人工采精授精

人工授精技术

方文化

2013.8

一.猪人工授精发展概况二.公猪方面三.精液方面四.人工授精实验室的设计目录一.猪人工授精发展概况猪人工授精在中国的历史背景商业化人工授精在欧洲和美国的发展猪人工授精概述本交和人工授精的比较使用人工授精技术使母猪受孕的各种因素成功进行人工授精的操作规程和8个步骤人工授精经常可能遇到的问题猪人工授精在中国的历史背景1.传统上，运用人工授精使母猪受孕在中国非常普及。1)群体非常小2)中国本地母猪发情特征明显，持续时间长。3)中国本地母猪输精一次就能受孕。4)即使母猪返情也比较小的经济压力。5)公猪的遗传基因不是显得非常重要。猪人工授精在中国的历史背景2.从二十世纪八十年代开始，中国引进了大量的西方品种，建立了大型的现代集约化猪场。1)有经济条件在1♂:20♀的比例下购买公猪，甚至超过这一比例一到二头。2)外来母猪通过公猪的存在而刺激发情。3)为确保受孕，外来母猪在一个情期内最好进行重复配种。4)使用早期断奶技术使母猪体内从泌乳到排卵的转换过程中产生很多问题。其最终结果是，在二十世纪八十和九十年代，自然交配成为大型集约化猪场中最受欢迎的配种方式。商业化人工授精在欧洲

和美国的发展在过去10年中，猪人工授精技术有了很大的发展和突破。1)精液稀释剂的研制使采集后的精液稀释后最多能保存5-7天，每一次采集的精液能分成10-20个单独的头份。2)通过先进的授精器材，准确的发情鉴定和授精技术，更好地掌握发情周期，取得和本交一致甚至更好的结果。商业化人工授精在欧洲

