病理学技术士专业知识

病理学技术士专业知识一、病理解剖技术【了解】解剖室的设计要求【掌握】病理解剖的意义解剖台的设计【熟练掌握】

常用解剖的器械解剖室的清洁和消毒解剖器械的清洁和消毒个人防护【了解】解剖室的设计要求：1、病理解剖室最好建在与医院太平间相邻的地方，以利于尸体的存放和保管2、病理解剖室应至少设计两个门，其中设计一个宽一点的门与太平间想通，窗户略高一些，以便于尸体的搬运和自然光线的利用，解剖台的上方最好安装无影手术灯。避免带色光源照明，以免改变脏器和病变的自然色彩；3、解剖室最好用水磨石地面，解剖台四周应铺设排水沟或地漏，墙壁铺设瓷砖，应安装方便的清洗设备，以便于解剖后的洗刷和清洁一、病理解剖技术【了解】解剖室的设计要求：4、室内应有良好的通风设备，除此之外还应安装纱门和纱窗，以便于室内的空气流通；5、医学院校的病理解剖室还应设计取材边台和示教台，其中示教台最好设计为外科手术观摩式楼顶看台，有条件的可安装摄像系统与电视或计算机相连；6、在通往解剖室的入口两侧设计消毒室、男女更衣室、浴室。一、病理解剖技术【掌握】病理解剖的意义通过病理解剖可以验证临床诊断的正确性及治疗效果、发现临床诊断和治疗上存在的问题，最后通过临床病理讨论会的形式，实现病理和临床的交流与统一。一、病理解剖技术【掌握】解剖台的设计1、解剖台的设计高低和大小要合适，避免由于解剖台过高或过低造成操作不便，台面的大小除了能容纳尸体外，还需要留出放置病理解剖器械和检查脏器的地方；2、解剖台面要光滑，可用水磨石或不锈钢板台面，台面的四周应加一个10cm宽5cm高的台边、解剖台的两头略高，应有一定的坡度、中间低，在中间的两侧设有较粗的下水漏，台边内镶嵌有多孔水管，靠近解剖台的脚部还应设有清洗用的水池，解剖台和清洗池的水龙头开关均应采用脚踏式；一、病理解剖技术【掌握】解剖台的设计3、有条件的单位可购买不锈钢解剖台或瓷解剖台，比较好的解剖台能够升降，带有抽气功能，可防止解剖时出现的腥臭味，不锈钢和瓷解剖台也容易清洁消毒；4、为了避免污染环境还应设计与病理解剖台配套的污水消毒池。解剖时排放的污水，应先排入污水消毒池进行消毒处理。每次解剖后，根据污水排放量多少，加入一定比例的漂白粉或次氯酸钠消毒，再排入城市的下水管道。一、病理解剖技术【熟练掌握】常用解剖的器械1、刀：解剖刀、剖验刀、截肢刀、肋骨刀和脑刀。用于切割皮肤、肋骨和脑，剖验脏器用；2、剪：钝头、尖头解剖剪、弯头剪、静脉剪，分离组织和脏器用。另外还有剖验肠用的肠剪和肋骨用的肋骨剪。3、镊和钳：有齿镊、无齿镊、弯血管钳、直血管钳和有齿血管钳；4、头颅固定器、锯（板锯、弓锯、电动锯）铁锤和骨凿，为开颅和取脊髓用；5、大小探针：检查胆道、输尿管、尿道用；6、金属药膏刀：无菌取材用；一、病理解剖技术【熟练掌握】常用解剖的器械7、刻度量杯：称量体腔积液和胃肠道内容物用；8、注射器、针头：抽取血液和渗出液用；9、量尺：测量尸体身长和脏器大小用；10、缝合针和线；11、天平（电子天平）：称量脏器和新生儿体重用，称量范围0.1g~2000g和1~5000g；12、木枕；13、脏器解剖台：宽40cm，长60cm，高15~20cm；14、瓷盆和塑料桶：盛装脏器用；15、其他：医用乳胶手套、线手套、纱布、海绵等。一、病理解剖技术【熟练掌握】解剖室的清洁和消毒每次解剖后，解剖室的地面及靠近地面的墙壁部分需用水冲洗干净。打开紫外线灯进行空气消毒，照射剂量不应低于90000μWs/cm2。室内温度不低于20℃，相对湿度不超过50%，一般照射20~30min。必要时可喷雾2%过氧乙酸8ml/m3（相当于0.16g/m3）密闭消毒30min。一、病理解剖技术【熟练掌握】解剖器械的清洁和消毒病理解剖器械使用后用清水冲洗干净，浸泡在1:1000苯扎溴铵（新洁尔灭）内含0.5%亚硝酸钠溶液中4~6h。或浸泡在10%甲醛水溶液内消毒2~4h，在甲醛液中浸泡时间不宜过长，以免损坏器械，消毒后用流水将器械冲洗干净，再用纱布擦干涂上液体石蜡防锈。一、病理解剖技术【熟练掌握】个人防护解剖时应带医用乳胶手套，外面再套上薄质纱手套，解剖前应将纱手套浸湿，以利于清洗。解剖时应戴上口罩帽子穿着手术衣，其外面带上塑料围裙。所用物品必须经过严格消毒处理后再使用。一、病理解剖技术病理解剖的意义下面描述错误的是：（

）A.病理解剖技术是病理学的基础之一B.发现临床诊断和治疗上存在的问题C.大量病理资料的积累促进了医学的发展和进步D.分子生物学技术的迅猛发展可替代传统的病理解剖技术E.可以通过临床病理讨论会的形式，实现病理和临床的交流和统一【答案】D高频考题病理解剖室的设计，下面不合适的是：（

）A.解剖台上方最好安装无影手术灯，避免带色光源照明影响对病变器官染色的观察B.病理解剖室应至少设计两个门，其中一个宽一点以便尸体的抬运C.解剖室窗户略低一些，以便于尸体的搬运和自然光线的利用D.解剖室窗户略高一些，以便于自然光线的利用E.解剖室入口两侧设计消毒室、更衣室和浴室【答案】C高频考题高频考题常用的病理解剖器械很多，如果条件不允许常规备用的解剖器械可以不包括：（

）A.天平用于称量脏器和新生儿体重B.能称量成人尸体的大秤（50~100kg）C.开颅和取骨髓需用头颅固定器、锯、铁锤和骨凿等D.刀类有解剖刀、截肢刀、肋骨刀和脑刀，用于切割皮肤、肋骨和脑等E.刻度量杯称量体腔液体【答案】B高频考题关于解剖台的设计，下面哪项不适宜？：（

）A.应该有与病理解剖台配套的污水消毒池，避免污染环境B.解剖台面要光滑，两侧设有较粗的下水漏C.解剖台面大小能容纳成人尸体即可D.解剖台能够升降，带有抽气功能E.解剖台面高低要合适，避免造成操作不便【答案】C【解析】解剖台面大小除了能容纳尸体外，还要留出放置病理解剖器械和检查脏器的地方。高频考题常用的病理解剖器械应有：（

）A.刀类有解剖刀、截肢刀、肋骨刀和脑刀，用于切割皮肤、肋骨和脑等B.剪类有钝头与尖头解剖剪、弯头剪和静脉剪等C.镊和钳：有齿镊与无齿镊、血管钳等D.天平、刻度量杯和大小探针等E.以上内容均包括【答案】E高频考题关于病理解剖室和器械的清洁、消毒，下面错误的是：（

）A.器械用后清水冲洗干净，浸泡在1:1000苯扎溴铵（新洁尔灭）内含0.5%亚硝酸钠溶液中4~6小时B.病理解剖室只需定期用水冲洗地面和靠近地面的墙壁C.打开紫外线灯进行空气消毒，室温不低于20℃，相对湿度不超过50%，一般照射20~30分钟D.打开紫外线灯进行空气消毒，剂量不应低于9000μw·s/cm2E.器械用后清水冲洗干净，也可以浸泡在10%的甲醛水溶液中消毒2~4小时【答案】B高频考题做病理解剖时的个人必要防护不包括：（

）A.解剖人员穿戴完毕，解剖前必须经过无菌室在无菌风下吹20~30分钟B.所用物品必须经过严格消毒处理后再使用C.解剖时戴口罩、帽子，穿上手术衣D.手术衣外面戴上塑料围裙E.解剖时戴医用乳胶手套【答案】A高频考题用于病理解剖室空气消毒的过氧乙酸的浓度是：（

