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文档简介
虫草培育基制备操作细节解析天然冬虫夏草是昆虫和真菌的结合体,是虫草菌寄生于鳞翅目蝙蝠蛾的幼虫生长而成。生长在海拔3500—4000以上的顶峰草甸区,对自然环境要求特别,所以产量低,再加上人们盲目的采伐,资源日益缺少,价格昂贵,是稀有的紧缺药材。经过用人工培育方法获得更多的冬虫夏草与天然冬虫夏草成分基本一致,能够代替天然冬虫夏草。人工培育冬虫夏草技术,使其成分周边,各种成分对机体的免疫调治功能已被广泛证明,并且还大大的提升了产量,价格相对低价,能够知足更多人需求。人工培育冬虫夏草是在培育基中生长的,培育基是虫草菌种生长的环境,也是菌种生长的必备营养物质,它的利害直接影响着菌丝的质量。培育基的制备是整个操作过程中最基础也是最重要的。培育基是微生物生长的基础,是用人工方法将多种营养物质按微生物生长代谢的需要配制成的一种营养物质。微生物种类众多,对营养物质的要求各异,再加上实验和研究的目的不同样,培育基的组成成分也有较大的差别。成分称量与溶解百令胶囊的冬虫夏草菌种比较喜爱半固体培育基。一般以玉米粉,葡萄糖为碳源;硝酸钠为无机氮源;牛肉膏、蛋白胨为有机氮源;硫酸镁为无机盐;VB1、VB2为生长因子。依据培育基1/5配方,正确称取各种成分,放入大批杯。将以量取好的纯化水拿出少量,倒入大批杯中,用玻璃棒搅拌使其溶解。把节余的水倒入不锈钢锅加热煮沸,倒入琼脂粉5~10%持续加热至琼脂完整融化。在加热过程中用玻璃棒不停搅拌,以防琼脂积淀在锅底烧焦,同时也促使它溶解。待琼脂完整融化后,将大批杯中以溶解的原料倒入锅中,持续加热,使原料充分溶解,直到微沸为止。加热时要控制火力,省得培育基爆腾而溢出容器。有些不易溶解的原料如牛肉膏,蛋白胨等可先在小容器中加少量水,加热溶解后再倒入容器中。2调PH用30%NaOH溶液和30%HCL溶液调pH,用精美PH机进行测定。预热、校准仪器后,即可用来测定培育基。先测培育基溶液温度,可否已降到与标定溶液温度同样,若是还高于标定溶液温度,等培育基溶液降温至标定溶液温度一致时再测定PH值。不然测定出的PH值是不正确的。用馏水洗电极头部,用被培育基溶液冲刷一次,按“读数”键,把电极浸入培育基溶液中,用玻璃棒搅拌溶液,使溶液平均,在显示屏上读出溶液的PH值。先测定培育基初始PH,如PH值偏酸,则加30%NaOH溶液,偏碱则加30%HCL溶液。屡次几次调治至PH7。2/5其实这样用酸碱屡次调PH的方法其实不好,会影响培育基的成分和质量。培育基成分的原由,使培養基自己成酸性,所以直接用30%NaOH调PH。加NaOH时要慢慢地放,情愿少补,不可多。固然这个方法比较麻烦,但是它不影响培育基的成分和质量,并且还节约了试剂。分装趁热按规定的量将培育基分装到茄型瓶、试管中。一般装容器的(20-30)%量。装量过多,培育基是多种营养物质的混悬液,多半拥有粘性,在分装时要注意,不使培育基沾污瓶口或管口,省得污染棉塞,造成杂菌生长。灭菌冬虫夏草培育基采纳高压蒸汽灭菌,主若是经过升温使蛋白质变性进而达到杀死微生物的收效。灭菌的时间与温度直接影响着培育基的利害。配制达成的培育基,因实时进行灭菌操作,若耽误了时间,会因杂菌生长,致使培育基变质而不能够使用。特别在气温高的状况下,如不能够实时灭菌,数小时内培育基便可能变质。依据培育基的成分,用途等不同样,灭菌的时间也不同样。冬虫夏草菌种用的培育基用高压蒸汽灭菌锅(118-122)℃灭菌(29-31)min。灭菌升温与降温时间不宜过长,会破坏培育基部分有效成分,3/5并使培育基颜色变黄红色,影响菌种的生长。灭菌注意事项,灭菌前先要排冷空气,能够提升灭菌时升温速度,省得升温时间过长,培育基长时间闷于灭菌柜中,被破坏有效成分。灭菌柜内不能够放过多过挤培育基,省得部分培育基灭菌不完全。灭菌达成后,小排气,省得培育基冲瓶口。等灭菌柜夹层温度降至95℃,以防烫伤人员;压力降到0KPa,方可开门去培育基。定型培育待灭菌拿出后,立刻轻摇试管或茄型瓶,将沾在瓶内壁上的培育基轻摇洗下,并将瓶底结块摇匀,分别稀罕放入多个筐中。待培育基冷却至(35-45)℃,轻缓摇匀,管口或瓶口向上,以15℃角倾斜在木条上静置,长度一般为试管长度的1/2—2/3,茄型瓶的2/3—3/4。摆放时注意不履行培育基沾污棉塞,冷凝过程中勿再搬动试管或茄型瓶冷却至凝固。并在(30-35)℃生化培养箱内培育三天,察看可否染菌。若无染菌则放入(11-15)℃生化培育箱保存备用。经过人工培育技术,获取与天然冬虫夏草成分周边,免疫调治功能相似的人工冬虫夏草,并且还大大的提升了产量,价格相对低价。固然人工培育技术已经成功,但是还不够成熟。在菌种培育的时候仍是常会出现很多问题。如菌种生长牢固性不高,斜面培4/5养生长不好,有时产量不高等。虫草培育基就
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