和美国的发展3)通过使用人工授精技术，可以购买高质量的公猪来生产生长速度快、瘦肉率高的商品猪，因为人工授精一头公猪可以至少用在100头母猪身上，而本交一头公猪只能用在20头母猪身上。4)由于几种严重疾病的迅速传播，农场主都不愿意从几个不同的群体把活种猪引进到自己的猪场。通过从场外公猪供精站获得精液，生产自留的替换后备母猪可以把自己的猪场完全封闭起来，同时还是能得到高质量的遗传基因。人工授精技术概述猪生产中相互制约的5个环节品种改良健康饲料猪群管理生产系统影响人工授精效益的因素:1.猪群管理2.健康3.品种改良使用人工授精技术使母猪受孕的有关因素人工授精站1.公猪的管理和照料2.精液采集3.精液加工4.精液包装1.刺激母猪发情2.发情鉴定3.站立发情4.排卵配种区域5.精液储存6.使用前准备7.输精8.妊娠检测人工授精成功与否的八个技术因素管理公猪精液采集实验室的准备工作精液处理与质量控制精液分装、保存与运输发情鉴定输精妊娠诊断成功应用人工授精技术可让母猪分娩率高于85%，每窝产仔数增加0-5头二.公猪方面在公猪站里对公猪进行良好的管理调教后备公猪精液采集驯化新种公猪1.大多数的种公猪都试着对任何物体跃起爬垮2.因品种的不同其配种的兴趣也表现不同3.确认假母台上用带有公、母猪气味的分泌物涂抹好4.让新种公猪观看一头有经验的老公猪被采精的过程5.确认年轻公猪不产生疑惑6.使新公猪集中注意力于假母台的正确位置上7.保持足够耐心。每天驯化公猪不要超过20—30分钟8.不要生气愤怒或去击打公猪，如此会使公猪失去信心杜洛克大白长白我确信她们看起来不是这样！讨厌！大小子驯化新种公猪1.一些公猪在开始阶段被操作时感非常敏感2.注意于树立年轻公猪的信心3.开始几次射出精液的精子密度很低，因此收取精液并不重要4.优先要驯化新公猪快速、正确地爬跨假母台5.在一个场内精液采集站，一头发情母猪可以关在紧邻假母台的栏内以刺激公猪的性欲6.每周采集年轻公猪精液不超过一次7.至少用12头母猪进行精液配种测试，以确认其受孕率8.等到母猪产仔后进一步检测新公猪不带有任何遗传缺陷嘿！你介意吗？我很高兴于你温暖的双手好！只剩一天又该采的精液了唇裂畸型腿疝气无肛门畸型尾畸型背精液采集前实验室的准备工作1．实验室的准备工作至少在计划采精前1小时必须开始2．实验室工作人员必须穿上工作服，擦净所有工作台、墙面和地面，保持室内没有灰尘，把实验室的温度定在22-24度之间。3．打开恒温水槽，预热到37度，准备好足够的稀释液，放入恒温水槽中4．把所有的采精器皿放在预热箱中，预热到37度5．准备好采精杯，放入预热箱中6．准备好检测设备：恒温载物台、显微镜、精虫计数器7．准备好记录本、识别用标签、笔等8．当采精员要开始采精时，把预热好的采精杯放入保温运送箱中，通过传递窗口送到采精区域。开始采精的时间开始做实验室准备工作的时间橡皮圈过滤纸1升采精袋采精区域实验室精液采集区1.与公猪养殖区用墙壁和门分隔开，可以维持本室为无灰尘环境。2.严格地控制温度为18℃—24℃3.假母台牢固地安置在地板上，位于一个角落处，面朝墙角。最好使用一块配种垫放于假母台下以使公猪可以牢固蹬踏。4.必须设计一个人员安全区以预防公猪突然攻击。5.有一个通向实验室的唯一的传递窗，最好设计为双侧窗门。6.有污水出口的防滑水泥地板，以便于清洗。设计为“半清洁”工作区精液采集1.采精是第一个步骤，也是最容易受到污染的阶段。2.准备好采精杯，放上采精袋和过滤纸，预热到37度。3.把预热好的采精杯放入保温的精液运送箱中，然后拿到采精区域。4.把公猪赶到采精区域，然后诱导公猪爬上假母猪。5.把采精杯从精液运送箱中取出，放在一个安全和容易拿到的地方。6.戴上双层手套，用干净的纸巾擦洗包皮囊。7..脱掉外层手套，用手握住阴茎，引诱公猪把阴茎全部伸出来。8.让第一次射出的液体流在地上，然后用干纸巾擦干净。精液受污染的危险来自于：1．包皮尿液2．水3．包皮囊上掉下的尘土4．空气中的尘埃5．汗液以上任何一个因素都可能破坏精液的质量。保温采精杯1升的采精保鲜袋过滤纸橡皮筋两双采精手套采精杯精液采集1．当奶油状白色的液体开始流出来时，开始用采精杯采集。2.继续采集直到公猪完全停止。3.马上把采好精液的采精杯放入保温运送箱中，不要拿掉过滤纸。4.把保温运送箱放在转移窗口中，关上窗口的门。5.让公猪自己从假母猪上下来，不要推它或催它。6.把公猪放回自己的栏中，准备下一个采集。7..记住：很多精液从一开始采集时就污染了，破坏了精液的质量。8.我们必须在采集时保护精液受外界物质或温差变化的影响。实验室传送窗口采精区域空气中的尘埃水和空气包皮囊中的灰包皮液和尿液低温在进入采精杯前就污染了灰尘三.精液方面保存新鲜精液的关键因素保存和稀释新鲜精液的步骤精液采集前实验室的准备工作在实验里处理精液加工精液精子包装和储存精液保存新鲜精液的关键因素1温度2渗透压3PH值4污染5时间清洗设备的时候，不要使用肥皂液或洗涤液，只能使用热水1．这些是能影响精液质量的五个因素。2.采集、加工、储存和使用精液时应注意的事项3.防止温差变化应注意的事项。4.使用的水必须纯净，不含任何杂质，最好用双蒸水配置精液稀释液时必须用高质量的稀释粉和纯净水5.