）A.2%B.20%C.60%D.80%E.100%【答案】A【掌握】固定剂的选择：细胞内物质成分与固定剂的关系【熟练掌握】固定的定义和意义固定的作用：保持细胞形态、保存细胞内成分、便于染色、有利于切片、固定剂的不良影响固定剂的选择：固定液的量和容器、固定液的穿透性、固定时间、固定强度、特殊固定二、固定方法【掌握】固定剂的选择：细胞内物质成分与固定剂的关系组成细胞的主要成分为蛋白质、脂类和糖类，根据研究目的不同分别选用不同的固定剂和固定方法，如：进行Masson染色，最好用甲醛升汞、Zenker液或Bouin液固定；检查嗜铬细胞宜用含铬的固定液（如Zenker液等）；要保存细胞内糖原则用Carnoy液固定；用于免疫组织化学染色时，应根据不同的抗原特性选择不同的固定液，如T淋巴细胞表面抗原为不稳定抗原，极易被固定液破坏，因此常用冰冻切片进行染色，而HbsAg，CEA，S-100等抗原一般很稳定，其抗原性几乎不受固定液类型的影响。二、固定方法【熟练掌握】固定的定义：将组织浸入某些化学试剂，使细胞内的物质尽量接近其生活状态时的形态结构和位置，这一过程称为“固定”。二、固定方法【熟练掌握】固定的意义：机体死亡后，如不及时处理，细胞在自身溶酶体酶的作用下会溶解破坏，组织细胞的结构将难以保持。若有细菌繁殖则极易引起组织腐败；若用于免疫组织化学染色，固定的重要意义是保存组织细胞的抗原性，是抗原物质不发生弥散和抗原性丧失。若组织固定不良，在以后的标本制备过程中则无法加以纠正；对于电镜标本，即使延迟几分钟，对其超微结构也有严重影响。二、固定方法【熟练掌握】固定的作用：1、保持细胞形态与生活时的形态相似，防止自溶与腐败。2、保存细胞内特殊的成分与生活状态时相仿：经过固定，使其定位在细胞内的原有部位，有利于其后物质的确切定位。对于不同的物质应选用不同的固定剂和固定方法。3、便于染色。便于区别不同组织成分：组织细胞内的不同物质经固定后产生不同的折光率，对染料产生不同的亲和力，经染色后容易区别。4、有利于切片。固化剂有硬化作用，使组织硬度增加，便于制片。二、固定方法【熟练掌握】固定剂的不良影响：1、影响常规染色：如用福尔马林固定时，常有福尔马林色素的异常沉积，福尔马林也影响水溶性猩红S的染色。2、固定造成物质损失：不同的固定剂和固定方法会引起不同程度的细胞内蛋白质、粘多糖、脂类、核酸和低分子量物质的损失，因此应根据研究目的的不同选择合适的固定剂和固定方法，以使所研究的物质损失达到最小。3、组织皱缩：甲醛、四氧化锇和福尔马林固定的组织均有不同程度的皱缩。单用戊二醛也会引起组织皱缩。二、固定方法【熟练掌握】固定剂的选择：固定液的量和容器量要足，一般为组织块总体积的4~5倍，也可达15~20倍。组织应于取下后立即或尽快放入适当固定液中。容器宜相对大些，防止组织与容器粘连产生固定不良。瓶底常垫以棉花，使固定剂能均匀渗入组织块。并在固定期间轻轻搅动或摇动容器有利于固定液的渗入，用自动石蜡脱水包埋机有同样效果。二、固定方法【熟练掌握】固定剂的选择：固定液的穿透性一般固定液在24h内不能穿透厚度大于2~3mm的实体组织或0.5cm的多孔疏松组织。固定剂的选择：固定时间大多数组织应固定24h，然后保存于70%酒精中。固定时间与使用固定液的种类、组织块大小、温度等有关，不同的固定液有不同的固定时间。一般固定时间为3~24h。二、固定方法【熟练掌握】固定剂的选择：固定温度和加热、组织块大小大多数可在室温（25℃）固定，在低温（如4℃）固定时，固定时间应相应延长。加热可使蛋白质凝固，但一般不要求加热，因为加热可加速组织的自溶。厚度可根据组织类型而不同，但组织要得到良好的固定，原则上不应超过4mm，3mm更为合适。二、固定方法【熟练掌握】固定剂的选择：固定强度可取已固定完毕的组织标本用刀从正中切开，如固定良好，其切面呈灰白色，质感较硬而具有弹性；若固定不好，切面可见血色，含液体较多，组织仍保留柔软状态。二、固定方法【熟练掌握】固定剂的选择：特殊固定用于确诊病变，保证在诊断时特殊结构得以保存。如尿酸盐结晶则需要特殊固定。另外，要制备1μm厚的半薄切片，可先用戊二醛固定组织块，而后再用锇酸进行二次固定（后固定），或用多聚甲醛单独固定。二、固定方法高频考题对于固定液的穿透性下面描述正确的是：（

）A.一般固定液在24小时内对实体组织穿透厚度不大于2~3mmB.一般固定液在24小时内对实体组织穿透厚度在4~5mm之间C.一般固定液在24小时内对实体组织穿透厚度大于1.5cmD.一般固定液在24小时内对实体组织穿透厚度大于5mmE.一般固定液在24小时内对多孔疏松组织穿透厚度不大于1.0cm【答案】A高频考题对组织的固定过程，下面的描述错误的是：（

）A.组织取下后尽快冲洗干净放入适当的固定液中B.组织取下后尽快放入适当的固定液中C.固定时应注意组织块的大小，组织块切取适当D.需要做酶组织化学的组织固定应置于冰箱低温固定E.大多数组织固定可在室温，在低温固定时，固定时间应相应延长【答案】A高频考题对组织固定的定义，下面的描述正确的是：（

）A.将组织浸入某些化学试剂，使细胞内的物质尽量接近其生活状态时的形态结构和位置，这一过程称为“固定”B.将组织浸入某些化学试剂，使生活的细胞迅速死亡，这一过程称为“固定”C.将组织浸入某些化学试剂，使已经停止代谢的细胞快速分解，这一过程称为“固定”D.将组织浸入某些化学试剂，使生活的细胞迅速死亡并分解，这一过程称为“固定”E.将组织浸入某些化学试剂，使生活细胞的代谢迅速停止并分解，这一过程称为“固定”【答案】A高频考题下面有关组织固定的描述，错误的是：（

）A.若用于免疫组化，固定的意义是保存组织细胞的抗原性B.组织的固定不良，在以后的标本制备过程中无法加以纠正C.机体死亡后，如不及时处理或固定，细胞在自身溶酶体酶的作用下会溶解破坏D.组织的固定不良，在以后的标本制备过程中可以加以适当的纠正E.对于电镜标本，适当而及时的固定非常重要高频考题【解析】凡需病理检查的各种组织都需要经过固定，组织的正确固定具有重要的意义：因为机体死亡后，如不及时处理或固定，细胞在自身溶酶体酶的作用下会溶解破坏，组织细胞的结构难以保持。若用于免疫组化，固定的意义是保存组织细胞的抗原性。良好组织学切片的基础取决于适当而完整的固定，若组织的固定不良，在以后的标本制备过程中无法加以适当的纠正。【答案】D高频考题对于组织固定所起的作用错误的是：（

）A.经过固定使细胞内的一些蛋白等凝固，使其定位于细胞内的原有部位B.保持细胞与生活时的形态相似，防止自溶与腐败C.组织细胞内的物质经固定后对染料产生不同的亲和力，经染色后容易区别D.组织细胞内的物质经固定后对染料产生相同的亲和力，经染色后容易区别E.组织固定后可产生不同的折光率【答案】D高频考题有关组织固定的情况，下面的描述错误的是：（

）A.固定使细胞内的一些蛋白等凝位于细胞内的原有部位，有利于其后的确切定位B.及时充分固定，可防止组织自溶C.对于不同的组织均可选用甲醛常温固定方法，不影响其以后的标本制作和染色D.及时充分固定，可防止组织腐败E.固定可保持细胞内特殊的成分与生活状态相似【答案】C【解析】如检查嗜铬细胞瘤要用含铬的固定液（如Zenker液），检查细胞内糖原应选Carnoy液或无水乙醇高频考题固定的作用下列哪项不正确：（

