标准解读
GB/T 17494-1998是一项关于马传染性贫血病(Equine Infectious Anemia, EIA)检测的技术规范,具体聚焦于间接酶联免疫吸附试验(Indirect Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, iELISA)方法。该标准为确保实验的准确性和可比性提供了详细的指导原则和操作流程。
标准概览
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范围:规定了使用间接ELISA技术检测马血清或血浆中针对马传染性贫血病毒(EIAV)抗体的方法。适用于马属动物EIA的诊断筛查及流行病学调查。
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规范性引用文件:列出了实施本标准时应参考的其他相关国家标准或国际标准,确保试验所用试剂、设备及操作符合既定质量要求。
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术语和定义:明确了关键术语,如间接ELISA、阳性对照、阴性对照等,帮助读者理解标准中的专业词汇。
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试剂与材料:详细描述了所需试剂如抗原、酶标抗体、底物等的制备、保存条件及来源要求,以及实验所需的仪器设备标准。
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样本采集与处理:规定了采样方法、样本类型(血清或血浆)、采集后的处理步骤及储存条件,确保样本质量满足检测要求。
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试验步骤:
- 包括了从微孔板的准备、样本与试剂的加入顺序、孵育条件、洗涤步骤到显色反应及终止的全过程,每一步都有具体的操作指导和时间控制。
- 强调了实验过程中应控制的变因,如温度、湿度等,以减少实验误差。
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结果判断:基于吸光度值(OD值),制定了判断样本阳性和阴性的临界值确定方法,包括阴阳性对照的设置及结果解释准则。
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精密度与准确性:通过重复性试验和再现性试验评估方法的精密度,确保不同实验室间结果的一致性,并提供了验证方法准确性的途径。
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试验报告:要求记录实验的所有细节,包括样本信息、实验条件、结果数据及最终结论,以便追溯和审核。
实施意义
此标准旨在为兽医诊断实验室提供一套统一、标准化的iELISA检测流程,以提高马传染性贫血病诊断的可靠性和效率。通过遵循这些严格的标准操作程序,可以有效监控并控制EIA的传播,保护马匹健康,同时为马业的可持续发展提供科学依据。
如需获取更多详尽信息,请直接参考下方经官方授权发布的权威标准文档。
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文档简介
ICS.11.220B41中华人民共和国国家标准GB/T17494-1998马传染性贫血病间接ELISA技术规程RulesofindirectELISAtechniqueforequineinfectiousanemiadisease1998-08-31发布1999-01-01实施国家质量技术监督局发布
中华人民共和国国家标准马传染性贫血病间接ELISA技术规程B/T17494—1998中国标准出版社出版发行北京西城区复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045电话:63787337、637874471999年1月第一版2005年1月电子版制作书号:155066·1-15412版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533
GB/T17494-1998丽马传染性贫血病(简称马传贫,下同)的流行,曾给我国养马业造成巨大的经济损失。经过多年的防制,在全国范围内取得显著成效,已达到控制标准。为消灭马传贫,提供一个先进有效、特异敏感、反应快速、操作方便、易于推广的检测方法,是十分必要的。为此制定马传染性贫血病间接ELISA技术规程。马传贫间接ELISA技术自1983年建立以来,已在全国主要养马省区推广应用十余年之久,在马传贫防制工作中发挥了重要作用。特别是研制的试剂实现了标准化、商品化,并以低耗优质的产品质量,为该方法推广应用奠定了基础,在这方面我们已走在世界前列。本标准的附录A、附录B、附录C都是标准的附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由中华人民共和国农业部畜牧兽医司归口。本标准由中国农业科学院哈尔滨善医研究所负责起草。本标准起草人:戴玉坤。
中华人民共和国国家标准马传染性贫血病间接ELISA技术规程GB/T17494-1998RulesofindirectELISAtechniqueforequineinfectiousanemiadisease范围本标准规定了马传染性贫血病间接ELISA技术规程的测定原理、仪器设备、试剂、配制溶液、操作步骠、结果判定。本标准适用于检测马血清中的马传贫疫毒抗体。可用于生产和经营马匹者对未注射马传贫疫苗马匹的检疫,马传贫病马的定性,也可用于对注射马传贫疫苗马匹的免疫状态进行测定、2引用标准下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时,所示版本达为有效。所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。NY127一1987马传贫酶联免疫吸附试验(ELISA间接法)抗原、酶标记抗体制造及检验试行规3测定原理用特制的马传贫病毒抗原(NY127),包被聚苯乙烯微量板孔,使免疫反应在固相载体上进行。当被检血清中有马传贫病毒抗体存在时,则与孔壁上的抗原形成抗原-抗体复合物,再与酶标记的抗体(抗马免疫球蛋白)反应,最后通过测定酶作用底物催化后的产物,进行定性、定量抗体测定。4仪器设备吸管:1mL、5mL、10mLi量桶:50mL、100mL、1000mL;烧杯:50mL、100mL;玻璃滴管:每滴体积约20~30kL;血清稀释板:20孔板每孔容积为1mL;定量加液器:1mL分装定量;微量吸液器:50KL、100L;分析天平:感量0.001g:托盘天平;
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