把1包稀释粉（大约50克）倒入1升蒸溜水中，至少在使用前1小时准备好。6.有三种不同类型的稀释粉，根据你的用途选泽正确的种类。7蒸馏水可以当地购买，也可以用双蒸水机自己制作。8.精液采集和使用之间的时间越长，精液质量变坏的危险性就越大。1．防止温差变化2．保持正确的渗透压和PH值3．消除外界污染4．通过使用一次性器材来防止交叉感染和疾病传播5．当使用时确保是高质量的精液1．温度的变化必须缓慢，不能超过每5分钟1度的速度2．在温度下降到32度以前，混合精液和稀释液3．当混合时，精液和稀释液必须等温4．混合后，精液的温度继续慢慢下降，然后放在17度的冰箱中保存5．在人工授精实验时，室内温度控制在22-24度精液稀释粉中包含：1．维持能量的纯葡萄糖2．维持渗透压和PH值平衡和稳定的纯盐3．防止细菌生长的抗生素1．短效：稀释好精液后24小时内用掉2．中效：稀释好精液后4天内用掉3．长效：稀释好精液后8天内用掉短效中效长效蒸馏水蒸馏水蒸馏水蒸馏水进水双蒸水出精液瓶总是在使用前检查精液的质量滴一滴在预热的载玻片上稀释粉稀释和保存新鲜精液的步骤1）诱导公猪爬上假母台2）擦净包皮囊3）握住阴茎4）采集射出的精液浓稠部分5）把采好的精液运送到实验室里精液的采集1）打开恒温水槽和预热箱2）混合稀释液3）准备好采精杯4）打开和检查所有的电子设备5）准备好输精瓶、器皿、标签等6）确保稀释溶液加热到37度，混合好至少1个小时。步骤1采精开始前实验室的准备工作步骤21）识别公猪2）称重计算精液容量3）精液的颜色和味道4）稳定采集5）精子浓度计算6）显微镜观察精子的形状和活力7）计算每次采集所能分装的头份数，每头份至少含有30亿活的精子8）加入稀释液在实验室里对所采集的精液进行加工和质量检测步骤3步骤4步骤5步骤6步骤7步骤81）准备好分装精液的输精瓶和标签2）根据需要选择输精瓶/精液袋/精液管来分装精液3）盖上输精瓶的盖子或给精液袋/精液管封口分装1）把分装好的精液放在17度的恒温冰箱中2）每隔24小时把输精瓶转动一下以保持精子的旋浮状态3）小心冰箱门打开时温度的上升储存1）如果运输的过程超过30分钟，最好用可移动的恒温冰箱2）如果运输的过程少于30分钟，可以用保温的运送箱，但必须放入可升温/降温的冰袋3）在输精前抽样检查每一次采集的精液样品。运送输精1）发情鉴定2）组织好输精区域3）规范操作程序4）使用一次性用具以防止尿道感染的传播5）输精完后对母猪的照顾在实验室里准备精液有两个目的1把采集的精液分装成若干头份，每头份100毫升，含有40亿个活的精子。2保存好稀释好的精液，使之在3-5天后能够很好地使用实验室的操作规程必须使我们：1）不污染精液2）不使精液受温差变化的影响在实验室里，才把采精杯从保温运送箱中取出，拿掉过滤纸，测量精液的温度精液只能漫漫降温，至34-37度，下降的速度不能超过每5分钟1度的速度精液降温的时间可能需要15-20分钟，可以用这段时间来检查精液的质量，计算精子的密度。把计算好的稀释液倒入另外一个烧杯，比较温度当精液和稀释液的温度完全一致时，把稀释液漫漫倒入精液中精液稀释液3-5天温度的急剧变化将导致精子死亡38℃-39℃扔掉质量控制射精时的正常精子顶体精子发育时，两点发生改变原生质滴由颈部向尾部缓慢移动顶体脱落四.人工授精实验室设计人工授精实验室的构成隔离检疫区种公猪养殖区精液采集区人工授精实验室人工授精设备与耗材场内人工授精实验室与种公猪站的设计1.2.3.4.6.5.场内人工授精设施的六个组成部分1.新公猪隔离检疫区2.公猪养殖区、养殖栏与养殖圈舍3.精液采集区4.人工授精实验室、清洁室标准5.精液贮存与发送区6.实验室入口与更衣区1、2区是养殖区；3是过渡区；4、5、6是清洁区新公猪适应驯化1.环境控制温度在18—24℃，湿度为65%—75%之间。公猪室内温度达到或超过28℃，可能造成暂时性或永久性公猪不育。2.必须设计通风系统，以降低疾病传播风险。3.留出有效的养殖空间：公猪养在一个单独的栏内，长度2.4米、宽0.75米、高1.1米。4.公猪栏下使用全漏缝水泥地板以维持其清洁干燥。饲料槽应高于地板平面，而非沉入水泥地面下。5.保留一个运动圈,至少每8头公猪使用5平方米，如有可能最好是4头公猪共用一个运动圈。必须设计一个生物安全设施，称为一个“非清洁”工作区人工授精实验室1.相当于GMP清洁室的标准1）地板、墙壁、天花板、台面等必须是可清洗的瓷砖、玻璃、高密度塑料等材料。2）达到无尘环境标准的空气过滤系统。3）全控环境：温度22℃—24℃；湿度为70%。2.用于冷、热水的不锈钢水池及排水口。3.足够的供电插座便于设备使用。4.特殊设计的冷却区用于精液缓慢冷却至稀释时。5.唯一双侧窗门的传递窗至更衣区，另有一双侧窗门的传递窗至精液采集区。设计为“清洁”工作区人工授精实验室设备人工授精基本应用物品1.假母台及配种垫2.双蒸水机3.小水浴槽4.计量小于2千克的电子称5.泡沫预热箱*6.显微镜(简易型)7.精虫密度计数器**8.17℃恒温冰箱*泡沫预热箱=泡沫箱+数字温度计+加热灯**精虫密度计数器=亚卫精子密度测定器+10