）A.凝固细胞内蛋白质B.防止细胞自溶C.封闭非特异成分D.使抗原不弥散E.保留细胞和组织结构成分【答案】C高频考题有关组织固定剂的不良影响，下面的描述错误的是：（

）A.常规应用的甲醛固定剂不会引起组织皱缩B.甲醛固定时，常有甲醛色素的异常沉积C.固定后可引起不同程度的组织皱缩D.不同固定剂会引起不同程度的细胞内物质损失E.甲醛影响水溶性猩红S的染色【答案】A高频考题做下面哪项免疫组织化学染色时，最好用冰冻切片？（

）A.S-100B.T淋巴细胞表面抗原C.CEAD.HBsAgE.CK【答案】B【解析】冷冻切片的优点是能够比较完好地保存各种抗原活性及酶类，特别是对于那些对有机溶剂或热的温度耐受能力较差的细胞膜表面抗原和水解酶保存较好。高频考题关于固定组织容器的选择，下面哪项正确？（

）A.固定的容器宜相对大些，防止组织与容器粘连产生固定不良B.容器以能容下需要固定的组织即可C.固定的容器不宜大，以免浪费固定液D.组织放入固定器后，固定期间不宜搅动E.容器底部不能垫棉花等柔软物质【答案】A【解析】固定的容器宜相对大些，防止组织与容器粘连导致固定不良。容器底部常垫棉花使固定剂能均匀渗入组织块。在固定期间轻轻搅动或摇动容器有利于固定液的渗入。高频考题固定液的量一般应该为：（

）A.组织块总体积的3倍B.组织块总体积的4~5倍，也可以达15~20倍C.组织块总体积的2倍D.组织块总体积的1倍E.至少是组织块总体积的30倍【答案】B高频考题为了对组织充分固定，切取组织块的厚度原则上应为:()A.15mm最为合适B.不超过4mm，3mm更为合适C.不超过10mm，6mm更为合适D.10mm最为合适E.6~9mm最为合适【答案】B高频考题有关组织的固定时间，下面哪项描述较适宜？（

）A.组织固定时间不取决于温度，主要取决于组织块B.大多数组织应固定24小时，然后保存于70%的乙醇中C.组织固定不能时间太长，一般10分钟即可D.组织在固定液中浸泡的时间越长，对组织的固定和染色越有利E.固定时加热比较好【答案】B高频考题要制备电镜的半薄切片，可用哪种组织固定方法？（

）A.乙醇固定B.中性甲醛液体C.可先用戊二醛固定，然后再用锇酸进行二次固定D.丙酮E.先用甲醛固定，然后再用戊二醛进行二次固定【答案】C高频考题【解析】组织从生物活体取下以后，会由于细胞内部各种酶的作用自溶、微生物污染破坏细胞微细结构。因此，为最好是在动物血流未断之前进行，取材时必须要做到快、小、准、冷等四大要点；固定的方法有物理的和化学的两大类。物理的方法系采用冰冻、干燥、微波等手段来保持细胞结构；化学的方法是用一定的化学试剂来固定细胞结构。现通常使用化学方法进行固定，有时用物理-化学双固定。组织块固定常规采用戊二醛-锇酸双重固定、四氧化锇固定。高频考题哪一项不是影响组织固定结果的因素（

）A.固定液与组织块体积的比例B.固定液的比重C.固定液的浓度D.固定的时间与温度E.固定剂的穿透力【答案】B三、固定剂种类【了解】混合固定液：Orth氏液、PFG液、Rosman液【掌握】单纯固定液：升汞、醋酸混合固定液：甲醛-钙液【熟练掌握】

单纯固定液：甲醛和福尔马林色素、重铬酸钾、苦味酸、铬酸、锇酸、丙酮、三氯醋酸、乙醇混合固定液：B-5固定液、Bouin氏固定液、Carnoy氏液、Miiller氏液、PLP液和PLPD液、Zenker液、4%多聚甲醛-0.1mol/LPB、4%多聚甲醛-磷酸二钠/氢氯化钠液、乙醇-甲醛液、乙醚-酒精液、中性缓冲甲醛液、中性甲醛液三、固定剂种类【了解】混合固定液：Orth氏液、PFG液、Rosman液

Orth氏液：常用的常规固定液；对胚胎组织、神经组织和脂肪组织固定均可。渗透力强，组织收缩小；临时配制，暗处固定，固定24h左右。（固定液变黑时即不能再用）固定后流水冲洗12~24h，可存于70%酒精。配方：重铬酸钾2.5g、硫酸钠1.0g、蒸馏水100ml、37%~40%甲醛10ml（用时加入）。三、固定剂种类【了解】混合固定液：Orth氏液、PFG液、Rosman液PFG液：适用于多种肽类抗原的固定，多用于免疫电镜研究。对细胞抗原性和结构的保存较好。配方：对苯醌20g、多聚甲醛15g、25%戊二醛40ml、0.1mol/L二甲胂酸钠缓冲液1000ml。三、固定剂种类【了解】混合固定液：Orth氏液、PFG液、Rosman液Rossman液：对糖原固定好固定12~24h后，用95%酒精洗配方：无水乙醇、苦味酸饱和液90ml、甲醛10ml三、固定剂种类【掌握】单纯固定液：升汞、醋酸升汞：5%~7%饱和水溶液作为固定剂。单独应用组织收缩显著——常与醋酸和铬盐配成混合固定液使用。穿透能力低——固定薄片组织对蛋白质有沉淀作用——固定蛋白质对类脂、糖类无固定作用三、固定剂种类三、固定剂种类用法：临用时加5%冰醋酸。固定2~3mm的组织需6~18h，流水冲洗24h后，保存于80%酒精。易产生汞盐沉淀——切片脱蜡后，浸入0.5%碘酒（用70%酒精配制）脱汞，再用0.5%硫代硫酸钠水溶液脱碘，流水彻底冲洗，再用蒸馏水洗后，进行染色。【掌握】单纯固定液：升汞、醋酸醋酸：低于15℃时为冰醋酸常用0.3%~5%的水溶液作为固定液。5%的醋酸pH为2-8可抑制细菌和酶的活性，可防治自溶。不能沉淀白蛋白、球蛋白，能沉淀核蛋白，可较好的保存染色体的结构。穿透力强，不能保存糖，不能固定脂肪和类脂固定线粒体和高尔基复合体时不要用高浓度的醋酸三、固定剂种类【掌握】混合固定液：甲醛-钙液甲醛-钙液：适用于固定脂肪组织和组织化学染色配方：甲醛10ml、无水氯化钙1g、蒸馏水90ml三、固定剂种类【熟练掌握】单纯固定液：甲醛：甲醛：40%的甲醛水溶液此液久存自行分解，形成白色沉淀为副醛（三聚甲醛或多聚甲醛），可过滤后使用滤液储存较长时间的甲醛，加入少量碳酸镁或碳酸钠，或用大理石中和溶液中的甲酸（甲酸影响细胞核的染色），40%甲醛溶液中加入甲醇可阻止聚合作用三、固定剂种类【熟练掌握】渗透力强、固定均匀、组织收缩小，但经乙醇脱水后收缩较大。不能使白蛋白和核蛋白沉淀。甲醛通过使蛋白质分子发生交联而产生固定作用。可保存脂类和类脂体，但必须用冰冻切片法。可固定高尔基体、线粒体，是糖的保护剂三、固定剂种类【熟练掌握】福尔马林色素：甲醛氧化产生蚁酸在组织中与血红蛋白结合形成棕色的福尔马林色素。可影响染色效果，故在制片前充分流水冲洗，亦可用下法去除：1、Schridde法：用75%酒精200ml，加浓氨水1ml。石蜡切片脱蜡后在该溶液中处理30min，用流水冲洗后染色。此法对组织无损害。2、Verocay法：用80%酒精100ml和1%氢氧化钾1ml配成溶液，切片脱蜡后在其中处理10min，再用流水冲洗两次，每次5min，而后用80%酒精浸洗后，即可染色。三、固定剂种类【熟练掌握】单纯固定液：重铬酸钾：有毒，1%~3%水溶液作为固定剂穿透速度快、组织几乎不收缩，但经乙醇脱水后明显收缩。固定后酸性染料着色良好，但碱性染料的着色较差不能与还原剂如乙醇等混合与甲醛混合时也不能长久稳定固定的组织需经流水冲洗12~24h，或用亚硫酸盐进行洗涤。三、固定剂种类【熟练掌握】单纯固定液：重铬酸钾：未酸化：不能沉淀蛋白质，但可以使蛋白质变为不溶性，保持其生活时的状态，对于细胞质的固定较好，并且可固定类脂类物质使其不溶于脂溶剂。用于固定高尔基体、线粒体有良好效果，但有溶解染色质的缺点，染色质保存相对较差，可与核固定剂联合应用。醋酸化：产生铬酸，可使蛋白质沉淀，染色体可保存，但线粒体破坏。重铬酸钾常用语混合固定液：Zenker液、Helly液、Maximov液、Müler液、Regaud液等。三、固定剂种类【熟练掌握】单纯固定液：苦味酸：黄色结晶体，强酸，易燃易爆。配饱和水溶液储藏能沉淀一切蛋白质对脂肪和类脂无固定作用用乙醇溶解可固定糖类穿透慢，组织收缩明显，但组织无明显硬化固定后的组织经酒精脱水即可，也可用50%或70%的酒精浸洗。三、固定剂种类【熟练掌握】可使皮肤组织软化，使其易制作完整的切片可软化火棉胶，因此含苦味酸的固定液固定的组织不宜用火棉胶包埋。固定时间不宜超过24h，固定后应尽快放入70%酒精，并在酒精中滴加少量饱和碳酸锂水溶液或浓氨水，有助于除去苦味酸固定产生的黄色。三、固定剂种类【熟练掌握】单纯固定液：铬酸：三氧化铬的水溶液。浓度是0.5%~1%。为强氧化剂，不能与酒精甲醛等混合能沉淀蛋白质，核蛋白固定良好。对脂肪无固定作用对线粒体和高尔基复合体有固定作用穿透能力弱，一般组织需固定12~24h。有收缩作用，且宜避光保存，以防止蛋白质溶解。沉淀作用强固定后必须彻底流水冲洗（≥24h），否则影响染色效果。三、固定剂种类【熟练掌握】单纯固定液：锇酸即四氧化锇，淡黄色结晶，剧毒强氧化剂，不能与酒精、甲醛等混合。1%~2%的水溶液作为固定液。脂类（脂肪和类脂）固定剂，也可使蛋白质固定均匀，不产生沉淀。不溶于酒精与苯等有机溶剂，但微溶于二甲苯，用苯代替二甲苯可获得更佳效果。特别适用于线粒体和内质网的固定电镜研究的必须固定剂，常用于后固定。三、固定剂种类【熟练掌握】单纯固定液：锇酸配制：先将洗净的装有锇酸的安瓿加热，然后迅速投入盛有溶剂的棕色瓶中，使其受冷破裂。应在临用前几天配制以保证充分溶解。纯锇酸水溶液不稳定，常在其水溶液中加入其他化学物质（将0.5g锇酸溶解于25ml的2%铬酸中；或25ml锇酸加入1~2滴升汞）三、固定剂种类【熟练掌握】单纯固定液：锇酸免疫组化中常用配方：1、1%锇酸-PB液：①2.26%NaH2PO4·2H2O41.5ml；②2.25%NaOH8.5%ml；③5.4%葡萄糖5ml；④锇酸0.5g。①和②混合后，调节pH至7.3~7.4，而后用该混合液45ml与③混合，再加入④即可。三、固定剂种类【熟练掌握】单纯固定液：锇酸免疫组化中常用配方：2、1%锇酸-0.1mol/L二甲胂酸钠液（pH7.2~7.4）：用2%锇酸水溶液与0.2mol/L的二甲胂酸钠缓冲液（pH7.2~7.4）等量混合即可。三、固定剂种类【熟练掌握】

