标准解读
GB/T 19563-2004 是一项中华人民共和国国家标准,全称为《大豆种子品种鉴定实验方法 简单重复序列间区法》。该标准于2004年发布,旨在为大豆种子的品种鉴定提供一套科学、统一的方法,以确保种子质量控制和新品种保护工作的准确性与规范性。
标准适用范围
本标准适用于大豆(Glycine max (L.) Merr.)种子及其实物样品的品种真实性鉴定。通过应用简单重复序列间区(Simple Sequence Repeats, SSR)分子标记技术,对大豆品种进行遗传身份验证,帮助区分不同品种间的遗传差异,从而实现对大豆种子品种的精确识别。
技术原理
SSR是一种基于DNA水平的分子标记技术,它利用存在于基因组中的简单重复核苷酸序列(如CA、AG等)作为标记点。这些重复序列在不同品种间存在长度多态性,即重复次数的差异,可通过PCR扩增并电泳分离,比较条带图谱来鉴别品种间的遗传差异。
实验流程
- 样本采集与保存:按照标准要求采集大豆种子或植株样本,确保样本的代表性与完整性。
- DNA提取:从样本中提取高质量的总DNA,为后续的PCR反应提供模板。
- 选择引物:根据已知的大豆SSR位点信息,选择具有高多态性的SSR引物对。
- PCR扩增:使用选定的引物对DNA模板进行聚合酶链式反应(PCR),扩增包含SSR序列的目标片段。
- 电泳分析:将PCR产物通过凝胶电泳分离,依据片段大小的不同形成特定的条带图谱。
- 数据记录与分析:记录电泳图谱,比较不同样品间的条带差异,利用专业的生物信息学软件进行数据分析,以确定品种间的遗传相似度和差异。
标准意义
该标准的实施有助于提高大豆种子质量监控水平,防止品种混淆和假冒,保护种植者与育种者的权益。同时,也为大豆遗传资源的管理和新品种的注册、保护提供了科学依据和技术支持,促进了大豆品种改良和遗传多样性研究的发展。
注意事项
- 实验过程中需严格遵守操作规程,确保实验结果的准确性和可重复性。
- 选择的SSR引物应具有良好的特异性和多态性,以提高鉴定的分辨率。
- 数据分析时,综合考虑多个SSR位点的结果,以提高鉴定的准确性。
如需获取更多详尽信息,请直接参考下方经官方授权发布的权威标准文档。
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- 废止
- 已被废除、停止使用,并不再更新
- 2004-06-22 颁布
- 2004-12-01 实施




文档简介
ICS65.020.01B21中华人民共和国国家标准GB/T19563—2004大豆种子品种鉴定实验方法简单重复序列间区法Experimentalidentifieationmethodforvarietyofsoybeanseed-ISSR2004-06-22发布2004-12-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布中国国家标准化管理委员会
GB/T19563一2004前本标准的附录A为规范性附录。本标准由国家质量监督检验检疫总局提出本标准起草单位:国家农业标准化监测与研究中心(黑龙江)黑龙江省质量技术监督局.本标准主要起草人:王庆贵、徐品、姜雯、李光宇、石绍业、郝兆军。
GB/T19563—2004目前.我国农作物种子的鉴定多采用种植鉴定、快速测定法(苯酚染色法、大豆种皮愈创木酚染色法、高梁种子氢氧化钾-漂白粉测定法、燕麦种子荧光测定法、小麦种子氢氧化钾测定法)、聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定大麦、小麦种子纯度等。这些方法所需的检验周期较长.虽然电泳法所需时间短,但不具备分子水平鉴定的诸多优点。随着分子生物学的发展,特别是20世纪90年代以来.分子生物学的相关技术已被广泛应用.其检测对象为DNA大分子——生物的遗传基础。以DNA为检测对象,具有许多其他检测水平所不具备的优点:首先.可供探测DNA标记的数量是无限的.这是同工酶技术所无法比拟的;其二.DNA分析技术不像其他技术那样随组织或发育阶段而异,植物体任何部位、任何时期提供的DNA均可用于分析,其检测结果都是一样的:第三.DNA分析不受环境影响,其变异只源干等位基因DNA序列的变异.这和稳定性便于揭示品种间的遗传变异,从而排除了环境变异所造成的表型变异。基于上述优点,DNA分析技术是农、林、牧、渔等品种鉴定的先进方法
GB/T19563-2004大豆种子品种鉴定实验方法简单重复序列间区法1范围本标准规定了大豆种子品种鉴定的实验方法。本标准适用于利用简单重复序列间区(ISSR)法对大豆种子品种鉴定的实验过程2术语、定义和缩略语2.1术语和定义下列术语和定义适用于本标准2.1.1聚合酶链式反应polymerasechainreaction少至一个拷贝的特定碱基顺序的DNA片断在体外花费几个小时即可扩增出数百万个分子的酶催化反应,即DNA合成反应2.1.2简单重复序列间区inter-simplesequencerepeat是在PCR技术基础上发展起来的一种分子标记和检测方法·根据某个简单重复序列(微卫星位点)设计出一系列特异引物,通过PCR反应扩增微卫星位点间隔的碱基顺序,以检测其扩增片段长度的多态性。2.1.3微卫星DNAmmicrosatelliteDNA是一类由几个核苷酸(一般为1个~5个)为重复单位的长达几十至几百个核音酸的串联重复庆列。2.1.4核谷酸nuclcotide是构成核酸的基本单元,由三部分组成:五碳糖、磷酸和环状的含氮碱基2.1.5引物primer一条互补结合在模板DNA链上的短的单链,提供3-OH末端作为DNA合成的起点,延伸合成模板DNA的互补链。2.1.6引物扩增多态性primeramplifiedpolymorphism-对引物在两个或两个以上不同材料基因组DNA之间扩增,得到数目不同或长度不同的DNA片断。2.2缩略语下列缩略语适用于本标准ISSR简单重复序列间区(Inter-SimpleSequence
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