

1.平板培养基接种法（操作）密集划线法分区划线法

第九页，共二十四页，2022年，8月28日接种大肠杆菌接种枯草杆菌班级、姓名/学号、大肠枯草uv30’培养箱第十页，共二十四页，2022年，8月28日第十一页，共二十四页，2022年，8月28日培养基的用途菌落

液体：增菌、纯培养半固体：动力、保存菌种固体平板：用于分离培养第十二页，共二十四页，2022年，8月28日三.细菌生长现象及代谢产物观察（示教）1.细菌在培养基中的生长现象（1）液体培养基：混浊、菌膜和沉淀。（2）固体培养基：菌落和菌苔。（3）半固体培养基：沿穿刺线生长，穿刺线清晰，周围培养基仍为透明，动力阴性；穿刺线向周围扩散生长，穿刺线模糊，整个培养基变成混浊，动力阳性。2.细菌的代谢产物观察（1）细菌对糖分解产物观察（2）细菌对氨基酸分解产物观察第十三页，共二十四页，2022年，8月28日（1）液体培养基均匀混浊生长（葡萄球菌）菌膜形成（枯草芽孢杆菌）沉淀生长（链球菌）第十四页，共二十四页，2022年，8月28日（2）固体培养基形成菌落和菌苔。观察菌落的大小、形态、透明度、颜色、表面和边缘情况及菌落周围有无溶血环等。第十五页，共二十四页，2022年，8月28日（3）半固体培养基可用于观察细菌有无动力。痢疾志贺菌沿穿刺线生长，穿刺线清晰，周围培养基仍为透明，动力阴性；大肠埃希菌沿穿刺线向周围扩散生长，穿刺线模糊，整个培养基变成混浊，动力阳性。第十六页，共二十四页，2022年，8月28日2.细菌的代谢产物观察（1）细菌对糖分解产物观察

方法：将大肠埃希菌和伤寒沙门菌分别接种于葡萄糖、乳糖发酵培养基中，置37度24小时培养后观察结果。结果：大肠埃希菌分解葡萄糖、乳糖，产酸产气；伤寒沙门菌分解葡萄糖产酸不产气，不分解乳糖。第十七页，共二十四页，2022年，8月28日糖发酵试验第十八页，共二十四页，2022年，8月28日2.细菌的代谢产物观察（2）细菌对氨基酸分解产物观察

靛基质试验：分别接种大肠埃希菌和伤寒沙门菌于蛋白胨水培养基（含色氨酸）内，置37度24小时培养后，然后沿管壁徐徐加入靛基质试剂（对二甲基醛）数滴，静置片刻，在两液界面出现红色环者为靛基质试验阳性（大肠埃希菌），无红色环者为阴性（伤寒沙门菌）。第十九页，共二十四页，2022年，8月28日Indol实验生化反应——Indol实验第二十页，共二十四页，2022年，8月28日2.细菌的代谢产物观察（2）细菌对氨基酸分解产物观察硫化氢试验：将细菌接种于含有硫酸亚铁或醋酸铅的培养基（如双糖培养基）中，若细菌分解培养基中含硫的氨基酸产生硫化氢，硫化氢可与硫酸亚铁或醋酸铅反应，生成黑色的硫化铁或硫化铅沉淀，为硫化氢试验阳性（乙型副伤寒沙门菌），若细菌不能分解含硫的氨基酸则无黑色沉淀形成，为硫化氢试验阴（大肠埃希菌）。第二十一