单纯固定液：锇酸渗透力极弱，易使组织变硬——固定组织块应小，否则内部固定效果不好；——延长固定时间，组织脆性增加，对染色不利锇酸固定的标本有时要进行脱色处理：切片脱蜡入水后，先用新鲜配制的0.25%的高锰酸钾水溶液浸泡5min，此时切片呈深褐色，经自来水洗后立即浸入草酸-亚硫酸钾水溶液（1%草酸和1%亚硫酸钾水溶液分别存放，用时等量混合）5min，流水冲洗20min。也可再用2%过氧化氢处理30min，流水冲洗后染色效果更好。三、固定剂种类【熟练掌握】单纯固定液：锇酸电镜标本常用1%高锰酸钾脱碘。锇酸固定的组织对碱性染料的亲和力强，细胞核的染色效果好，但是减弱细胞质的染色效果——常配成混合固定液。有含锇酸的固定液固定的组织，固定后应用流水冲洗12~24h，否则会影响染色效果三、固定剂种类【熟练掌握】单纯固定液：丙酮：易挥发易燃无色，可与水、醇、氯仿和醚等混合。可使蛋白质沉淀，渗透力强，对核的固定差。广泛用于酶组织化学方法中各种酶的固定（如磷酸酶，脂酶和氧化酶等）作用基本与酒精相同，但对糖原无固定作用。三、固定剂种类【熟练掌握】单纯固定液：三氯醋酸：无色易潮解的结晶体，水溶液为强酸性，易溶于醇和醚。密封于冷处保存。作用与醋酸相似，常在混合固定液应用，可使蛋白质沉淀。Susa液的主要成分一种良好的脱钙剂。三、固定剂种类【熟练掌握】单纯固定液：乙醇：固定浓度80%~95%无色，可与水无限相溶；固定兼脱水作用，固定速度较慢，易使组织变脆；一种还原剂，易氧化为乙醛和醋酸，不能与强氧化剂如铬酸、重铬酸钾和锇酸等混合用于糖原固定，如肝组织、阿米巴原虫和尤文瘤的糖原染色。对纤维蛋白和弹性纤维等固定效果好。渗透力弱，能沉淀白蛋白、球蛋白和核蛋白。但核蛋白经沉淀后，能溶于水，不利于染色体的固定。三、固定剂种类【熟练掌握】单纯固定液：无水乙醇：穿透速度快，可固定糖原，但取材易薄。渗透能力差，使组织收缩，易挥发和吸收空气中的水分，在使用时应盖好容器。可加入一些无水硫酸铜粉末吸取其中水分。高浓度乙醇固定的组织硬化显著，时间过长组织变脆，收缩明显。70%乙醇可较长时间保存组织。50%以上乙醇可溶解脂肪和类脂体，并可溶解血色素，对其它色素也有破坏，因此有上述物质需要确定时，不能用乙醇固定。酒精一般不作常规固定剂，用酒精固定时，常先用80%酒精固定数小时，再换95%酒精继续固定。三、固定剂种类【熟练掌握】混合固定液：B-5固定液即醋酸钠-升汞-甲醛固定液多用于固定淋巴组织染色前应进行脱汞处理配方：无水醋酸钠1.25g、升汞6g、甲醛10ml（用时加入），蒸馏水90ml。如不用甲醛则称为B-4固定液三、固定剂种类【熟练掌握】混合固定液：Bouin氏固定液常规用于外科活检标本固定的良好固定液。用于固定大多数器官和组织，适用于结缔组织染色，尤其是三色染色时更为理想。固定效果好，组织细胞结构完整。细胞核着色鲜明，但细胞质着色较差。对脂肪的固定效果好，尤其适用于含脂肪的淋巴结，乳腺组织和脂肪瘤标本的固定。固定液偏酸，pH3~3.5，对抗原有一定损害，使组织收缩，不适宜于标本的长期保存。三、固定剂种类【熟练掌握】混合固定液：

