GB/T 18637-2018牛病毒性腹泻/粘膜病诊断技术规范

ICS11220

B41.

中华人民共和国国家标准

GB/T18637—2018

代替

GB/T18637—2002

牛病毒性腹泻/粘膜病诊断技术规范

Technicalspecificationsfordiagnosisofbovineviraldiarrhea/mucosaldisease

2018-09-17发布2019-04-01实施

国家市场监督管理总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T18637—2018

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准代替牛病毒性腹泻粘膜病诊断技术除编辑性修改外主要技术变

GB/T18637—2002《/》,,

化如下

:

增加了临床诊断方法见第章

———“”(4);

增加了实时荧光检测见

———“RT-PCR”(5.4)。

本标准由中华人民共和国农业农村部提出

。

本标准由全国动物卫生标准化技术委员会归口

(SAC/TC181)。

本标准起草单位中国兽医药品监察所中华人民共和国北京出入境检验检疫局扬州大学中华人

:、、、

民共和国宁夏出入境检验检疫局中华人民共和国天津出入境检验检疫局中国动物卫生与流行病学

、、

中心

。

本标准主要起草人李俊平刘环印春生陶洁郝俊虎蒲静范学政吴华伟孙淼王建华

:、、、、、、、、、、

宋建德朱国强

、。

本标准所代替标准的历次版本发布情况为

:

———GB/T18637—2002。

Ⅰ

GB/T18637—2018

引言

牛病毒性腹泻粘膜病简称是由牛病

/(BovineViralDiarrhea/MucosalDisease,BVD/MD,BVD),

毒性腹泻粘膜病病毒简称感染

/(BovineViralDiarrhea/MucosalDiseaseVirus,BVD/MDV,BVDV)

牛引起的以发热粘膜糜烂溃疡白细胞减少腹泻咳嗽及怀孕母牛流产或产出畸形胎儿为主要特征的

、、、、

一种传染病在分类学上属黄病毒科Flaviviridae瘟病毒属Pestivirus是瘟病毒属的代

。BVDV(),(),

表种目前国际病毒分类委员会确定的有二个基因型或种分别是和它

,BVDV(),BVDV-1BVDV-2。

们与同属的猪瘟病毒及羊边界病病毒

(ClassicalSwineFeverVirus,CSFV)(BorderDiseaseVirus,

之间存在着结构与抗原相关性在血清学上有部分交叉反应引起的疫病呈全球分布

BDV),。BVDV-1,

较为常见而引发的疫病不多见二个基因型的病毒均可根据其在培养细胞上能否产生细胞

,BVDV-2。

病变而被分为二个生物型即致细胞病变型和非致细胞病变型

,(Cytopathictype,CP)(Non-cytopathic

毒株是引起所有感染和发病类型的生物型而毒株主要出现在粘膜病病例

type,NCP)。NCP,CP。

目前该病在世界范围内广泛流行我国于年首次分离到了近年来病原学调查表明

,,1983BVDV。,

我国牛羊鹿猪等均不同程度的感染该病已严重影响着我国畜牧业的健康发展

、、、BVDV,。

本标准中所描述的方法均为近几年我国在诊断过程中常用的方法包括临床诊断病原学诊

BVD,、

断及血清学诊断技术血清学诊断技术为病毒中和试验病原学诊断技术包括病毒分离鉴定和实时荧

。。

光检测方法本标准中的检测方法具有特异

RT-PCR(Real-timeRT-PCR),Real-timeRT-PCRBVDV

性能够同时检测和且能特异区分与

,BVDV-1BVDV-2,BVDVCSFV。

结合我国动物防疫相关法律法规和政策本标准能够有效地诊断和监测我国的发生和

、,BVD/MD

流行

。

Ⅱ

GB/T18637—2018

牛病毒性腹泻/粘膜病诊断技术规范

1范围

本标准规定了牛病毒性腹泻粘膜病的流行病学临床症状病理变化等临床诊断及样品采集与处

/、、,

理病毒分离与鉴定检测及病毒中和试验等实验室诊断的技术要求和操作规范

、、Real-timeRT-PCR。

本标准适用于检测不同样品中的型和型牛病毒性腹泻粘膜病病毒核酸及抗体水平

12/、。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

禽流感病毒通用荧光检测方法

GB/T19438.1—2004RT-PCR

实验室生物安全通用要求

GB19489

实验室质量控制规范动物检疫

GB/T27401

3缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

牛鼻甲骨细胞

BT:(BovineTurbinatecell)

牛病毒性腹泻粘膜病

BVD/MD:/(BovineViralDiarrhea/MucosalDisease)

牛病毒性腹泻粘膜病病毒

BVD/MDV:/(BovineViralDiarrhea/MucosalDiseaseVirus)

致细胞病变效应

CPE:(CytopathicEffect)

致细胞病变型

CP:(Cytopathictype)

互补

cRNA:RNA(ComplementRNA)

每个反应管内的荧光信号量达到设定的阈值所经历的循环数

Ct(Cp):(CycleThreshold,or

CrossingPoint)

焦碳酸二乙酯

DEPC:(DiethylPyrocarbonate)

羧基荧光素

FAM:(Carboxyfluore