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果蝇培养基制备与保存注意事项沈妍(果蝇资源与技术平台)果蝇是经典的模式生物,具有生长迅速、繁殖力强、遗传物质简单、突变体多等优点,广泛应用于遗传,发育,生理和行为学等研究领域。果蝇培养基是一切以果蝇为模式动物开展试验的基础,在果蝇品系保存以及各项果蝇相关试验中适宜的培养基能达到事半功倍的效果。本文总结果蝇培养基配制与保存的注意事项。培养基制备前注意事项原料果蝇培养基的配方主要包含水、玉米粉、大豆粉、蔗糖、麦芽糖、酵母、琼脂、丙酸和苯甲酸钠等。玉米粉是培养基制备的主要原料。目前,市场上玉米粉种类繁多,我们需选择糯性玉米粉。糯性玉米粉制成的培养基蓬松粘稠,更适合幼虫生长。而非糯性(粳性)玉米粉颗粒粗,制成的培养基较为稀薄,冷却凝结后会出现分层现象。琼脂粉影响培养基硬度。每一批次效价不同。每次新订购的琼脂粉应先做预试验,根据食物硬度确定琼脂粉的用量。培养基制备容器的选择根据培养基制备体积的不同,我们需选择不同的加热工具。配制少量培养基,1L以下,选用微波炉。配制1L到5L培养基,选用电饭锅。配制10L以上的培养基,选用专业的带有搅拌功能的加热容器。培养基配制过程中的注意事项1加热前的准备在加热前,应先将玉米粉、大豆粉、蔗糖、麦芽糖等原材料用冷水搅拌均匀,勿用热水搅拌,热水会使玉米粉、大豆粉结块,溶解不充分。2酵母粉发酵温度的控制干酵母粉需要和温水混匀后发酵。在发酵过程中应注意水温的控制,水温以25°C到30°C为宜,高温会使酵母失活。发酵时间以十五分钟左右为佳。水位的控制在配制过程中,培养基的体积最多只能加到容器体积的三分之二,必须留出三分之一沸腾的空间。在培养基接近沸腾时要时刻关注其状态,以免培养基因沸腾过度而漫出容器外,而沸腾不充分会导致培养基分层。一般100L的锅,我们最多只能配制60L培养基。搅拌培养基不管使用哪种加热工具,在加热过程中,都需要不停搅拌培养基,防止粘锅和结块。培养基配制完成后的注意事项培养基配制完成后,应放在阴凉通风处降温冷凝。待培养基完全冷却后保存于低温环境中。新配制的培养基应在两周内使用完。保存不当会导致培养基发霉或者干裂。1培养基发霉培养基发霉的原因主要有以下三个:一是保存环境不合适。新制备好的培养基应保存在低温环境中。一般以4°C左右为宜。若环境温度较高,湿度大时,培养基易发霉。二是防腐剂添加不当。防腐剂应当在培养基温度降到75C以下时添加,否则防腐剂的作用将大大降低,培养基易变质。三是防腐剂变质也会导致培养基变质。2培养基开裂培养基放置时间过长,往往会出现培养基萎缩开裂的情况,尤其是在干燥的冬季。因此在保存培养基时应注意保湿。主要方法包括低温保存和用不透气材料包裹培养基。另外尽量不要把培养基放在空调的出风口处。总结培养基对于果蝇生长发育有着重要的影响。在配制前,配制中以及配制后都有许多注意事项。配制前,要保证玉米粉和琼脂粉等原材料的质量,防止出现培养基分层或者凝结不充分的现象。配制中需要对温度有良好的控制,让酵母粉得到充分发酵,让培养基得到充分的沸腾。配制后,需要妥善保存培养基,防止它发霉或者干裂。如发现培养基异常,应当及时丢弃,配制新的培养基。总之,配制培养基是一个需
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