Bouin氏固定液有毒，避免吸入或与皮肤接触。固定时间12~24h。固定后组织被染成黄色，需用70%~80%酒精洗涤。在酒精中加入饱和碳酸锂水溶液有助于清除组织块的黄色。配方：1、饱和苦味酸水溶液：甲醛水溶液：冰醋酸=15:5:1；2、用前配制：80%酒精150ml、甲醛水溶液60ml、冰醋酸15ml、结晶苦味酸1g。——渗透力强，固定时间约24h，固定后可直接转入95%酒精。三、固定剂种类【熟练掌握】混合固定液：Carnoy氏液固定胞浆和细胞核，对于染色体固定佳，显示DNA和RNA效果好。常用于糖原和尼氏体的固定。不能保存脂类。有防止酒精的硬化和收缩作用，增加渗透力，外膜致密不易渗透的组织可用其固定。固定速度快，3mm厚的组织块1h即可固定，大块材料最好不超过4h配方：冰醋酸10ml、氯仿30ml、无水酒精60ml。三、固定剂种类【熟练掌握】混合固定液：Müller氏液作用缓慢，固定均匀，组织收缩小多用于媒染和硬化神经组织，固定时间可很长（数天到数周）。固定过程中，需常更换新鲜液体。固定后流水冲洗，酒精脱水。配方：重铬酸钾2~2.5g、硫酸钠1.0g、蒸馏水100ml。三、固定剂种类【熟练掌握】混合固定液：PLP液和PLPD液PLP液即过碘酸盐-赖氨酸-多聚甲醛固定液适用于富含糖类组织的固定对细胞结构和抗原性保存好固定时间6~18h三、固定剂种类【熟练掌握】PLP液配方：储存液ApH7.4的0.1mol/L赖氨酸-0.5mol/LNa2HPO4液：赖氨酸盐酸盐1.827g，溶于50ml蒸馏水中，而后加入Na2HPO4至0.1mol/L，将pH调至7.4，用0.1mol/L的PB补足100ml，使赖氨酸浓度也为0.1mol/L，4℃冰箱保存。储存液B8%多聚甲醛液：8g多聚甲醛、100ml蒸馏水。过滤后4℃冰箱保存。临用时，取3份A液和1份B液混合后，加入结晶过碘酸钠，使过碘酸钠终浓度为2%，此时pH为6.2。据认为较好的配比为：0.01mol/L的过碘酸盐、0.075mol/L的赖氨酸、2%的多聚甲醛和0.037mol/L的磷酸缓冲液。三、固定剂种类【熟练掌握】混合固定液：

PLP液和PLPD液PLPD液配方：PLP液25ml、2.5%的重铬酸钾25ml。4℃冰箱固定36~54h。三、固定剂种类【熟练掌握】混合固定液：Zenker液常用固定液固定多种组织，使细胞核和细胞质染色较清晰，常用于三色染色。对免疫球蛋白染色最好用于一些肿瘤标本（如横纹肌肉瘤和恶性畸胎瘤）的固定效果好对于病毒包涵体（如Negri小体）的固定效果也好对于含血量较多的标本不适合固定时间12~36h，加热可加快固定作用三、固定剂种类【熟练掌握】混合固定液：Zenker液固定后流水冲洗12h，在70%酒精脱水时加入碘（配成0.5%碘酒）脱汞。配方：储存液：重铬酸钾2.5g、升汞5g、蒸馏水100ml。用时加入冰醋酸5ml。配制方法：将重铬酸钾和升汞一起加入蒸馏水中，加温40~50℃溶解，冷却过滤后存于棕色瓶内。用时取此液95ml，加入冰醋酸5ml即可。（此液在醋酸加入后可与重铬酸钾作用产生铬酸。铬酸、醋酸和升汞均为染色质的沉淀剂，且铬酸可防止升汞对组织的过度硬化，醋酸可减少铬酸对组织的收缩作用，并可增加固定液的穿透速度。）三、固定剂种类【熟练掌握】混合固定液：

Zenker液此固定液不能用金属容器盛放，组织固定后，也不能用金属镊夹取。进行磷钨酸-苏木精染色的组织应用该固定液固定。此液中的冰醋酸用甲醛代替——Helly液在Zenker储存液中加入10ml甲醛水溶液——Maximow液。三、固定剂种类【熟练掌握】混合固定液：4%多聚甲醛-0.1mol/LPB适用于光镜免疫组织化学方法动物先用此液进行灌注固定，取材后再用该液浸泡固定2~24h也可用于组织标本的较长时间的保存。配方：40g多聚甲醛，溶于1000ml，0.1mol/L的PB液，加热60℃边搅拌边加温至透明即可（一般滴加少量1mol/L的NaOH）。三、固定剂种类【熟练掌握】混合固定液：4%多聚甲醛-磷酸二钠/氢氯化钠液适用于光镜和电镜免疫组织化学方法。用于免疫电镜标本时，应加入新鲜配置的戊二醛，使其终浓度为0.5~1%。——可长期保存组织。配方：甲液-多聚甲醛40g、蒸馏水400ml；乙液-Na2HPO4·2H2O16.88g、蒸馏水300ml；丙液-NaOH3.86g、蒸馏水200ml。先将甲液中多聚甲醛完全溶解，乙液倒入丙液混合后倒入甲液，用1mol/LNaOH或1mol/LHCl将pH调至7.2~7.4.补充蒸馏水至1000ml，充分混合后4℃冰箱保存。三、固定剂种类【熟练掌握】混合固定液：乙醇-甲醛液有脱水作用，固定后可直接入95%乙醇脱水对皮下组织中肥大细胞的固定好。配方：95%乙醇或无水乙醇90ml、40%甲醛10ml。混合固定液：乙醚-酒精液渗透性强，固定效果好，用于细胞涂片等固定配方：95%酒精49.5ml、乙醚49.5ml、冰醋酸1ml。三、固定剂种类【熟练掌握】混合固定液：中性缓冲甲醛液免疫组织化学最常用的固定液，对大多数抗原物质保存较好，对细胞膜的通透性有影响，可能使某些大分子抗原失去活性。对组织穿透性好，组织收缩小固定时间：24h以内为宜配方：40%甲醛10ml、0.01mol/LpH7.4的PBS90ml。三、固定剂种类【熟练掌握】混合固定液：中性甲醛液最常用的固定液之一，固定效果好。配方：40%甲醛120ml、蒸馏水880ml、磷酸二氢钠4g、磷酸氢二钠13g、pH7.0.10%的甲醛中含饱和碳酸钙也称为中性甲醛。三、固定剂种类甲醛液固定组织的原理主要是：（）A.使蛋白质分子发生交联B.DNA降解C.沉淀蛋白质

D.沉淀核酸

E.凝固脂肪【答案】A92高频考题渗透力强，固定均匀，对组织收缩较小的固定剂是：（）A.10%福尔马林B.多聚甲醛C.苦味酸

D.丙酮

E.乙醇【答案】A93高频考题甲醛溶液保存病理大体标本时，不能保留标本的原有颜色可能的原因是：（）A．甲醛使组织收缩B．甲醛使组织硬化C．甲醛破坏血红蛋白D．甲醛破坏白细胞E．甲醛破坏血小板【答案】C高频考题94使用甲醛固定液最好的pH是（）A.6.0B.7.0～7.2C.7.8～8.0D.8.2E.9.0【答案】B【解析】40%的甲醛主要由聚合形式的甲醛构成，严重影响固定效果。10%的甲醛主要由单体形式构成，因此不应使用新鲜非缓冲福尔马林作为固定液，应先用pH7.2的磷酸盐缓冲液配制，或在溶液中加入醋酸钙，使溶液呈中性或弱碱性。高频考题95高频考题要保持细胞内糖原，原则上应选用下列哪种固定剂？（

）A.醋酸B.中性甲醛C.Carnoy固定液D.Bouin固定液E.丙酮【答案】C【解析】Carnoy固定液固定胞质和细胞核，对于染色体固定效果好，显示DNA和RNA效果好。也常用于糖原和尼氏体的固定。糖原贮积症的标本可用此固定，但不能保持脂类。导致福尔马林色素形成的原因是：（）A.与核酸结合

