标准解读
GB/T 17999.3-1999是一项中国国家标准,全称为《SPF鸡 血清平板凝集试验》。该标准详细规定了使用无特定病原体(Specific Pathogen Free,简称SPF)鸡进行血清平板凝集试验的方法、操作步骤、判定标准及注意事项,旨在为兽医学研究、疫苗效力评估及疾病诊断提供统一的实验操作规范和技术要求。
标准内容概览
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范围:明确了标准适用的对象和目的,即适用于使用SPF鸡血清对特定抗原(如细菌、病毒抗原)进行的平板凝集试验,用于检测血清中的抗体或评估免疫反应。
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规范性引用文件:列出了实施本标准时所依据的其他标准或文件,确保试验方法的准确性和可比性。
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术语和定义:对标准中涉及的专业术语进行了解释,帮助读者理解相关概念。
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试剂与材料:详细描述了进行试验所需的各种试剂、缓冲液、抗原制备及SPF鸡血清的来源与要求,确保实验材料的质量控制。
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仪器设备:列举了进行平板凝集试验所需的实验室器材,如恒温培养箱、离心机、显微镜等,并对其性能要求进行了说明。
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试验方法
- 样品准备:包括血清的采集、处理及保存条件。
- 抗原制备:具体步骤和要求,确保抗原的纯度和浓度适合试验。
- 试验操作:详述了如何进行血清稀释、抗原添加、混合及孵育过程,以及观察和记录凝集现象的方法。
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结果判定:提供了判定凝集反应阳性和阴性的标准,通常基于凝集颗粒的大小、形态及分布等特征来决定。
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试验报告:规定了试验报告应包含的信息,如试验日期、样品信息、试验条件、观察结果及结论等,以保证试验记录的完整性和可追溯性。
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安全与防护:强调了在操作过程中应注意的生物安全和个人防护措施,以防操作人员受到感染或伤害。
注意事项
- 重视无菌操作,防止试验污染。
- 精确控制试验条件,如温度、时间等,以保证结果的重复性和准确性。
- 试验前应对所有试剂和材料进行质量验证,确保试验有效性。
- 结果解释需结合临床症状和其他实验室检测结果,以提高诊断准确性。
该标准通过上述各部分内容,为SPF鸡血清平板凝集试验提供了一套科学、系统的操作指南,对于提升兽医检测工作的标准化水平具有重要意义。
如需获取更多详尽信息,请直接参考下方经官方授权发布的权威标准文档。
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文档简介
TCS.65.020.30B41中华人民共和国国家标准GB/T17999.3-1999SPF鸡血清平板凝集试验SPFchicken-Serumplateagglutinationtest1999-11-10发布2000-04-01实施国家质量技术监督局发布
GB/T17999.3-1999本标准参照农业部1992年版《鸡白痛-鸡伤寒沙门氏菌多价染色平板凝集抗原与阴、阳性血清制备及检验规程》编制而成。SPF鸡微生物学质量控制国家系列标准.包括SPF鸡微生物学监测总则和9种SPF鸡微生物学检测方法。本标准为《SPF鸡血清平板凝集试验》。SPF鸡微生物学检测方法还包括以下部分:GB/T17999.1—1999SPF鸡红细胞凝集抑制试验;GB/T17999.2—1999SPF鸡咖清中和试验:GB/T17999.4—1999SPF鸡琼脂扩散试验GB/T17999.5—1999SPF鸡酶联免疫吸附试验;GB/T17999.6—1999SPF鸡胚敏感试验;GB/T17999.7—1999SPF鸡鸡白痫沙门氏菌检验;GB/T17999.8—1999SPF鸡试管凝集试验:GB/T17999.9—1999SPF鸡间接免疫荧光试验本标准由中华人民共和国农业部、国家科学技术部提出本标准由农业部畜牧兽医司归口本标准起草单位:中国兽药监察所、农业部实验动物研究中心本标准主要起草人:张学琴、陈德威、赵立红
中华人民共和国国家标准GB/T17999.3-1999SPF鸡血清平板凝集试验SPFchicken--Serumplateagglutinationtest1范围本标准规定了鸡血清平板凝集试验所用试剂、材料,操作程序及结果判定等本标准适用于SPF鸡感染以下病原菌后的凝集抗体的监测:鸡白痛沙门氏菌(Salmomellaullorum)、鸡毒支原体(Nvcoplasmagallisepiicum)、滑液囊支原体(Ncoplasmasynouiae)、副鸡曙血杆T(HaemophilusDaragallinarrma2原理血清平板凝集试验是细菌性抗原与相应的抗体结合后,在适量的电解质参与下,经过一段时间出现肉眼可见的凝集现象。常采用已知的标准细菌性抗原液检测相应的凝集抗体3试剂和材料3.1试剂3.1.1凝集抗原。3.1.2阴性、阳性血清。3.1.3被检血清。3.2材料3.2.1玻璃板。3.2.2移液器(TD10L~200%l)及吸头。4操作程序4.1使用前10min~20min自冰箱取出抗原、阴性或阳性血清与被检血清,使其达到室温。4.2用移液器吸取充分混勾的诊断抗原一滴(0.025mL~0.05mL)垂直滴于玻璃板上·然后迅速在抗原旁边滴加同量的被检血清一滴(0.025mL~0.05mL.).4.3用牙签使血清与抗原混合均勺,涂布成直径为1cm~2cm的片状,不断摇动玻璃板,2min内观察结果。4.4试验应在20C~25C条件下进行。4.5每批试验应设阳性血清与阴性血清对照。5结果判定在2min内出现50%(十十)以上凝集者为阳性,2min
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