B.交联作用

C.与黏液蛋白结合

D.氧化作用产生蚁酸与血红蛋白结合

E.还原作用【答案】D高频考题97高频考题甲醛属于常用的单纯组织固定液，对其描述下面不正确的是（）。A.长时间固定的标本，形成甲醛色素沉积可用乙醇配氨水去除B.相对而言，甲醛水溶液渗透能力强组织固定均匀C.长时间固定的标本，形成的甲醛色素沉积无法去除，故而组织固定不能时间过长D.甲醛价格较低，可用于固定和保存大体标本E.甲醛固定能保持脂类和类脂类高频考题【解析】甲醛1、渗透强2、价格低，固定大体标本3、长时间固定形成甲醛色素，制片前应充分流水冲洗，也可用乙醇配氨水去除4、可保存脂类（冷冻切片）5、不沉淀白蛋白、核蛋白6、可固定高尔基体、线粒体，是糖的保护剂7、能与蛋白质中许多氨基酸反应【答案】C高频考题关于甲醛固定液的描述不正确的是（）。A.冷冻切片法能保存脂类和类脂体B.甲醛固定液是水溶液渗透能力强C.能与蛋白质中许多氨基酸反应D.能使白蛋白和核蛋白沉淀E.可固定高尔基体、线粒体，是糖的保护剂【答案】D高频考题中性甲醛液不含下列哪种物质？（）A.磷酸氢二钠B.40％甲醛C.磷酸二氢钠D.无水乙醇E.蒸馏水【答案】D高频考题对于重铬酸钾固定剂，对其描述下面不正确的是（）。A.重铬酸钾固定的组织明显收缩B.重铬酸钾为橙红色晶体，有毒C.组织穿透速度快D.用于固定高尔基体和线粒体效果较好E.重铬酸钾固定的组织，酸性染料着色良好高频考题【解析】重铬酸钾固定剂1、有毒。强氧化剂，不能与酒精、甲醛液等事先储藏2、固定高尔基体、线粒体3、能固定脂肪及类脂物，为髓鞘及嗜铬细胞优良的媒染剂4、穿透速度快5、组织几乎不收缩，但经乙醇脱水后明显收缩6、用后，酸性染料着色好7、酸化后可沉淀蛋白质8、配制Zenker、Helly、Maximov、Regaud液【答案】A高频考题关于重铬酸钾固定液的描述哪项正确？（）A.经其固定的组织酸性染料着色较差B.无毒性C.固定高尔基体和线粒体效果良好D.未酸化的重铬酸钾能使蛋白质沉淀E.能与乙醇还原剂混合【答案】C高频考题下列混合固定液不含有重铬酸钾的是（）。A.Bouin液B.Zenker液C.Maximov液D.Helly液E.Regaud液高频考题【解析】A.Bouin液：苦味酸饱和水溶液

75ml

+冰醋酸

5ml+福尔马林

25mlB.Zenker液：重铬酸钾25g+升汞50g+蒸馏水1000ml+冰醋酸50mlC.Maximov液：Zenker贮存液100ml+甲醛（中性）10mlD.Helly液：重铬酸钾25g+升汞50g+蒸馏水1000ml+甲醛50mlE.Regaud液：3%重铬酸钾

80ml+福尔马林

20ml【答案】A高频考题单纯组织固定液易燃易爆，一般应配成饱和溶液储藏的是（）。A.苦味酸B.甲醛C.锇酸D.重铬酸钾E.铬酸高频考题【解析】苦味酸1、配成饱和溶液储藏（易燃易爆）2、沉淀一切蛋白质3、穿透慢4、收缩明显5、不固定脂类6、可软化火棉胶7、不宜超过24h【答案】A高频考题下列哪种固定液易燃易爆，保存要注意？（）A.醋酸B.三氯醋酸C.铬酸D.锇酸E.苦味酸【答案】E高频考题关于苦味酸固定液的描述不正确的是（）。A.不能软化火棉胶B.能沉淀一切蛋白质C.对脂肪和类脂无固定作用D.穿透慢，组织收缩明显E.固定组织时间不宜超过24小时【答案】A高频考题常用于电镜研究的固定剂是：（

）A.80%～90%乙醇

B.10%甲醛

C.1%～2%锇酸

D.0.3%～5%醋酸

E.甲醇

【答案】C【解析】常用于电镜研究的固定剂是1%～2%锇酸。白色或浅黄色单斜结晶。有似氯的辛辣气味。易升华挥发。溶于乙醇、乙醚、苯、氨水和氧氯化磷。剧毒，其蒸气有刺激性。有腐蚀性。高频考题对于升汞固定剂，对其描述下面不正确的是（）。A.升汞穿透力低，只宜固定薄片组织B.单独应用组织收缩明显C.可固定蛋白质D.固定后应进行脱汞和流水彻底清洗E.也可固定类脂和糖类高频考题【解析】升汞1、单独应用收缩显著2、脱汞、流水彻底冲洗3、固定蛋白质4、不固定类脂、糖类5、穿透力低，薄片组织固定6、用其5%~7%饱和水溶液【答案】E高频考题关于升汞固定液的描述不正确的是（）。A.对蛋白质有沉淀作用B.一般用其5％～7％饱和水溶液作为固定剂C.穿透力低，只宜固定薄片组织D.单独使用组织收缩明显E.对类脂和糖类有固定作用【答案】E染色体的固定液多含醋酸，醋酸可清楚地显示细胞核，但醋酸固定的缺点是（）。A.组织膨胀明显，尤其对于胶原纤维和纤维蛋白B.单独应用组织收缩明显C.醋酸穿透力太弱D.不能有效地防止自溶E.不能有效地抑制细菌生长【答案】A【解析】5％醋酸可抑制细菌和酶活性可防自溶，穿透力强，但缺点是组织膨胀明显，尤其对于胶原纤维和纤维蛋白，所以一般很少单独使用。高频考题高频考题用下述哪种单纯固定液固定的组织宜避光保存，以防止蛋白质溶解？（）A.醋酸B.重铬酸钾C.苦味酸D.铬酸E.升汞高频考题【解析】铬酸1、避光保存，防止蛋白质溶解2、强氧化剂，不能与甲醛、酒精混合3、固定蛋白质、核蛋白4、不固定脂类5、穿透力弱（12~24h）6、彻底流水冲洗＞24h【答案】D高频考题对于铬酸固定液的描述不正确的是（）。A.对组织穿透能力弱，一般组织需固定12～24小时B.属于强氧化剂，不能与乙醇、甲醛等混合C.对脂肪有良好的固定作用D.能沉淀蛋白质，核蛋白固定良好E.经其固定的组织必须彻底流水冲洗24小时以上的时间【答案】C高频考题单纯固定液属于剧毒品，是电镜研究的必需固定剂的是（）。A.醋酸B.锇酸C.苦味酸D.三氯醋酸E.升汞高频考题【解析】锇酸1、剧毒2、电镜研究必须3、强氧化剂，不能与甲醛、乙醇混合4、使用前提前几天配制好5、浓度配方依目的而定6、渗透力极弱，组织块应小7、固定线粒体、内质网，脂类最好的固定剂8、溶于有机溶剂9、延长固定时间，组织脆性增加【答案】B高频考题对于锇酸固定液的描述不正确的是（）。A.应用时现用现配B.属于强氧化剂，不能与乙醇、甲醛等混合C.剧毒品，使用时注意防护D.电镜研究的必需固定剂E.固定液浓度和配方依固定目的而不同【答案】A高频考题锇酸固定液的特点描述中，不正确的是（）。A.不溶于乙醇与苯等有机溶剂B.渗透力极弱C.主要为脂类固定剂D.固定的组织块应小E.不能用于线粒体和内质网的固定【答案】E高频考题用锇酸固定液固定组织时，其特点包括（）。A.延长固定时间，组织的脆性减弱，对染色有利B.延长固定时间，组织的脆性增加，对染色有利C.延长固定时间，组织的脆性增加，对染色不利D.缩短固定时间，组织的脆性增加，对染色有利E.缩短固定时间，组织的脆性增加，对染色不利【答案】C高频考题单纯固定液即可使蛋白沉淀，同时也是一种良好的脱钙剂的是（）。A.醋酸B.锇酸C.苦味酸D.三氯醋酸E.乙醇【答案】D【解析】三氯醋酸：1、蛋白质沉淀；2、脱钙剂高频考题下列哪种单纯固定液有固定兼脱水作用？（）A.醋酸B.甲醛C.苦味酸D.三氯醋酸E.乙醇【答案】E高频考题单纯固定液广泛用于酶组织化学方法中的各种酶固定的是（）。A.锇酸B.冷丙酮C.苦味酸D.乙醇E.醋酸高频考题【解析】冷丙酮1、酶组织化学中各种酶固定2、易燃易挥发3、渗透强4、不固定细胞核、糖原5、与水、乙醇、氯仿、乙醚可混合6、作用基本与乙醇相同7、可使蛋白质沉淀8、组织收缩、硬化明显【答案】B高频考题对于丙酮固定液的描述错误的是（）。A.其作用基本与乙醇相同B.可与水、醇、氯仿和醚等混合C.广泛用于酶组织化学中各种酶的固定D.可使蛋白质沉淀，渗透力强，对核的固定差E.对糖原有极好的固定作用【答案】E高频考题欲显示各种酶的组织切片，应选择下列哪种固定液？（）A.95％乙醇B.AF液C.丙酮D.10％中性甲醛E.75％乙醇【答案】C【解析】丙酮的作用是沉淀蛋白质和糖，它对组织穿透性很强，保存抗原的免疫活性的效果较好。高频考题用B-5固定的组织，在染色前应该进行下列哪项处理？（）A.酸化处理B.脱钙处理C.水化处理D.脱汞处理E.脱脂处理高频考题【解析】B-5固定液配制：储备液：氯化汞12g+醋酸钠2.5g+蒸馏水200ml。使用前加2ml甲醛到20ml储备液中。常用于骨髓，淋巴结，脾和其他造血组织的固定。【答案】D高频考题下列哪项是用Bouin固定液固定组织的特点？（）A.细胞质着色鲜明，但细胞核着色较差B.该固定方法适用于标本的长期保存C.细胞核着色鲜明，但细胞质着色较差D.细胞核与细胞质均着色鲜明E.固定后组织被染成黑色高频考题【解析】Bouin固定液1、不适宜长期存放2、核着色鲜明，质着色差3、组织固定后为黄色4、配制：饱和苦味酸:甲醛:冰醋酸=15:5:15、结缔组织染色，特别是三色染色6、渗透迅速、收缩少【答案】C高频考题对于Bouin混合固定液的描述错误的是（）。A.适宜于标本的长期保存B.适用于结缔组织染色C.细胞质着色较差D.细胞核着色鲜明E.对于脂肪的固定效果好【答案】A高频考题Carnoy液除了常用于糖原和尼氏体的固定外，还有下面哪项特点？（）A.该固定液固定速度慢而温和B.该固定方法适用于标本的长期保存C.用于保存脂类D.对于染色体固定佳，显示DNA和RNA效果好E.该固定液渗透力差高频考题【解析】Carnoy固定液1、固定染色体，DNA及RNA2、不固定脂类3、速度快，渗透强（3mm厚组织1小时即可）4、常固定糖原、尼氏体（保留糖原）5、防止乙醇的硬化和收缩作用【答案】D高频考题下面的固定方法渗透力强，3mm的组织1小时即可固定的是（）。A.B-5固定液B.Rossman液C.Orth液D.Müller液E.Carnoy液【答案】E高频考题关于Carnoy固定液的描述不正确的是（）。A.有防止乙醇的硬化和收缩作用B.对于染色体固定好C.能保存脂类D.常用于糖原和尼氏体的固定E.固定速度快【答案】C高频考题要保存细胞内糖原宜用（）。A.Carnoy液B.Bouin液C.Orth液D.Zenker液E.Rossman液【答案】A高频考题下面哪种固定液作用缓慢，需要常更换新鲜液体，固定后流水冲洗？（）A.B-5固定液B.Rossman液C.Carnoy液D.Müller液E.Orth液高频考题【解析】Müller固定液配方：重铬酸钾2.5g+硫酸钠1.0g+蒸馏水100ml特点：作用缓慢，约需数星期，并要多次更换对神经组织有加强染媒作用对一般组织染色无特别好处【答案】D高频考题下面哪种固定液需要现用现配，并且需在暗处固定？（）A.甲醛-钙液B.PLP液和PLPD液C.Orth液D.Müller液E.Zenker液高频考题【解析】Orth固定液1、现配2、暗处固定，24小时3、固定胚胎、神经、脂肪组织4、固定液黑色不能再用5、配方：重铬酸钾20g+蒸馏水1000ml+甲醛100ml，甲醛用时再加【答案】C高频考题可用于胚胎组织、神经组织和脂肪组织的固定液是（）。A.Müller液B.Bouin液C.Orth液D.Carnoy液E.Rossman液【答案】C高频考题PFG固定液多用于（）。A.多用于含血量较多的标本B.脂肪染色研究C.用于病毒包涵体的研究D.免疫电镜研究，因适用于多种肽类抗原的固定E.对尼氏体的研究高频考题【解析】PFG固定液1、配制：对苯醌20g+多聚甲醛15g+25%戊二醛40ml+0.1mol/L二甲酸钠缓冲液至1000ml2、保护抗原、超微结构3、固定多肽类抗原4、免疫电镜的研究【答案】D高频考题PLP液和PLPD液适合于（）。A.胶原纤维和弹性纤维的固定B.富含糖类组织的固定C.富含脂肪组织的固定D.富含钙类组织的固定E.软骨组织的固定高频考题【解析】PLP液和PLPD液1、PLP液（过碘酸盐-赖氨酸-多聚甲醛固定液）2、较适于富含糖类的组织，对超微结构及许多抗原的抗原性保存较好3、含过碘酸钠【答案】B高频考题下面哪种固定液中含有过碘酸钠？（）A.4％多聚甲醛-磷酸二钠／氢氧化钠液B.Zenker液C.PLP液和PLPD液D.PFG液E.Müller液【答案】C高频考题下列哪种溶液适用于富含糖类组织的固定？（）A.PLP液和PLPD液B.B-5固定液C.PFG液D.Bouin液E.Orth液【答案】A高频考题下面哪种混合固定液不适合用于固定含血量较多的标本？（）A.4％多聚甲醛-磷酸二钠／氢氧化钠液B.Zenker液C.PLP液和PLPD液D.PFG液E.乙醚-乙醇液高频考题【解析】Zenker混合固定液1、不固定含血多的组织2、固定免疫球蛋白、嗜铬细胞3、不能接触金属【答案】B【解析】Zenker混合固定液不适合用于固定含血量较多的标本，如充血的脾脏和梗死的肺组织等。高频考题下列哪种溶液是对免疫球蛋白染色最好的固定液？（）A.Zenker液B.Bouin液C.Orth液D.Camoy液E.Rossman液【答案】A高频考题下列哪种组织不适合用Zenker液固定？（）A.肺梗死的标本B.横纹肌肉瘤C.病毒包涵体D.恶性畸胎瘤E.Negri小体【答案】A高频考题不能用金属容器盛放，且组织固定后也不要用金属镊夹取的固定液是（）。A.Carnoy液B.Bouin液C.Orth液D.Zenker液E.Rossman液【答案】D高频考题检查嗜铬细胞宜用下列哪种溶液进行固定？（）A.Carnoy液固定B.Bouin液固定C.Orth液固定D.Zenker液固定【答案】D高频考题通常动物进行灌注固定时，先用下面哪种混合固定液进行灌注，取材后再浸泡在固定液中？（）A.4％多聚甲醛-磷酸二钠／氢氧化钠液B.4％多聚甲醛-0.1mol／L磷酸缓冲液（pH7.3）C.中性甲醛液D.PFG液E.乙醚-乙醇液【答案】B高频考题乙醇-甲醛液固定与脱水二者兼之，其配方是A.85%乙醇90ml+40%甲醛10mlB.90%乙醇90ml+40%甲醛10mlC.95%乙醇90ml+40%甲醛10mlD.80%乙醇90ml+40%甲醛10mlE.75%乙醇90ml+40%甲醛10ml【答案】C【解析】乙醇-甲醛液固定与脱水二者兼之，其配方是95%乙醇90ml+40%甲醛10ml。高频考题对于4％多聚甲醛-磷酸二钠／氢氧化钠混合固定液，下面的描述错误的是（）。A.固定液毒性大，不适合于长期保存组织B.该固定液适用于光镜免疫组织化学C.该固定液用于电镜的免疫组织化学时，应加入新鲜配制的戊二醛D.固定液性质温和，可长期保存组织E.该固定液配制后pH应调至7.2～7.4高频考题【解析】4％多聚甲醛-磷酸二钠／氢氧化钠混合固定液1、适用于光镜免疫组织化学2、用于电镜的免疫组织化学时，加入新鲜配制的戊二醛3、固定液性质温和，可长期保存组织4、pH应调至7.2～7.4高频考题对于4％多聚甲醛-磷酸二钠／氢氧化钠混合固定液，下面的描述错误的是（）。A.固定液毒性大，不适合于长期保存组织B.该固定液适用于光镜免疫组织化学C.该固定液用于电镜的免疫组织化学时，应加入新鲜配制的戊二醛D.固定液性质温和，可长期保存组织E.该固定液配制后pH应调至7.2～7.4【答案】A高频考题用无水乙醇固定组织，更换一次无水乙醇脱水的标本适合（）。A.网状纤维染色B.弹力纤维染色C.神经鞘染色D.胶原纤维染色E.糖原和尿酸盐结晶染色【答案】E【解析】因糖原和尿酸盐结晶易溶于水高频考题对于要进行糖原尿酸盐结晶染色的标本其乙醇固定液浓度是（）。A.90％乙醇B.70％乙醇C.80％乙醇D.75％乙醇E.100％乙醇【答案】E高频考题对于乙醇固定液的描述哪项正确？（）A.属于氧化剂，易还原B.乙醇是一种氧化剂C.具有固定兼脱水作用D.固定速度快，不易使组织变脆E.可以与铬酸、锇酸等混合【答案】C高频考题下列哪种组织不能用乙醇固定？（）A.纤维蛋白和弹力纤维B.肝组织C.尤因肉瘤D.阿米巴原虫E.含血红蛋白等色素的组织【答案】E高频考题用下列固定液固定的组织一般不可冲洗的是（）。A.氯化汞B.重铬酸钾C.苦味酸D.铬酸E.乙醇【答案】E高频考题下列哪种混合固定液虽有氧化剂和还原剂，但可以临用时配制，久置后则失效？（）A.Carnoy液B.Bouin液C.Helly液D.Zenker液E.Rossman液【答案】C【解析】Helly固定液要求现用现配高频考题下列不属于固定液的是（）A.中性甲醛B.丙酮C.正丁醇D.A-F液E.Zenker液【答案】C【解析】正丁醇不属于固定液，可用于脱水兼透明高频考题（共用备选答案）A.Müller液B.B-5固定液C.Rossman液D.Bouin固定液E.Orth液可用于胚胎组织、神经组织和脂肪组织固定（E）对糖原固定好（C）多用于固定淋巴组织（B）多用于硬化神经组织的固定（A）适用于结缔组织染色，尤其是三色染色时更为理想（D）高频考题【解析】Müller液：对神经组织有加强染媒作用B-5固定液：常用于骨髓，淋巴结，脾和其他造血组织的固定Rossman液：糖原Bouin固定液：结缔组织染色，特别是三色染色Orth液：胚胎、神经、脂肪组织PFG液：适用于多种肽类抗原的固定，多用于免疫电镜研究高频考题（共用备选答案）A.甲醛-钙液B.乙醚-乙醇液C.中性缓冲甲醛液D.乙醇-甲醛液E.丙酮特别适用于固定脂肪组织和组织化学染色（A）有固定和脱水作用（D）固定渗透性强，固定效果好，用于细胞涂片等固定（B）是免疫组织化学最常用的固定液，对组织穿透性好，组织收缩小（C）用于酶组织化学中各种酶的固定（E）高频考题【解析】甲醛-钙液：脂肪组织、组织化学染色乙醚-乙醇液：细胞涂片中性缓冲甲醛液：免疫组织化学最常用乙醇-甲醛液：固定+脱水，肥大细胞丙酮：酶组织化学中各种酶固定4％多聚甲醛-磷酸二钠/氢氧化钠：适用于光镜和电镜免疫组织化学方法【掌握】四氯呋喃、环已酮、松酯醇【熟练掌握】脱水、脱水剂、酒精、丙酮、异丙醇、正丁醇、环氧已烷四、组织的脱水和脱水剂【掌握】四氯呋喃易与水、乙醚、氯仿、丙酮和苯类混溶对组织渗透快，而收缩及硬化作用较小易挥发，无毒可用作封片溶剂，对染料不溶，常规制片时基本不用四、组织的脱水和脱水剂【掌握】环已酮无毒与苯、二甲苯、氯仿和石蜡混合可代替无水酒精脱水后直接浸蜡，组织块不会变硬四、组织的脱水和脱水剂【掌握】松酯醇可取代无水酒精用作脱水剂和随后的浸透与包埋四、组织的脱水和脱水剂【熟练掌握】脱水、脱水剂脱水：组织经固定和水洗后含大量水分，水与石蜡不能混合，因此在浸蜡和包埋前，必须进行脱水。脱水是借某些溶酶置换组织内水分的过程。脱水剂必须能与水以任意比例混合，至于选用何种脱水剂，应根据固定剂的要求，不要任意选用。四、组织的脱水和脱水剂【熟练掌握】酒精最常用脱水能力较强，并可使组织硬化穿透速度很快，对组织有较明显的收缩作用，故脱水时从低浓度开始：70%-80%-90%-95%-无水酒精。少数柔嫩组织从50%或30%开始。如进行糖原和尿酸盐结晶染色的标本，应直接用无水酒精四、组织的脱水和脱水剂经无水酒精固定的组织，更换一次无水酒精脱水即可。组织块在纯酒精中放置时间不宜过长，防止组织过度硬化造成切片困难。四、组织的脱水和脱水剂脱水时间与组织块大小有关：对于1.5cm×1.5cm×0.2~0.3cm的组织块：70%酒精数分钟，80%、95%、95%、100%、100%酒精各2~4h，加温可缩短脱水时间。小组织块：80%~100%酒精30~45min即可，（结构紧密的组织或大块组织不可用此法）脂肪组织和疏松结缔组织应延长脱水时间，在95%酒精中水分必须洗净，脂肪必须溶解掉，否则石蜡不能渗入脂肪细胞和纤维组织，无法切片及染色时易脱片。，且蜡块干燥后出现凹陷。四、组织的脱水和脱水剂【熟练掌握】丙酮脱水作用与酒精相似，但对组织块的收缩作用比酒精更严重，因此很少单独应用。在快速脱水或固定兼脱水时有时应用。脱水时间：约1~3h丙酮可作为染色后的脱水剂，用于DNA和RNA染色。四、组织的脱水和脱水剂【熟练掌握】异丙醇酒精的良好代用品，不含水，可代替无水酒精使用。脱水后组织收缩小，对组织的硬化作用也较弱。对火棉胶和染料不溶，因此不能用于火棉胶包埋和染料配制。在常规制片中很少应用。四、组织的脱水和脱水剂【熟练掌握】正丁醇是无色液体，脱水能力较弱，可和水、酒精和石蜡混合，因此这种脱水的组织块可直接浸蜡和包埋。叔丁醇无毒，可与水、酒精、二甲苯混合。可单独使用，也可与酒精混合使用，是目前常用的一种脱水剂。与正丁醇相比，它不易使组织收缩或变硬，而且脱水后可不经透明直接浸蜡，浸蜡前先经过叔丁醇和石蜡1:1混合液。电镜标本制作时常用作中间脱水剂。四、组织的脱水和脱水剂【熟练掌握】环氧已烷能与水和酒精混合，也能溶解石蜡，可代替酒精进行脱水，也可代替二甲苯进行透明，不引起组织收缩和硬化，用于制备植物标本较好。与正丁醇一样，都均易挥发，而且价格较高，目前很少用于制作大量切片四、组织的脱水和脱水剂高频考题组织固定、水洗后含大量水分，进行脱水处理是因为（）。A.水与石蜡不能混合，因此在浸蜡和包埋前必须进行脱水B.水可以影响组织细微结构，在浸蜡和包埋前必须先脱水C.含水的组织时间长可引起细胞膜破裂，在浸蜡和包埋前必须先脱水D.水含量多时，组织软影响切片，在浸蜡和包埋前必须先脱水E.水可以影响细胞的着色，因此在浸蜡和包埋前必须进行脱水【答案】A高频考题【解析】组织经固定和水洗后含大量水分，而水和石蜡不能混合，因此在浸蜡和包埋前必须进行脱水。脱水是借某些溶媒置换组织内水分的过程，脱水剂必须能与水以任意比例混合，至于选用何种脱水剂，应根据固定剂的要求选择，而不是根据被固定组织的要求选择。乙醇是最常用的脱水剂。高频考题组织脱水时通常乙醇的正确浓度顺序是（）。A.70％—80％—85％—95％—100％B.70％—75％—80％—90％—100％C.70％—80％—85％—90％—100％D.70％—75％—85％—90％—100％E.70％—80％—90％—95％—100％【答案】E高频考题组织固定后用乙醇脱水，下面的描述错误的是（）。A.用乙醇脱水应从低浓度开始B.脱水能力强，并且可硬化组织C.组织块在纯乙醇中放置时间越长脱水效果好，尽量在纯乙醇中长时间放置D.穿透速度快，对组织有较明显的收缩作用E.在温箱加热可缩短脱水时间【答案】C【解析】乙醇脱水1、为了减少组织材料的急剧收缩，应使用